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- EMDB-2570: Electron microscopy of the native murine COP9 signalosome -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-2570
タイトルElectron microscopy of the native murine COP9 signalosome
マップデータnegative stain reconstruction of murine CSN
試料
  • 試料: murine COP9 signalosome
  • タンパク質・ペプチド: COP9 signalosome
キーワードCSN
生物種Mus musculus (ハツカネズミ)
手法単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 20.0 Å
データ登録者Rockel B / Schmaler T / Dubiel W
引用ジャーナル: Biochem Biophys Res Commun / 年: 2014
タイトル: Electron microscopy and in vitro deneddylation reveal similar architectures and biochemistry of isolated human and Flag-mouse COP9 signalosome complexes.
著者: Beate Rockel / Tilo Schmaler / Xiaohua Huang / Wolfgang Dubiel /
要旨: The COP9 signalosome (CSN) is a regulator of the ubiquitin (Ub) proteasome system (UPS). In the UPS, proteins are Ub-labeled for degradation by Ub ligases conferring substrate specificity. The CSN ...The COP9 signalosome (CSN) is a regulator of the ubiquitin (Ub) proteasome system (UPS). In the UPS, proteins are Ub-labeled for degradation by Ub ligases conferring substrate specificity. The CSN controls a large family of Ub ligases called cullin-RING ligases (CRLs), which ubiquitinate cell cycle regulators, transcription factors and DNA damage response proteins. The CSN possesses structural similarities with the 26S proteasome Lid complex and the translation initiation complex 3 (eIF3) indicating similar ancestry and function. Initial structures were obtained 14years ago by 2D electron microscopy (EM). Recently, first 3D molecular models of the CSN were created on the basis of negative-stain EM and single-particle analysis, mostly with recombinant complexes. Here, we compare deneddylating activity and structural features of CSN complexes purified in an elaborate procedure from human erythrocytes and efficiently pulled down from mouse Flag-CSN2 B8 fibroblasts. In an in vitro deneddylation assay both the human and the mouse CSN complexes deneddylated Nedd8-Cul1 with comparable rates. 3D structural models of the erythrocyte CSN as well as of the mouse Flag-CSN were generated by negative stain EM and by cryo-EM. Both complexes show a central U-shaped segment from which several arms emanate. This structure, called the horseshoe, is formed by the PCI domain subunits. CSN5 and CSN6 point away from the horseshoe. Compared to 3D models of negatively stained CSN complexes, densities assigned to CSN2 and CSN4 are better defined in the cryo-map. Because biochemical and structural results obtained with CSN complexes isolated from human erythrocytes and purified by Flag-CSN pulldown from mouse B8 fibroblasts are very similar, Flag-CSN pulldowns are a proper alternative to CSN preparation from erythrocytes.
履歴
登録2014年2月4日-
ヘッダ(付随情報) 公開2014年2月12日-
マップ公開2014年11月19日-
更新2014年11月19日-
現状2014年11月19日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.025
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.025
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

EMD-2570.jpg

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_2570.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1001 KB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈negative stain reconstruction of murine CSN
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
3.56 Å/pix.
x 64 pix.
= 227.84 Å		3.56 Å/pix.
x 64 pix.
= 227.84 Å		3.56 Å/pix.
x 64 pix.
= 227.84 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 3.56 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.017 / ムービー #1: 0.025
最小 - 最大-0.05845597 - 0.13483354
平均 (標準偏差)0.00183568 (±0.01191584)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-32-32-32
サイズ646464
Spacing646464
セルA=B=C: 227.84 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z3.563.563.56
M x/y/z646464
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z227.840227.840227.840
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-207-207-206
NX/NY/NZ414414414
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS-32-32-32
NC/NR/NS646464
D min/max/mean-0.0580.1350.002

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : murine COP9 signalosome

全体名称: murine COP9 signalosome
要素
  • 試料: murine COP9 signalosome
  • タンパク質・ペプチド: COP9 signalosome

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超分子 #1000: murine COP9 signalosome

超分子名称: murine COP9 signalosome / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1

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分子 #1: COP9 signalosome

分子名称: COP9 signalosome / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) / 別称: House mouse

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実験情報

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構造解析

手法ネガティブ染色法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

染色タイプ: NEGATIVE / 詳細: uranyl acetate
凍結凍結剤: NONE / 装置: OTHER

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TECNAI F20
日付2012年5月12日
撮影カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: FEI EAGLE (4k x 4k)
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
試料ステージ試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC
実験機器
モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正詳細: whole micrograph
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 20.0 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: xmipp / 使用した粒子像数: 51105

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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