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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6782 | |||||||||||||||
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タイトル | GDP-microtubule complexed with KIF5C in ATP state | |||||||||||||||
![]() | KIF5C(ATP) and Microtubule(GDP) | |||||||||||||||
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機能・相同性 | ![]() 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / mitotic cell cycle / microtubule / hydrolase activity / GTPase activity / GTP binding / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | |||||||||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.0 Å | |||||||||||||||
![]() | Morikawa M / Shigematsu H / Nitta R / Hirokawa N | |||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Kinesin-binding-triggered conformation switching of microtubules contributes to polarized transport. 著者: Tomohiro Shima / Manatsu Morikawa / Junichi Kaneshiro / Taketoshi Kambara / Shinji Kamimura / Toshiki Yagi / Hiroyuki Iwamoto / Sotaro Uemura / Hideki Shigematsu / Mikako Shirouzu / Taro ...著者: Tomohiro Shima / Manatsu Morikawa / Junichi Kaneshiro / Taketoshi Kambara / Shinji Kamimura / Toshiki Yagi / Hiroyuki Iwamoto / Sotaro Uemura / Hideki Shigematsu / Mikako Shirouzu / Taro Ichimura / Tomonobu M Watanabe / Ryo Nitta / Yasushi Okada / Nobutaka Hirokawa / ![]() ![]() 要旨: Kinesin-1, the founding member of the kinesin superfamily of proteins, is known to use only a subset of microtubules for transport in living cells. This biased use of microtubules is proposed as the ...Kinesin-1, the founding member of the kinesin superfamily of proteins, is known to use only a subset of microtubules for transport in living cells. This biased use of microtubules is proposed as the guidance cue for polarized transport in neurons, but the underlying mechanisms are still poorly understood. Here, we report that kinesin-1 binding changes the microtubule lattice and promotes further kinesin-1 binding. This high-affinity state requires the binding of kinesin-1 in the nucleotide-free state. Microtubules return to the initial low-affinity state by washing out the binding kinesin-1 or by the binding of non-hydrolyzable ATP analogue AMPPNP to kinesin-1. X-ray fiber diffraction, fluorescence speckle microscopy, and second-harmonic generation microscopy, as well as cryo-EM, collectively demonstrated that the binding of nucleotide-free kinesin-1 to GDP microtubules changes the conformation of the GDP microtubule to a conformation resembling the GTP microtubule. | |||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 28.6 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 15 KB 15 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 310.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | KIF5C(ATP) and Microtubule(GDP) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.284 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : GDP-microtubule complexed with KIF5C in ATP state
全体 | 名称: GDP-microtubule complexed with KIF5C in ATP state |
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要素 |
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-超分子 #1: GDP-microtubule complexed with KIF5C in ATP state
超分子 | 名称: GDP-microtubule complexed with KIF5C in ATP state / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() 組換プラスミド: pET21b |
-分子 #1: Tubulin alpha-1A chain
分子 | 名称: Tubulin alpha-1A chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 9 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 48.638793 KDa |
配列 | 文字列: RECISIHVGQ AGVQIGNACW ELYCLEHGIQ PDGQMPSDKT IGGGDDSFNT FFSETGAGKH VPRAVFVDLE PTVIDEVRTG TYRQLFHPE QLITGKEDAA NNYARGHYTI GKEIIDLVLD RIRKLADQCT GLQGFSVFHS FGGGTGSGFT SLLMERLSVD Y GKKSKLEF ...文字列: RECISIHVGQ AGVQIGNACW ELYCLEHGIQ PDGQMPSDKT IGGGDDSFNT FFSETGAGKH VPRAVFVDLE PTVIDEVRTG TYRQLFHPE QLITGKEDAA NNYARGHYTI GKEIIDLVLD RIRKLADQCT GLQGFSVFHS FGGGTGSGFT SLLMERLSVD Y GKKSKLEF SIYPAPQVST AVVEPYNSIL TTHTTLEHSD CAFMVDNEAI YDICRRNLDI ERPTYTNLNR LIGQIVSSIT AS LRFDGAL NVDLTEFQTN LVPYPRGHFP LATYAPVISA EKAYHEQLSV AEITNACFEP ANQMVKCDPR HGKYMACCLL YRG DVVPKD VNAAIATIKT KRTIQFVDWC PTGFKVGINY EPPTVVPGGD LAKVQRAVCM LSNTTAIAEA WARLDHKFDL MYAK RAFVH WYVGEGMEEG EFSEAREDMA ALEKDYEEVG VDS |
-分子 #2: Tubulin beta chain
分子 | 名称: Tubulin beta chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 9 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 47.809746 KDa |
配列 | 文字列: REIVHIQAGQ CGNQIGAKFW EVISDEHGID PTGSYHGDSD LQLERINVYY NEAAGNKYVP RAILVDLEPG TMDSVRSGPF GQIFRPDNF VFGQSGAGNN WAKGHYTEGA ELVDSVLDVV RKESESCDCL QGFQLTHSLG GGTGSGMGTL LISKIREEYP D RIMNTFSV ...文字列: REIVHIQAGQ CGNQIGAKFW EVISDEHGID PTGSYHGDSD LQLERINVYY NEAAGNKYVP RAILVDLEPG TMDSVRSGPF GQIFRPDNF VFGQSGAGNN WAKGHYTEGA ELVDSVLDVV RKESESCDCL QGFQLTHSLG GGTGSGMGTL LISKIREEYP D RIMNTFSV VPSPKVSDTV VEPYNATLSV HQLVENTDET YCIDNEALYD ICFRTLKLTT PTYGDLNHLV SATMSGVTTC LR FPGQLNA DLRKLAVNMV PFPRLHFFMP GFAPLTSRGS QQYRALTVPE LTQQMFDAKN MMAACDPRHG RYLTVAAVFR GRM SMKEVD EQMLNVQNKN SSYFVEWIPN NVKTAVCDIP PRGLKMSATF IGNSTAIQEL FKRISEQFTA MFRRKAFLHW YTGE GMDEM EFTEAESNMN DLVSEYQQYQ D |
-分子 #3: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
分子 | 名称: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 9 / 式: GTP |
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分子量 | 理論値: 523.18 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-GTP: |
-分子 #4: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 9 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #5: GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE
分子 | 名称: GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 9 / 式: GDP |
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分子量 | 理論値: 443.201 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-GDP: |
-分子 #6: water
分子 | 名称: water / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 36 / 式: HOH |
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分子量 | 理論値: 18.015 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-HOH: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 300 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 8.70662 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: -25.7619 ° 想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称) 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 6.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 14302 |
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初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP EMDB ID: |
最終 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | ![]() PDB-5xxw: |