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- EMDB-27861: Purification of Enterovirus A71, strain 4643, WT capsid -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-27861
タイトルPurification of Enterovirus A71, strain 4643, WT capsid
マップデータ
試料
  • ウイルス: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: VP1
    • タンパク質・ペプチド: VP2
    • タンパク質・ペプチド: VP3
    • タンパク質・ペプチド: VP4
キーワードEnterovirus (エンテロウイルス) / Thermostability (耐熱性) / Capsid (カプシド) / VIRUS (ウイルス)
機能・相同性
機能・相同性情報


symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / ピコルナイン2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / cytoplasmic vesicle membrane / endocytosis involved in viral entry into host cell / nucleoside-triphosphate phosphatase ...symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / ピコルナイン2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / cytoplasmic vesicle membrane / endocytosis involved in viral entry into host cell / nucleoside-triphosphate phosphatase / protein complex oligomerization / monoatomic ion channel activity / symbiont-mediated suppression of host gene expression / RNA helicase activity / induction by virus of host autophagy / RNA依存性RNAポリメラーゼ / virus-mediated perturbation of host defense response / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / DNA-templated transcription / virion attachment to host cell / structural molecule activity / ATP hydrolysis activity / タンパク質分解 / RNA binding / ATP binding / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Poliovirus 3A protein-like / Poliovirus 3A protein like / Picornavirus 2B protein / Poliovirus core protein 3a, soluble domain / Picornavirus 2B protein / Peptidase C3, picornavirus core protein 2A / Picornavirus core protein 2A / Picornavirus coat protein VP4 / Picornavirus coat protein (VP4) / Picornavirales 3C/3C-like protease domain ...Poliovirus 3A protein-like / Poliovirus 3A protein like / Picornavirus 2B protein / Poliovirus core protein 3a, soluble domain / Picornavirus 2B protein / Peptidase C3, picornavirus core protein 2A / Picornavirus core protein 2A / Picornavirus coat protein VP4 / Picornavirus coat protein (VP4) / Picornavirales 3C/3C-like protease domain / Picornavirales 3C/3C-like protease domain profile. / Peptidase C3A/C3B, picornaviral / 3C cysteine protease (picornain 3C) / Picornavirus capsid / picornavirus capsid protein / Helicase, superfamily 3, single-stranded RNA virus / Superfamily 3 helicase of positive ssRNA viruses domain profile. / Helicase, superfamily 3, single-stranded DNA/RNA virus / ヘリカーゼ / Picornavirus/Calicivirus coat protein / Viral coat protein subunit / RNA-directed RNA polymerase, C-terminal domain / Viral RNA-dependent RNA polymerase / Reverse transcriptase/Diguanylate cyclase domain / RNA-directed RNA polymerase, catalytic domain / RdRp of positive ssRNA viruses catalytic domain profile. / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / Peptidase S1, PA clan, chymotrypsin-like fold / Peptidase S1, PA clan / DNA/RNA polymerase superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Genome polyprotein
類似検索 - 構成要素
生物種Human enterovirus 71 (エンテロウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.4 Å
データ登録者Catching A / Capponi S / Andino R
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)AI36178 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023
タイトル: A tradeoff between enterovirus A71 particle stability and cell entry.
著者: Adam Catching / Ming Te Yeh / Simone Bianco / Sara Capponi / Raul Andino /
要旨: A central role of viral capsids is to protect the viral genome from the harsh extracellular environment while facilitating initiation of infection when the virus encounters a target cell. Viruses are ...A central role of viral capsids is to protect the viral genome from the harsh extracellular environment while facilitating initiation of infection when the virus encounters a target cell. Viruses are thought to have evolved an optimal equilibrium between particle stability and efficiency of cell entry. In this study, we genetically perturb this equilibrium in a non-enveloped virus, enterovirus A71 to determine its structural basis. We isolate a single-point mutation variant with increased particle thermotolerance and decreased efficiency of cell entry. Using cryo-electron microscopy and molecular dynamics simulations, we determine that the thermostable native particles have acquired an expanded conformation that results in a significant increase in protein dynamics. Examining the intermediate states of the thermostable variant reveals a potential pathway for uncoating. We propose a sequential release of the lipid pocket factor, followed by internal VP4 and ultimately the viral RNA.
履歴
登録2022年8月16日-
ヘッダ(付随情報) 公開2023年8月30日-
マップ公開2023年8月30日-
更新2023年12月6日-
現状2023年12月6日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_27861.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_27861.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.44 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.0199
最小 - 最大-0.04795252 - 0.066150405
平均 (標準偏差)0.0038929277 (±0.0080157025)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 368.64 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_27861_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_27861_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_27861_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Human enterovirus 71

全体名称: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス)
要素
  • ウイルス: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス)
    • タンパク質・ペプチド: VP1
    • タンパク質・ペプチド: VP2
    • タンパク質・ペプチド: VP3
    • タンパク質・ペプチド: VP4

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超分子 #1: Human enterovirus 71

超分子名称: Human enterovirus 71 / タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / NCBI-ID: 39054 / 生物種: Human enterovirus 71 / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: No
宿主生物種: Homo sapiens (ヒト)
ウイルス殻Shell ID: 1 / 名称: Capsid / 直径: 300.0 Å / T番号(三角分割数): 1

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分子 #1: VP1

分子名称: VP1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス) / 株: Tainan/4643/98
分子量理論値: 32.792875 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: GDRVADVIES SIGDSVSRAL TRALPAPTGQ DTQVSSHRLD TGKVPALQAA EIGASSNASD ESMIETRCVL NSHSTAETTL DSFFSRAGL VGEIDLPLEG TTNPNGYANW DIDITGYAQM RRKVELFTYM RFDAEFTFVA CTPTGQVVPQ LLQYMFVPPG A PEPDSRES ...文字列:
GDRVADVIES SIGDSVSRAL TRALPAPTGQ DTQVSSHRLD TGKVPALQAA EIGASSNASD ESMIETRCVL NSHSTAETTL DSFFSRAGL VGEIDLPLEG TTNPNGYANW DIDITGYAQM RRKVELFTYM RFDAEFTFVA CTPTGQVVPQ LLQYMFVPPG A PEPDSRES LAWQTATNPS VFVKLSDPPA QVSVPFMSPA SAYQWFYDGY PTFGEHKQEK DLEYGACPNN MMGTFSVRTV GT SKSKYPL VIRIYMRMKH VRAWIPRPMR NQNYLFKANP NYAGNFIKPT GASRTAITTL

UniProtKB: Genome polyprotein

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分子 #2: VP2

分子名称: VP2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス) / 株: Tainan/4643/98
分子量理論値: 27.726135 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: SPSAEACGYS DRVAQLTIGN STITTQEAAN IIVGYGEWPS YCSDSDATAV DKPTRPDVSV NRFYTLDTKL WEKSSKGWYW KFPDVLTET GVFGQNAQFH YLYRSGFCIH VQCNASKFHQ GALLVAVLPE YVIGSVAGGT GTEDTHPPYK QTQPGADGFE L QHPYVLDA ...文字列:
SPSAEACGYS DRVAQLTIGN STITTQEAAN IIVGYGEWPS YCSDSDATAV DKPTRPDVSV NRFYTLDTKL WEKSSKGWYW KFPDVLTET GVFGQNAQFH YLYRSGFCIH VQCNASKFHQ GALLVAVLPE YVIGSVAGGT GTEDTHPPYK QTQPGADGFE L QHPYVLDA GIPISQLTVC PHQWINLRTN NCATIIVPYI NALPFDSALN HCNFGLLVVP ISPLDYDQGA TPVIPITITL AP MCSEFAG LRQAVTQ

UniProtKB: Genome polyprotein

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分子 #3: VP3

分子名称: VP3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス) / 株: Tainan/4643/98
分子量理論値: 26.441199 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: GFPTELKPGT NQFLTTDDGV SAPILPNFHP TPCIHIPGEV RNLLELCQVE TILEVNNVPT NATSLMERLR FPVSAQAGKG ELCAVFRAD PGRSGPWQST LLGQLCGYYT QWSGSLEVTF MFTGSFMATG KMLIAYTPPG GPLPKDRATA MLGTHVIWDF G LQSSVTLV ...文字列:
GFPTELKPGT NQFLTTDDGV SAPILPNFHP TPCIHIPGEV RNLLELCQVE TILEVNNVPT NATSLMERLR FPVSAQAGKG ELCAVFRAD PGRSGPWQST LLGQLCGYYT QWSGSLEVTF MFTGSFMATG KMLIAYTPPG GPLPKDRATA MLGTHVIWDF G LQSSVTLV IPWISNTHYR AHARDGVFDY YTTGLVSIWY QTNYVVPIGA PNTAYIIALA AAQKNFTMKL CKDASDILQT GT IQ

UniProtKB: Genome polyprotein

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分子 #4: VP4

分子名称: VP4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human enterovirus 71 (エンテロウイルス) / 株: Tainan/4643/98
分子量理論値: 7.501162 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
MGSQVSTQRS GSHENSNSAT EGSTINYTTI NYYKDSYAAT AGKQSLKQDP DKFANPVKDI FTEMAAPLK

UniProtKB: Genome polyprotein

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7
グリッドモデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 0.2
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 297 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TECNAI ARCTICA
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm / 倍率（公称値）: 45000
試料ステージホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 6000 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4000 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 6.0 sec. / 平均電子線量: 64.1 e/Å2
実験機器
モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 604
初期モデルモデルのタイプ: PDB ENTRY
PDBモデル - PDB ID:

4n53

初期 角度割当タイプ: RANDOM ASSIGNMENT
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 再構成使用したクラス数: 1 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用した粒子像数: 604
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

3vbs


Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model
精密化空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT / 当てはまり具合の基準: Correlation Coefficient
得られたモデル

PDB-8e3a:
Purification of Enterovirus A71, strain 4643, WT capsid

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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