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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 5mqf | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | Cryo-EM structure of a human spliceosome activated for step 2 of splicing (C* complex) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / Spliceosome / pre-mRNA splicing / macromolecular complex | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報negative regulation of selenocysteine incorporation / cellular response to selenite ion / regulation of nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / exon-exon junction complex / selenocysteine insertion sequence binding / regulation of translation at postsynapse, modulating synaptic transmission / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / 3'-5' RNA helicase activity / U2 snRNP binding ...negative regulation of selenocysteine incorporation / cellular response to selenite ion / regulation of nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / exon-exon junction complex / selenocysteine insertion sequence binding / regulation of translation at postsynapse, modulating synaptic transmission / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / 3'-5' RNA helicase activity / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / U7 snRNP / Z-decay: degradation of maternal mRNAs by zygotically expressed factors / histone pre-mRNA 3'end processing complex / regulation of vitamin D receptor signaling pathway / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / Deadenylation of mRNA / negative regulation of excitatory postsynaptic potential / embryonic cranial skeleton morphogenesis / alternative mRNA splicing, via spliceosome / protein methylation / poly(A) binding / 7-methylguanosine cap hypermethylation / embryonic brain development / U12-type spliceosomal complex / nuclear retinoic acid receptor binding / U1 snRNP binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / methylosome / pre-mRNA binding / ATP-dependent activity, acting on RNA / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / C2H2 zinc finger domain binding / pICln-Sm protein complex / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / M-decay: degradation of maternal mRNAs by maternally stored factors / RNA splicing, via transesterification reactions / mRNA 3'-end processing / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / host-mediated activation of viral transcription / P granule / positive regulation of vitamin D receptor signaling pathway / snRNP binding / commitment complex / U2-type precatalytic spliceosome / mRNA cis splicing, via spliceosome / oocyte development / telomerase holoenzyme complex / Regulation of gene expression in late stage (branching morphogenesis) pancreatic bud precursor cells / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / Notch binding / RUNX3 regulates NOTCH signaling / telomerase RNA binding / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / U2-type spliceosomal complex / nuclear vitamin D receptor binding / NOTCH4 Intracellular Domain Regulates Transcription / U1 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / U2 snRNP / U4 snRNP / NOTCH3 Intracellular Domain Regulates Transcription / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / U2-type prespliceosome / positive regulation of neurogenesis / protein peptidyl-prolyl isomerization / inner cell mass cell proliferation / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / ubiquitin-ubiquitin ligase activity / nuclear androgen receptor binding / cyclosporin A binding / precatalytic spliceosome / Notch-HLH transcription pathway / Formation of paraxial mesoderm / WD40-repeat domain binding / lipid biosynthetic process / positive regulation of transforming growth factor beta receptor signaling pathway / SMAD binding / mitotic G2 DNA damage checkpoint signaling / mRNA Splicing - Minor Pathway / spliceosomal complex assembly / exploration behavior / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / Prp19 complex / U5 snRNP / associative learning / U5 snRNA binding / blastocyst development / intrinsic apoptotic signaling pathway in response to DNA damage by p53 class mediator / pre-mRNA intronic binding / embryonic organ development / spliceosomal snRNP assembly / U6 snRNA binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.9 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Bertram, K. / Hartmuth, K. / Kastner, B. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2017タイトル: Cryo-EM structure of a human spliceosome activated for step 2 of splicing. 著者: Karl Bertram / Dmitry E Agafonov / Wen-Ti Liu / Olexandr Dybkov / Cindy L Will / Klaus Hartmuth / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Holger Stark / Reinhard Lührmann / ![]() 要旨: Spliceosome rearrangements facilitated by RNA helicase PRP16 before catalytic step two of splicing are poorly understood. Here we report a 3D cryo-electron microscopy structure of the human ...Spliceosome rearrangements facilitated by RNA helicase PRP16 before catalytic step two of splicing are poorly understood. Here we report a 3D cryo-electron microscopy structure of the human spliceosomal C complex stalled directly after PRP16 action (C*). The architecture of the catalytic U2-U6 ribonucleoprotein (RNP) core of the human C* spliceosome is very similar to that of the yeast pre-Prp16 C complex. However, in C* the branched intron region is separated from the catalytic centre by approximately 20 Å, and its position close to the U6 small nuclear RNA ACAGA box is stabilized by interactions with the PRP8 RNase H-like and PRP17 WD40 domains. RNA helicase PRP22 is located about 100 Å from the catalytic centre, suggesting that it destabilizes the spliced mRNA after step two from a distance. Comparison of the structure of the yeast C and human C* complexes reveals numerous RNP rearrangements that are likely to be facilitated by PRP16, including a large-scale movement of the U2 small nuclear RNP. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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| PDBx/mmCIF形式 | 5mqf.cif.gz | 1.6 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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| PDB形式 | pdb5mqf.ent.gz | 1 MB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 5mqf.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/mq/5mqf ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/mq/5mqf | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-タンパク質 , 14種, 15分子 ABCDFLOQRSUfmpq
| #1: タンパク質 | 分子量: 273974.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q6P2Q9 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 109560.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15029 | ||||
| #3: タンパク質 | 分子量: 61610.703 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q13573 | ||||
| #4: タンパク質 | 分子量: 57379.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43660 | ||||
| #6: タンパク質 | 分子量: 39359.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96DI7 | ||||
| #9: タンパク質 | 分子量: 92406.883 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q99459 | ||||
| #12: タンパク質 | 分子量: 100610.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BZJ0 | ||||
| #14: タンパク質 | 分子量: 17032.850 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P41223 | ||||
| #15: タンパク質 | 分子量: 26674.447 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9P013 | ||||
| #16: タンパク質 | 分子量: 300255.312 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UQ35 | ||||
| #18: タンパク質 | 分子量: 173003.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O60306 | ||||
| #27: タンパク質 | 分子量: 24642.131 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P14678#30: タンパク質 | | 分子量: 46930.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P38919, RNA helicase#31: タンパク質 | | 分子量: 139251.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q14562, RNA helicase |
-Pre-mRNA-processing factor ... , 2種, 5分子 EGHIJ
| #5: タンパク質 | 分子量: 65612.180 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O60508 |
|---|---|
| #7: タンパク質 | 分子量: 55245.547 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト)参照: UniProt: Q9UMS4, 合成酵素; C-N結合を形成; 酸-D-アミノ酸リガーゼ(ペプチド合成) |
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 5種, 5分子 KMNPT
| #8: タンパク質 | 分子量: 26163.420 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75934 |
|---|---|
| #10: タンパク質 | 分子量: 100148.711 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9HCS7 |
| #11: タンパク質 | 分子量: 28780.518 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O95926 |
| #13: タンパク質 | 分子量: 46959.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NW64 |
| #17: タンパク質 | 分子量: 105646.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9HCG8 |
-Peptidyl-prolyl cis-trans ... , 2種, 2分子 Vo
| #19: タンパク質 | 分子量: 18257.805 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y3C6, peptidylprolyl isomerase |
|---|---|
| #29: タンパク質 | 分子量: 33475.773 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UNP9, peptidylprolyl isomerase |
-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 WX
| #20: タンパク質 | 分子量: 28484.592 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P09661 |
|---|---|
| #21: タンパク質 | 分子量: 25524.367 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P08579 |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 ahbicjdkelgn
| #22: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62316#23: タンパク質 | 分子量: 9734.171 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62306#24: タンパク質 | 分子量: 10817.601 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62304#25: タンパク質 | 分子量: 8508.084 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62308#26: タンパク質 | 分子量: 13940.308 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62318#28: タンパク質 | 分子量: 13310.653 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62314 |
|---|
-RNA鎖 , 2種, 3分子 YZ2
| #32: RNA鎖 | 分子量: 104019.172 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト)#33: RNA鎖 | | 分子量: 60186.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36516 |
|---|
-Homo sapiens ... , 2種, 2分子 56
| #34: RNA鎖 | 分子量: 36908.668 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36515 |
|---|---|
| #35: RNA鎖 | 分子量: 34098.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 161087014 |
-詳細
| Has protein modification | N |
|---|
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
| 構成要素 | 名称: Human C* Spliceosome, masked refinement / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 緩衝液 | pH: 6.4 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 湿度: 80 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm |
| 撮影 | 電子線照射量: 2.1 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
| 画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 17 / 利用したフレーム数/画像: 2-17 |
-
解析
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
|---|---|
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
| 3次元再構成 | 解像度: 5.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 136534 / 対称性のタイプ: POINT |
| 原子モデル構築 | 空間: REAL |
ムービー
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万見について




Homo sapiens (ヒト)
ドイツ, 1件
引用
UCSF Chimera









PDBj














































