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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4aod | ||||||
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タイトル | Biomphalaria glabrata Acetylcholine-binding protein type 1 (BgAChBP1) | ||||||
要素 | ACETYLCHOLINE-BINDING PROTEIN TYPE 1 | ||||||
キーワード | ACETYLCHOLINE-BINDING PROTEIN / LIGAND GATED ION CHANNEL / LGIC / CYS-LOOP RECEPTOR / ACHBP / ACETYLCHOLINE BINDING PROTEIN / ACETYLCHOLINE / ACHR / ACETYLCHOLINE RECEPTOR / MYASTHENIA GRAVIS / NICOTINIC / DODECAHEDRON / SCHISTOSOMA MANSONI / BILHARZIOSIS / SNAIL | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 excitatory extracellular ligand-gated monoatomic ion channel activity / transmitter-gated monoatomic ion channel activity involved in regulation of postsynaptic membrane potential / transmembrane signaling receptor activity / postsynapse / neuron projection / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | BIOMPHALARIA GLABRATA (無脊椎動物) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6 Å | ||||||
データ登録者 | Saur, M. / Moeller, V. / Kapetanopoulos, K. / Braukmann, S. / Gebauer, W. / Tenzer, S. / Markl, J. | ||||||
引用 | ジャーナル: PLoS One / 年: 2012 タイトル: Acetylcholine-binding protein in the hemolymph of the planorbid snail Biomphalaria glabrata is a pentagonal dodecahedron (60 subunits). 著者: Michael Saur / Vanessa Moeller / Katharina Kapetanopoulos / Sandra Braukmann / Wolfgang Gebauer / Stefan Tenzer / Jürgen Markl / 要旨: Nicotinic acetylcholine receptors (nAChR) play important neurophysiological roles and are of considerable medical relevance. They have been studied extensively, greatly facilitated by the gastropod ...Nicotinic acetylcholine receptors (nAChR) play important neurophysiological roles and are of considerable medical relevance. They have been studied extensively, greatly facilitated by the gastropod acetylcholine-binding proteins (AChBP) which represent soluble structural and functional homologues of the ligand-binding domain of nAChR. All these proteins are ring-like pentamers. Here we report that AChBP exists in the hemolymph of the planorbid snail Biomphalaria glabrata (vector of the schistosomiasis parasite) as a regular pentagonal dodecahedron, 22 nm in diameter (12 pentamers, 60 active sites). We sequenced and recombinantly expressed two ∼25 kDa polypeptides (BgAChBP1 and BgAChBP2) with a specific active site, N-glycan site and disulfide bridge variation. We also provide the exon/intron structures. Recombinant BgAChBP1 formed pentamers and dodecahedra, recombinant BgAChBP2 formed pentamers and probably disulfide-bridged di-pentamers, but not dodecahedra. Three-dimensional electron cryo-microscopy (3D-EM) yielded a 3D reconstruction of the dodecahedron with a resolution of 6 Å. Homology models of the pentamers docked to the 6 Å structure revealed opportunities for chemical bonding at the inter-pentamer interfaces. Definition of the ligand-binding pocket and the gating C-loop in the 6 Å structure suggests that 3D-EM might lead to the identification of functional states in the BgAChBP dodecahedron. | ||||||
履歴 |
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Remark 650 | HELIX DETERMINATION METHOD: AUTHOR PROVIDED. | ||||||
Remark 700 | SHEET DETERMINATION METHOD: AUTHOR PROVIDED. |
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 4aod.cif.gz | 185.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb4aod.ent.gz | 156.3 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 4aod.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 4aod_validation.pdf.gz | 832.2 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 4aod_full_validation.pdf.gz | 977.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | 4aod_validation.xml.gz | 59.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 4aod_validation.cif.gz | 77 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ao/4aod ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ao/4aod | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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3 |
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対称性 | 点対称性: (シェーンフリース記号: T (正4面体型対称)) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
非結晶学的対称性 (NCS) | NCS oper:
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 23480.443 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 天然 詳細: TWELVE PENTAMERS CONSTITUTE THE BGACHBP PENTAGONAL DODECAHEDRON 由来: (天然) BIOMPHALARIA GLABRATA (無脊椎動物) / 組織: HEMOLYMPH / 参照: UniProt: J9PBR4*PLUS |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: BIOMPHALARIA GLABRATA ACETYLCHOLINE-BINDING PROTEIN / タイプ: COMPLEX |
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緩衝液 | 名称: 50 MM TRIS-HCL, 5 MM MGCL2, 5MM CACL2, 300MM NACL / pH: 7.4 / 詳細: 50 MM TRIS-HCL, 5 MM MGCL2, 5MM CACL2, 300MM NACL |
試料 | 濃度: 1.2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: GATAN CRYOPLUNGE 3 / 凍結剤: ETHANE 詳細: VITRIFICATION 1 -- CRYOGEN- ETHANE, HUMIDITY- 97, TEMPERATURE- 97, INSTRUMENT- GATAN CRYOPLUNGE 3, METHOD- 2 X3.5 MICROLITRES, 2 X 3S BLOTTING |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F20 / 日付: 2008年6月4日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 50000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 5000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 2000 nm / Cs: 2 mm |
試料ホルダ | 温度: 101 K / 傾斜角・最大: 0 ° |
撮影 | 電子線照射量: 30 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
画像スキャン | デジタル画像の数: 151 |
-解析
EMソフトウェア | 名称: EMAN / バージョン: 1.9 / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||
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CTF補正 | 詳細: PER MICROGRAPH | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: PROJECTION MATCHING / 解像度: 6 Å / 粒子像の数: 8183 / ピクセルサイズ(公称値): 1 Å / ピクセルサイズ(実測値): 1 Å 詳細: A NEGATIVE TEMPERATURE FACTOR OF 278.9 WAS APPLIED TO THE FINAL RECONSTRUCTION. SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-2055 (DEPOSITION ID: 10661). 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: RECIPROCAL / 詳細: REFINEMENT PROTOCOL--X-RAY | ||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 6 Å | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 6 Å
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