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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23778 | |||||||||
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タイトル | Negative stain EM map of BG505 SOSIP in complex with Rh4O9.8 monoclonal antibody (as Fab fragment) | |||||||||
マップデータ | 3D map of BG505 SOSIP in complex with the monoclonal antibody Rh4O9.8 (as Fab fragment). Obtained by negative stain EM. | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of plasma membrane raft polarization / positive regulation of receptor clustering / positive regulation of establishment of T cell polarity / host cell endosome membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / viral protein processing / fusion of virus membrane with host plasma membrane / virus-mediated perturbation of host defense response / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope ...positive regulation of plasma membrane raft polarization / positive regulation of receptor clustering / positive regulation of establishment of T cell polarity / host cell endosome membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / viral protein processing / fusion of virus membrane with host plasma membrane / virus-mediated perturbation of host defense response / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / structural molecule activity / virion membrane / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Human immunodeficiency virus (ヒト免疫不全ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 15.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Antanasijevic A / Ward AB | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2022 タイトル: From structure to sequence: Antibody discovery using cryoEM. 著者: Aleksandar Antanasijevic / Charles A Bowman / Robert N Kirchdoerfer / Christopher A Cottrell / Gabriel Ozorowski / Amit A Upadhyay / Kimberly M Cirelli / Diane G Carnathan / Chiamaka A Enemuo ...著者: Aleksandar Antanasijevic / Charles A Bowman / Robert N Kirchdoerfer / Christopher A Cottrell / Gabriel Ozorowski / Amit A Upadhyay / Kimberly M Cirelli / Diane G Carnathan / Chiamaka A Enemuo / Leigh M Sewall / Bartek Nogal / Fangzhu Zhao / Bettina Groschel / William R Schief / Devin Sok / Guido Silvestri / Shane Crotty / Steven E Bosinger / Andrew B Ward / 要旨: One of the rate-limiting steps in analyzing immune responses to vaccines or infections is the isolation and characterization of monoclonal antibodies. Here, we present a hybrid structural and ...One of the rate-limiting steps in analyzing immune responses to vaccines or infections is the isolation and characterization of monoclonal antibodies. Here, we present a hybrid structural and bioinformatic approach to directly assign the heavy and light chains, identify complementarity-determining regions, and discover sequences from cryoEM density maps of serum-derived polyclonal antibodies bound to an antigen. When combined with next-generation sequencing of immune repertoires, we were able to specifically identify clonal family members, synthesize the monoclonal antibodies, and confirm that they interact with the antigen in a manner equivalent to the corresponding polyclonal antibodies. This structure-based approach for identification of monoclonal antibodies from polyclonal sera opens new avenues for analysis of immune responses and iterative vaccine design. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_23778.map.gz | 32.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-23778-v30.xml emd-23778.xml | 13 KB 13 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_23778.png | 50.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23778 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23778 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_23778_validation.pdf.gz | 300.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_23778_full_validation.pdf.gz | 300.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_23778_validation.xml.gz | 6.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_23778_validation.cif.gz | 6.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23778 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23778 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_23778.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 42.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | 3D map of BG505 SOSIP in complex with the monoclonal antibody Rh4O9.8 (as Fab fragment). Obtained by negative stain EM. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.77 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : BG505 SOSIP.v5.2 in complex with the monoclonal antibody Rh4O9.8 ...
全体 | 名称: BG505 SOSIP.v5.2 in complex with the monoclonal antibody Rh4O9.8 (as Fab fragment) |
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要素 |
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-超分子 #1: BG505 SOSIP.v5.2 in complex with the monoclonal antibody Rh4O9.8 ...
超分子 | 名称: BG505 SOSIP.v5.2 in complex with the monoclonal antibody Rh4O9.8 (as Fab fragment) タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Fab fragment was generated by proteolytic cleavage of IgG antibody |
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由来(天然) | 生物種: Human immunodeficiency virus (ヒト免疫不全ウイルス) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK293F / 組換プラスミド: pPPI4 |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.02 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
詳細: TBS, 0.2um filtered | |||||||||
染色 | タイプ: NEGATIVE / 材質: Uranyl formate / 詳細: The samples were stained with UF for 60s. | |||||||||
グリッド | モデル: Homemade / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | |||||||||
詳細 | The complex was generated by incubation of Rh4O9.8 monoclonal antibody (as Fab) with recombinantly expressed BG505 SOSIP and subsequent SEC purification. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F416 (4k x 4k) 平均電子線量: 25.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 62000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: SIDE ENTRY, EUCENTRIC |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |