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- EMDB-20754: Cryo-EM structure of the respiratory syncytial virus RNA polymerase -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-20754
タイトルCryo-EM structure of the respiratory syncytial virus RNA polymerase
マップデータStructure of the respiratory syncytial virus RNA polymerase
試料
  • 複合体: the L protein of the human respiratory syncytial virus; the phosphoprotein (P) of human respiratory syncytial virus
    • タンパク質・ペプチド: RNA-directed RNA polymerase L
    • タンパク質・ペプチド: the phosphoprotein (P) of human respiratory syncytial virus
キーワードViral protein complexes / VIRAL PROTEIN / VIRAL PROTEIN-Transferase complex
機能・相同性
機能・相同性情報


NNS virus cap methyltransferase / GDP polyribonucleotidyltransferase / Respiratory syncytial virus genome transcription / Translation of respiratory syncytial virus mRNAs / virion component => GO:0044423 / negative stranded viral RNA replication / Respiratory syncytial virus genome replication / RSV-host interactions / Assembly and release of respiratory syncytial virus (RSV) virions / Maturation of hRSV A proteins ...NNS virus cap methyltransferase / GDP polyribonucleotidyltransferase / Respiratory syncytial virus genome transcription / Translation of respiratory syncytial virus mRNAs / virion component => GO:0044423 / negative stranded viral RNA replication / Respiratory syncytial virus genome replication / RSV-host interactions / Assembly and release of respiratory syncytial virus (RSV) virions / Maturation of hRSV A proteins / Respiratory syncytial virus (RSV) attachment and entry / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 / viral life cycle / 転移酵素; 一炭素原子の基を移すもの; メチル基を移すもの / virion component / mRNA 5'-cap (guanine-N7-)-methyltransferase activity / host cell cytoplasm / RNA-directed RNA polymerase / RNA-dependent RNA polymerase activity / GTPase activity / ATP binding / metal ion binding / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Phosphoprotein, pneumoviral / Pneumovirus phosphoprotein / RNA-directed RNA polymerase L methyltransferase domain, rhabdovirus / Virus-capping methyltransferase, MT domain / RNA-directed RNA polymerase, paramyxovirus / Mononegavirales RNA-directed RNA polymerase catalytic domain / Mononegavirus L protein 2-O-ribose methyltransferase / Mononegavirales mRNA-capping domain V / RNA-directed RNA polymerase L, C-terminal / Mononegavirales RNA dependent RNA polymerase ...Phosphoprotein, pneumoviral / Pneumovirus phosphoprotein / RNA-directed RNA polymerase L methyltransferase domain, rhabdovirus / Virus-capping methyltransferase, MT domain / RNA-directed RNA polymerase, paramyxovirus / Mononegavirales RNA-directed RNA polymerase catalytic domain / Mononegavirus L protein 2-O-ribose methyltransferase / Mononegavirales mRNA-capping domain V / RNA-directed RNA polymerase L, C-terminal / Mononegavirales RNA dependent RNA polymerase / Mononegavirales mRNA-capping region V / RdRp of negative ssRNA viruses with non-segmented genomes catalytic domain profile. / Mononegavirus L protein 2'-O-ribose methyltransferase domain profile.
類似検索 - ドメイン・相同性
Phosphoprotein / RNA-directed RNA polymerase L / Phosphoprotein / RNA-directed RNA polymerase L
類似検索 - 構成要素
生物種Human respiratory syncytial virus (ウイルス)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.67 Å
データ登録者Cao D / Gao Y / Liang B
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM130950 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / : 2020
タイトル: Cryo-EM structure of the respiratory syncytial virus RNA polymerase.
著者: Dongdong Cao / Yunrong Gao / Claire Roesler / Samantha Rice / Paul D'Cunha / Lisa Zhuang / Julia Slack / Mason Domke / Anna Antonova / Sarah Romanelli / Shayon Keating / Gabriela Forero / ...著者: Dongdong Cao / Yunrong Gao / Claire Roesler / Samantha Rice / Paul D'Cunha / Lisa Zhuang / Julia Slack / Mason Domke / Anna Antonova / Sarah Romanelli / Shayon Keating / Gabriela Forero / Puneet Juneja / Bo Liang /
要旨: The respiratory syncytial virus (RSV) RNA polymerase, constituted of a 250 kDa large (L) protein and tetrameric phosphoprotein (P), catalyzes three distinct enzymatic activities - nucleotide ...The respiratory syncytial virus (RSV) RNA polymerase, constituted of a 250 kDa large (L) protein and tetrameric phosphoprotein (P), catalyzes three distinct enzymatic activities - nucleotide polymerization, cap addition, and cap methylation. How RSV L and P coordinate these activities is poorly understood. Here, we present a 3.67 Å cryo-EM structure of the RSV polymerase (L:P) complex. The structure reveals that the RNA dependent RNA polymerase (RdRp) and capping (Cap) domains of L interact with the oligomerization domain (P) and C-terminal domain (P) of a tetramer of P. The density of the methyltransferase (MT) domain of L and the N-terminal domain of P (P) is missing. Further analysis and comparison with other RNA polymerases at different stages suggest the structure we obtained is likely to be at an elongation-compatible stage. Together, these data provide enriched insights into the interrelationship, the inhibitors, and the evolutionary implications of the RSV polymerase.
履歴
登録2019年9月22日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年11月20日-
マップ公開2020年1月22日-
更新2024年3月20日-
現状2024年3月20日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 0.0463
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 表面レベル: 0.0463
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6uen
  • 表面レベル: 0.0463
  • UCSF Chimeraによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_20754.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Structure of the respiratory syncytial virus RNA polymerase
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.63281 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.0463 / ムービー #1: 0.0463
最小 - 最大-0.2648638 - 0.3498595
平均 (標準偏差)0.0001511138 (±0.014458609)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ128128128
Spacing128128128
セルA=B=C: 208.99968 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.63281251.63281251.6328125
M x/y/z128128128
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z209.000209.000209.000
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS128128128
D min/max/mean-0.2650.3500.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : the L protein of the human respiratory syncytial virus; the phosp...

全体名称: the L protein of the human respiratory syncytial virus; the phosphoprotein (P) of human respiratory syncytial virus
要素
  • 複合体: the L protein of the human respiratory syncytial virus; the phosphoprotein (P) of human respiratory syncytial virus
    • タンパク質・ペプチド: RNA-directed RNA polymerase L
    • タンパク質・ペプチド: the phosphoprotein (P) of human respiratory syncytial virus

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超分子 #1: the L protein of the human respiratory syncytial virus; the phosp...

超分子名称: the L protein of the human respiratory syncytial virus; the phosphoprotein (P) of human respiratory syncytial virus
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Human respiratory syncytial virus (ウイルス)
分子量理論値: 360 KDa

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分子 #1: RNA-directed RNA polymerase L

分子名称: RNA-directed RNA polymerase L / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RNA-directed RNA polymerase
由来(天然)生物種: Human respiratory syncytial virus (ウイルス)
分子量理論値: 173.586594 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: MDPIINGNSA NVYLTDSYLK GVISFSECNA LGSYIFNGPY LKNDYTNLIS RQNPLIEHMN LKKLNITQSL ISKYHKGEIK LEEPTYFQS LLMTYKSMTS SEQIATTNLL KKIIRRAIEI SDVKVYAILN KLGLKEKDKI KSNNGQDEDN SVITTIIKDD I LSAVKDNQ ...文字列:
MDPIINGNSA NVYLTDSYLK GVISFSECNA LGSYIFNGPY LKNDYTNLIS RQNPLIEHMN LKKLNITQSL ISKYHKGEIK LEEPTYFQS LLMTYKSMTS SEQIATTNLL KKIIRRAIEI SDVKVYAILN KLGLKEKDKI KSNNGQDEDN SVITTIIKDD I LSAVKDNQ SHLKADKNHS TKQKDTIKTT LLKKLMCSMQ HPPSWLIHWF NLYTKLNNIL TQYRSNEVKN HGFTLIDNQT LS GFQFILN QYGCIVYHKE LKRITVTTYN QFLTWKDISL SRLNVCLITW ISNCLNTLNK SLGLRCGFNN VILTQLFLYG DCI LKLFHN EGFYIIKEVE GFIMSLILNI TEEDQFRKRF YNSMLNNITD AANKAQKNLL SRVCHTLLDK TVSDNIINGR WIIL LSKFL KLIKLAGDNN LNNLSELYFL FRIFGHPMVD ERQAMDAVKI NCNETKFYLL SSLSMLRGAF IYRIIKGFVN NYNRW PTLR NAIVLPLRWL TYYKLNTYPS LLELTERDLI VLSGLRFYRE FRLPKKVDLE MIINDKAISP PKNLIWTSFP RNYMPS HIQ NYIEHEKLKF SESDKSRRVL EYYLRDNKFN ECDLYNCVVN QSYLNNPNHV VSLTGKEREL SVGRMFAMQP GMFRQVQ IL AEKMIAENIL QFFPESLTRY GDLELQKILE LKAGISNKSN RYNDNYNNYI SKCSIITDLS KFNQAFRYET SCICSDVL D ELHGVQSLFS WLHLTIPHVT IICTYRHAPP YIGDHIVDLN NVDEQSGLYR YHMGGIEGWC QKLWTIEAIS LLDLISLKG KFSITALING DNQSIDISKP IRLMEGQTHA QADYLLALNS LKLLYKEYAG IGHKLKGTET YISRDMQFMS KTIQHNGVYY PASIKKVLR VGPWINTILD DFKVSLESIG SLTQELEYRG ESLLCSLIFR NVWLYNQIAL QLKNHALCNN KLYLDILKVL K HLKTFFNL DNIDTALTLY MNLPMLFGGG DPNLLYRSFY RRTPDFLTEA IVHSVFILSY YTNHDLKDKL QDLSDDRLNK FL TCIITFD KNPNAEFVTL MRDPQALGSE RQAKITSEIN RLAVTEVLST APNKIFSKSA QHYTTTEIDL NDIMQNIEPT YPH GLRVVY ESLPFYKAEK IVNLISGTKS ITNILEKTSA IDLTDIDRAT EMMRKNITLL IRILPLDCNR DKREILSMEN LSIT ELSKY VRERSWSLSN IVGVTSPSIM YTMDIKYTTS TISSGIIIEK YNVNSLTRGE RGPTKPWVGS STQEKKTMPV YNRQV LTKK QRDQIDLLAK LDWVYASIDN KDEFMEELSI GTLGLTYEKA KKLFPQYLSV NYLHRLTVSS RPCEFPASIP AYRTTN YHF DTSPINRILT EKYGDEDIDI VFQNCISFGL SLMSVVEQFT NVCPNRIILI PKLNEIHLMK PPIFTGDVDI HKLKQVI QK QHMFLPDKIS LTQYVELFLS NKTLKSGSHV NSNLILAHKI SDYFHNTYIL STNLAGHW

UniProtKB: RNA-directed RNA polymerase L

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分子 #2: the phosphoprotein (P) of human respiratory syncytial virus

分子名称: the phosphoprotein (P) of human respiratory syncytial virus
タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Human respiratory syncytial virus (ウイルス)
分子量理論値: 27.165838 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: MEKFAPEFHG EDANNRATKF LESIKGKFTS PKDPKKKDSI ISVNSIDIEV TKESPITSNS TIINPTNETD DTAGNKPNYQ RKPLVSFKE DPTPSDNPFS KLYKETIETF DNNEEESSYS YEEINDQTND NITARLDRID EKLSEILGML HTLVVASAGP T SARDGIRD ...文字列:
MEKFAPEFHG EDANNRATKF LESIKGKFTS PKDPKKKDSI ISVNSIDIEV TKESPITSNS TIINPTNETD DTAGNKPNYQ RKPLVSFKE DPTPSDNPFS KLYKETIETF DNNEEESSYS YEEINDQTND NITARLDRID EKLSEILGML HTLVVASAGP T SARDGIRD AMVGLREEMI EKIRTEALMT NDRLEAMARL RNEESEKMAK DTSDEVSLNP TSEKLNNLLE GNDSDNDLSL ED F

UniProtKB: Phosphoprotein

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 91 %

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TALOS ARCTICA
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
平均電子線量: 55.0 e/Å2
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.67 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 253372
初期 角度割当タイプ: COMMON LINE
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD

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原子モデル構築 1

精密化空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL
得られたモデル

PDB-6uen:
Cryo-EM structure of the respiratory syncytial virus RNA polymerase

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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