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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5684 | |||||||||
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タイトル | Molecular structure of the native influenza hemagglutinin H1 on virions complexed with broadly neutralizing stem antibody C179 | |||||||||
マップデータ | Reconstruction of H1 with C179 antibody (spherical virions) | |||||||||
試料 |
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キーワード | hemagglutinin / cryoelectron microscopy / influenza vaccine / epitope | |||||||||
生物種 | Influenza A virus (A/California/07/2009(H1N1)) (A型インフルエンザウイルス) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Harris AK / Meyerson JR / Matsuoka Y / Kuybeda O / Moran A / Bliss D / Das SR / Yewdell JW / Sapiro G / Subbarao K / Subramaniam S | |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2013 タイトル: Structure and accessibility of HA trimers on intact 2009 H1N1 pandemic influenza virus to stem region-specific neutralizing antibodies. 著者: Audray K Harris / Joel R Meyerson / Yumiko Matsuoka / Oleg Kuybeda / Amy Moran / Donald Bliss / Suman R Das / Jonathan W Yewdell / Guillermo Sapiro / Kanta Subbarao / Sriram Subramaniam / 要旨: Rapid antigenic variation of HA, the major virion surface protein of influenza A virus, remains the principal challenge to the development of broader and more effective vaccines. Some regions of HA, ...Rapid antigenic variation of HA, the major virion surface protein of influenza A virus, remains the principal challenge to the development of broader and more effective vaccines. Some regions of HA, such as the stem region proximal to the viral membrane, are nevertheless highly conserved across strains and among most subtypes. A fundamental question in vaccine design is the extent to which HA stem regions on the surface of the virus are accessible to broadly neutralizing antibodies. Here we report 3D structures derived from cryoelectron tomography of HA on intact 2009 H1N1 pandemic virions in the presence and absence of the antibody C179, which neutralizes viruses expressing a broad range of HA subtypes, including H1, H2, H5, H6, and H9. By fitting previously derived crystallographic structures of trimeric HA into the density maps, we deduced the locations of the molecular surfaces of HA involved in interaction with C179. Using computational methods to distinguish individual unliganded HA trimers from those that have bound C179 antibody, we demonstrate that ∼75% of HA trimers on the surface of the virus have C179 bound to the stem domain. Thus, despite their close packing on the viral membrane, the majority of HA trimers on intact virions are available to bind anti-stem antibodies that target conserved HA epitopes, establishing the feasibility of universal influenza vaccines that elicit such antibodies. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5684.map.gz | 1.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5684-v30.xml emd-5684.xml | 9.4 KB 9.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5684_1.jpg | 66.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5684 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5684 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5684_validation.pdf.gz | 79.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5684_full_validation.pdf.gz | 78.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5684_validation.xml.gz | 500 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5684 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5684 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5684.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Reconstruction of H1 with C179 antibody (spherical virions) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : H1 hemagglutinin A/California/7/2009 (H1N1) C179 antibody
全体 | 名称: H1 hemagglutinin A/California/7/2009 (H1N1) C179 antibody |
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要素 |
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-超分子 #1000: H1 hemagglutinin A/California/7/2009 (H1N1) C179 antibody
超分子 | 名称: H1 hemagglutinin A/California/7/2009 (H1N1) C179 antibody タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: trimer / Number unique components: 3 |
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-分子 #1: influenza envelope glycoprotein hemagglutinin (HA)
分子 | 名称: influenza envelope glycoprotein hemagglutinin (HA) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: influenza surface spike / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Influenza A virus (A/California/07/2009(H1N1)) (A型インフルエンザウイルス) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: PBS buffer, 3 mg/mL C179 antibody |
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グリッド | 詳細: Quantifoil Multi-A, 200 mesh |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: Gatan エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20.0 eV |
日付 | 2010年9月6日 |
撮影 | カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GENERIC CCD / 平均電子線量: 100 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 倍率(公称値): 34000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Min angle: -60 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 60 ° |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Average number of tilts used in the 3D reconstructions: 61. Average tomographic tilt angle increment: 2. |
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最終 再構成 | ソフトウェア - 名称: IMOD / 使用したサブトモグラム数: 317 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |