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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6ha8 | |||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the ABCF protein VmlR bound to the Bacillus subtilis ribosome | |||||||||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / single particle cryo-EM / ABCF / ATPase / antibiotic resistiance | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of rRNA processing / nucleoid / rescue of stalled ribosome / rRNA processing / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit ...positive regulation of rRNA processing / nucleoid / rescue of stalled ribosome / rRNA processing / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / response to antibiotic / mRNA binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Bacillus subtilis (枯草菌) Escherichia coli (大腸菌) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Crowe-McAuliffe, C. / Graf, M. / Huter, P. / Abdelshahid, M. / Novacek, J. / Wilson, D.N. | |||||||||||||||
資金援助 | ドイツ, チェコ, 4件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2018 タイトル: Structural basis for antibiotic resistance mediated by the ABCF ATPase VmlR. 著者: Caillan Crowe-McAuliffe / Michael Graf / Paul Huter / Hiraku Takada / Maha Abdelshahid / Jiří Nováček / Victoriia Murina / Gemma C Atkinson / Vasili Hauryliuk / Daniel N Wilson / 要旨: Many Gram-positive pathogenic bacteria employ ribosomal protection proteins (RPPs) to confer resistance to clinically important antibiotics. In , the RPP VmlR confers resistance to lincomycin (Lnc) ...Many Gram-positive pathogenic bacteria employ ribosomal protection proteins (RPPs) to confer resistance to clinically important antibiotics. In , the RPP VmlR confers resistance to lincomycin (Lnc) and the streptogramin A (S) antibiotic virginiamycin M (VgM). VmlR is an ATP-binding cassette (ABC) protein of the F type, which, like other antibiotic resistance (ARE) ABCF proteins, is thought to bind to antibiotic-stalled ribosomes and promote dissociation of the drug from its binding site. To investigate the molecular mechanism by which VmlR confers antibiotic resistance, we have determined a cryo-electron microscopy (cryo-EM) structure of an ATPase-deficient VmlR-EQ mutant in complex with a ErmDL-stalled ribosomal complex (SRC). The structure reveals that VmlR binds within the E site of the ribosome, with the antibiotic resistance domain (ARD) reaching into the peptidyltransferase center (PTC) of the ribosome and a C-terminal extension (CTE) making contact with the small subunit (SSU). To access the PTC, VmlR induces a conformational change in the P-site tRNA, shifting the acceptor arm out of the PTC and relocating the CCA end of the P-site tRNA toward the A site. Together with microbiological analyses, our study indicates that VmlR allosterically dissociates the drug from its ribosomal binding site and exhibits specificity to dislodge VgM, Lnc, and the pleuromutilin tiamulin (Tia), but not chloramphenicol (Cam), linezolid (Lnz), nor the macrolide erythromycin (Ery). | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6ha8.cif.gz | 3.2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6ha8.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 6ha8.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6ha8_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6ha8_full_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6ha8_validation.xml.gz | 219.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6ha8_validation.cif.gz | 380.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ha/6ha8 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ha/6ha8 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 AB7ax
#1: RNA鎖 | 分子量: 949646.312 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: GenBank: 467326 |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 36157.520 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: GenBank: 1150402534 |
#31: RNA鎖 | 分子量: 872.556 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
#33: RNA鎖 | 分子量: 503369.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: GenBank: 225184640 |
#53: RNA鎖 | 分子量: 24199.311 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) |
+50S ribosomal protein ... , 28種, 28分子 CDEFGJKLMNOPQRSTUWXYZ0123468
-タンパク質 , 1種, 1分子 V
#20: タンパク質 | 分子量: 60272.344 Da / 分子数: 1 / Mutation: Q129E, Q432E / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) 遺伝子: expZ, BSU05610 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P39115 |
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-30S ribosomal protein ... , 19種, 19分子 bcdefghijklmnopqrst
#34: タンパク質 | 分子量: 28009.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21464 |
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#35: タンパク質 | 分子量: 24364.887 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21465 |
#36: タンパク質 | 分子量: 22874.271 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21466 |
#37: タンパク質 | 分子量: 17650.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21467 |
#38: タンパク質 | 分子量: 11140.548 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21468 |
#39: タンパク質 | 分子量: 17915.879 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21469 |
#40: タンパク質 | 分子量: 14901.427 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P12879 |
#41: タンパク質 | 分子量: 14335.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21470 |
#42: タンパク質 | 分子量: 11687.661 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21471 |
#43: タンパク質 | 分子量: 13952.000 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P04969 |
#44: タンパク質 | 分子量: 15248.736 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21472 |
#45: タンパク質 | 分子量: 13818.085 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P20282 |
#46: タンパク質 | 分子量: 7263.803 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P12878 |
#47: タンパク質 | 分子量: 10597.224 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21473 |
#48: タンパク質 | 分子量: 10153.833 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21474 |
#49: タンパク質 | 分子量: 10220.979 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P12874 |
#50: タンパク質 | 分子量: 8990.613 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21475 |
#51: タンパク質 | 分子量: 10607.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21476 |
#52: タンパク質 | 分子量: 9622.217 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Bacillus subtilis (strain 168) (枯草菌) / 参照: UniProt: P21477 |
-非ポリマー , 2種, 3分子
#54: 化合物 | ChemComp-TEL / |
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#55: 化合物 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.8 | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 1.425 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 28972 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL |