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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23780 | |||||||||
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タイトル | BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibodies Rh.33104 mAb.1 and RM20A3 | |||||||||
![]() | 3D map of BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibody Rh.33104 mAb.1 (as Fab fragment). Obtained by cryoEM. Main map | |||||||||
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機能・相同性 | ![]() positive regulation of plasma membrane raft polarization / positive regulation of receptor clustering / positive regulation of establishment of T cell polarity / host cell endosome membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / viral protein processing / fusion of virus membrane with host plasma membrane / virus-mediated perturbation of host defense response / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope ...positive regulation of plasma membrane raft polarization / positive regulation of receptor clustering / positive regulation of establishment of T cell polarity / host cell endosome membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / viral protein processing / fusion of virus membrane with host plasma membrane / virus-mediated perturbation of host defense response / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / structural molecule activity / virion membrane / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
![]() | Antanasijevic A / Ward AB | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: From structure to sequence: Antibody discovery using cryoEM. 著者: Aleksandar Antanasijevic / Charles A Bowman / Robert N Kirchdoerfer / Christopher A Cottrell / Gabriel Ozorowski / Amit A Upadhyay / Kimberly M Cirelli / Diane G Carnathan / Chiamaka A Enemuo ...著者: Aleksandar Antanasijevic / Charles A Bowman / Robert N Kirchdoerfer / Christopher A Cottrell / Gabriel Ozorowski / Amit A Upadhyay / Kimberly M Cirelli / Diane G Carnathan / Chiamaka A Enemuo / Leigh M Sewall / Bartek Nogal / Fangzhu Zhao / Bettina Groschel / William R Schief / Devin Sok / Guido Silvestri / Shane Crotty / Steven E Bosinger / Andrew B Ward / ![]() 要旨: One of the rate-limiting steps in analyzing immune responses to vaccines or infections is the isolation and characterization of monoclonal antibodies. Here, we present a hybrid structural and ...One of the rate-limiting steps in analyzing immune responses to vaccines or infections is the isolation and characterization of monoclonal antibodies. Here, we present a hybrid structural and bioinformatic approach to directly assign the heavy and light chains, identify complementarity-determining regions, and discover sequences from cryoEM density maps of serum-derived polyclonal antibodies bound to an antigen. When combined with next-generation sequencing of immune repertoires, we were able to specifically identify clonal family members, synthesize the monoclonal antibodies, and confirm that they interact with the antigen in a manner equivalent to the corresponding polyclonal antibodies. This structure-based approach for identification of monoclonal antibodies from polyclonal sera opens new avenues for analysis of immune responses and iterative vaccine design. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 167 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 26.5 KB 26.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 12.8 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 154.9 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 178 MB | ![]() | |
その他 | ![]() ![]() | 141.1 MB 141 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 887.4 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 887 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 19.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 26.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
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注釈 | 3D map of BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibody Rh.33104 mAb.1 (as Fab fragment). Obtained by cryoEM. Main map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.03 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: 3D map of BG505 SOSIP MD39 in complex...
ファイル | emd_23780_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | 3D map of BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibody Rh.33104 mAb.1 (as Fab fragment). Obtained by cryoEM. Half-map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: 3D map of BG505 SOSIP MD39 in complex...
ファイル | emd_23780_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | 3D map of BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibody Rh.33104 mAb.1 (as Fab fragment). Obtained by cryoEM. Half-map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibodies Rh.331...
全体 | 名称: BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibodies Rh.33104 mAb.1 and RM20A3 |
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要素 |
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-超分子 #1: BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibodies Rh.331...
超分子 | 名称: BG505 SOSIP MD39 in complex with the monoclonal antibodies Rh.33104 mAb.1 and RM20A3 タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#6 詳細: The complexes were created by combining BG505 SOSIP MD39 and the two antibodies (as Fab fragments) and subsequent SEC purification. |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() |
-分子 #1: Rh.33104 mAb.1 Heavy Chain
分子 | 名称: Rh.33104 mAb.1 Heavy Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 12.421753 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: QVQLQESGPG LVKPSETLSL TCAVSGGSFS GYSWGWIRQP PGKGLEWIGS IIGRTGSTAY NPSLTSRVTI SRDTSNNQFS LKLTSLTAA DTAVYYCARQ QSNFDFWGQG VLVTVSS |
-分子 #2: Surface protein gp120
分子 | 名称: Surface protein gp120 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 57.652625 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MKRGLCCVLL LCGAVFVSPS QEIHARFRRG ARAENLWVTV YYGVPVWKDA ETTLFCASDA KAYETEKHNV WATHACVPTD PNPQEIHLE NVTEEFNMWK NNMVEQMHED IISLWDQSLK PCVKLTPLCV TLQCTNVTNN ITDDMRGELK NCSFNMTTEL R DKKQKVYS ...文字列: MKRGLCCVLL LCGAVFVSPS QEIHARFRRG ARAENLWVTV YYGVPVWKDA ETTLFCASDA KAYETEKHNV WATHACVPTD PNPQEIHLE NVTEEFNMWK NNMVEQMHED IISLWDQSLK PCVKLTPLCV TLQCTNVTNN ITDDMRGELK NCSFNMTTEL R DKKQKVYS LFYRLDVVQI NENQGNRSNN SNKEYRLINC NTSAITQACP KVSFEPIPIH YCAPAGFAIL KCKDKKFNGT GP CPSVSTV QCTHGIKPVV STQLLLNGSL AEEEVIIRSE NITNNAKNIL VQLNTPVQIN CTRPNNNTVK SIRIGPGQAF YYT GDIIGD IRQAHCNVSK ATWNETLGKV VKQLRKHFGN NTIIRFAQSS GGDLEVTTHS FNCGGEFFYC NTSGLFNSTW ISNT SVQGS NSTGSNDSIT LPCRIKQIIN MWQRIGQAMY APPIQGVIRC VSNITGLILT RDGGSTNSTT ETFRPGGGDM RDNWR SELY KYKVVKIEPL GVAPTRCKRR VVGRRRRRR |
-分子 #3: RM20A3 mAb Heavy Chain
分子 | 名称: RM20A3 mAb Heavy Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 13.511111 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: EVQLVETGGG LVQPGGSLKL SCRASGYTFS SFAMSWVRQA PGKGLEWVSL INDRGGLTFY VDSVKGRFTI SRDNSKNTLS LQMHSLRDG DTAVYYCATG GMSSALQSSK YYFDFWGQGA LVTVSS |
-分子 #4: RM20A3 mAb Light Chain
分子 | 名称: RM20A3 mAb Light Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 11.755821 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: QSALTQPPSV SGSPGQSVTI SCTGTSSDIG SYNYVSWYQQ HPGKAPKLMI YDVTQRPSGV SDRFSGSKSG NTASLTISGL QADDEADYY CSAYAGRQTF YIFGGGTRLT VL |
-分子 #5: Rh.33104 mAb.1 Light Chain
分子 | 名称: Rh.33104 mAb.1 Light Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 11.521576 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: DIQMTQSPSS LSASVGDTVT TTCRASQDIS NDLAWYQQKP GKAPKPLLYY ASNLESGVPS MFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFASYFCQ QYNSYPRTFG QGTKVEF |
-分子 #6: Transmembrane protein gp41
分子 | 名称: Transmembrane protein gp41 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 17.134324 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: AVGIGAVSLG FLGAAGSTMG AASMTLTVQA RNLLSGIVQQ QSNLLRAPEP QQHLLKDTHW GIKQLQARVL AVEHYLRDQQ LLGIWGCSG KLICCTNVPW NSSWSNRNLS EIWDNMTWLQ WDKEISNYTQ IIYGLLEESQ NQQEKNEQDL LALD |
-分子 #9: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
分子 | 名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 9 / コピー数: 12 / 式: NAG |
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分子量 | 理論値: 221.208 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-NAG: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 6.0 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
詳細: TBS, 0.2um filtered | |||||||||
グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 雰囲気: OTHER | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blot force: 0 Wait time: 10s Blot time: 3-7s. | |||||||||
詳細 | The specimen consisted of homogeneous antigen-antibody complexes |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1022 / 平均露光時間: 9.5 sec. / 平均電子線量: 44.7 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.6 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 29000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |