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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23508 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of 13S proteasome core particle assembly intermediate purified from Pre3-1 proteasome mutant (G34D) | |||||||||
マップデータ | Map of 13S complex | |||||||||
試料 |
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キーワード | core particle / complex / assembly intermediate / HYDROLASE | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of proteasome core complex assembly / proteasome core complex assembly / nuclear outer membrane-endoplasmic reticulum membrane network / Cross-presentation of soluble exogenous antigens (endosomes) / TNFR2 non-canonical NF-kB pathway / proteasomal ubiquitin-independent protein catabolic process / Ubiquitin Mediated Degradation of Phosphorylated Cdc25A / Regulation of PTEN stability and activity / CDK-mediated phosphorylation and removal of Cdc6 / FBXL7 down-regulates AURKA during mitotic entry and in early mitosis ...regulation of proteasome core complex assembly / proteasome core complex assembly / nuclear outer membrane-endoplasmic reticulum membrane network / Cross-presentation of soluble exogenous antigens (endosomes) / TNFR2 non-canonical NF-kB pathway / proteasomal ubiquitin-independent protein catabolic process / Ubiquitin Mediated Degradation of Phosphorylated Cdc25A / Regulation of PTEN stability and activity / CDK-mediated phosphorylation and removal of Cdc6 / FBXL7 down-regulates AURKA during mitotic entry and in early mitosis / KEAP1-NFE2L2 pathway / Neddylation / Orc1 removal from chromatin / MAPK6/MAPK4 signaling / proteasome storage granule / Antigen processing: Ubiquitination & Proteasome degradation / endopeptidase activator activity / proteasome assembly / proteasome endopeptidase complex / proteasome core complex, beta-subunit complex / proteasome core complex, alpha-subunit complex / Ub-specific processing proteases / threonine-type endopeptidase activity / Neutrophil degranulation / proteasome complex / ubiquitin-dependent protein catabolic process / proteasome-mediated ubiquitin-dependent protein catabolic process / endopeptidase activity / mRNA binding / DNA damage response / endoplasmic reticulum membrane / mitochondrion / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.61 Å | |||||||||
データ登録者 | Schnell HM / Walsh Jr RM | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2021 タイトル: Structures of chaperone-associated assembly intermediates reveal coordinated mechanisms of proteasome biogenesis. 著者: Helena M Schnell / Richard M Walsh / Shaun Rawson / Mandeep Kaur / Meera K Bhanu / Geng Tian / Miguel A Prado / Angel Guerra-Moreno / Joao A Paulo / Steven P Gygi / Jeroen Roelofs / Daniel Finley / John Hanna / 要旨: The proteasome mediates most selective protein degradation. Proteolysis occurs within the 20S core particle (CP), a barrel-shaped chamber with an αββα configuration. CP biogenesis proceeds ...The proteasome mediates most selective protein degradation. Proteolysis occurs within the 20S core particle (CP), a barrel-shaped chamber with an αββα configuration. CP biogenesis proceeds through an ordered multistep pathway requiring five chaperones, Pba1-4 and Ump1. Using Saccharomyces cerevisiae, we report high-resolution structures of CP assembly intermediates by cryogenic-electron microscopy. The first structure corresponds to the 13S particle, which consists of a complete α-ring, partial β-ring (β2-4), Ump1 and Pba1/2. The second structure contains two additional subunits (β5-6) and represents a later pre-15S intermediate. These structures reveal the architecture and positions of Ump1 and β2/β5 propeptides, with important implications for their functions. Unexpectedly, Pba1's N terminus extends through an open CP pore, accessing the CP interior to contact Ump1 and the β5 propeptide. These results reveal how the coordinated activity of Ump1, Pba1 and the active site propeptides orchestrate key aspects of CP assembly. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_23508.map.gz | 168.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-23508-v30.xml emd-23508.xml | 31.5 KB 31.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_23508_fsc.xml | 12.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_23508.png | 241.7 KB | ||
Filedesc metadata | emd-23508.cif.gz | 8.4 KB | ||
その他 | emd_23508_half_map_1.map.gz emd_23508_half_map_2.map.gz | 164.9 MB 164.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23508 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-23508 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_23508_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_23508_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_23508_validation.xml.gz | 20.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_23508_validation.cif.gz | 26.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23508 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-23508 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_23508.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Map of 13S complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-ハーフマップ: Half Map 1 for 13S Complex
ファイル | emd_23508_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half Map 1 for 13S Complex | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half Map 2 for 13S Complex
ファイル | emd_23508_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half Map 2 for 13S Complex | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : 13S
+超分子 #1: 13S
+分子 #1: Proteasome subunit alpha type-1
+分子 #2: Proteasome subunit alpha type-2
+分子 #3: Proteasome subunit alpha type-3
+分子 #4: Proteasome subunit alpha type-4
+分子 #5: Proteasome subunit alpha type-5
+分子 #6: Proteasome subunit alpha type-6
+分子 #7: Proteasome subunit alpha type-7
+分子 #8: Proteasome maturation factor UMP1
+分子 #9: Proteasome subunit beta type-2
+分子 #10: Proteasome subunit beta type-3
+分子 #11: Proteasome subunit beta type-4
+分子 #12: Proteasome chaperone 1
+分子 #13: Proteasome assembly chaperone 2
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 4.5 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: Fluorinated Fos-Choline was added to the sample immediately prior to deposition on a grid for plunge freezing. | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 25 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 20657 / 平均露光時間: 2.4 sec. / 平均電子線量: 55.94 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 倍率(補正後): 47169 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |