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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-14762 | |||||||||
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タイトル | Mot1:TBP:DNA - pre-hydrolysis state | |||||||||
マップデータ | main map | |||||||||
試料 |
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キーワード | Swi2/Snf2 protein / remodeler / transcription initiation / TRANSCRIPTION | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 ATP-dependent chromatin remodeler activity / TBP-class protein binding / helicase activity / DNA-templated transcription initiation / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Chaetomium thermophilum (菌類) / DNA molecule (その他) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Woike S / Eustermann S / Jung J / Wenzl SJ / Hagemann G / Bartho JD / Lammens K / Butryn A / Herzog F / Hopfner K-P | |||||||||
資金援助 | ドイツ, European Union, 2件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2023 タイトル: Structural basis for TBP displacement from TATA box DNA by the Swi2/Snf2 ATPase Mot1. 著者: Stephan Woike / Sebastian Eustermann / James Jung / Simon Josef Wenzl / Götz Hagemann / Joseph Bartho / Katja Lammens / Agata Butryn / Franz Herzog / Karl-Peter Hopfner / 要旨: The Swi2/Snf2 family transcription regulator Modifier of Transcription 1 (Mot1) uses adenosine triphosphate (ATP) to dissociate and reallocate the TATA box-binding protein (TBP) from and between ...The Swi2/Snf2 family transcription regulator Modifier of Transcription 1 (Mot1) uses adenosine triphosphate (ATP) to dissociate and reallocate the TATA box-binding protein (TBP) from and between promoters. To reveal how Mot1 removes TBP from TATA box DNA, we determined cryogenic electron microscopy structures that capture different states of the remodeling reaction. The resulting molecular video reveals how Mot1 dissociates TBP in a process that, intriguingly, does not require DNA groove tracking. Instead, the motor grips DNA in the presence of ATP and swings back after ATP hydrolysis, moving TBP to a thermodynamically less stable position on DNA. Dislodged TBP is trapped by a chaperone element that blocks TBP's DNA binding site. Our results show how Swi2/Snf2 proteins can remodel protein-DNA complexes through DNA bending without processive DNA tracking and reveal mechanistic similarities to RNA gripping DEAD box helicases and RIG-I-like immune sensors. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_14762.map.gz | 78.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-14762-v30.xml emd-14762.xml | 24.8 KB 24.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_14762.png | 83.4 KB | ||
マスクデータ | emd_14762_msk_1.map emd_14762_msk_2.map emd_14762_msk_3.map | 83.7 MB 83.7 MB 83.7 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-14762.cif.gz | 7.9 KB | ||
その他 | emd_14762_additional_1.map.gz emd_14762_half_map_1.map.gz emd_14762_half_map_2.map.gz | 78.9 MB 77.8 MB 77.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14762 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14762 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_14762_validation.pdf.gz | 844.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_14762_full_validation.pdf.gz | 843.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_14762_validation.xml.gz | 13 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_14762_validation.cif.gz | 15.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14762 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14762 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_14762.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | main map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.046 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_14762_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #2
ファイル | emd_14762_msk_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #3
ファイル | emd_14762_msk_3.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: composite map of N- and C-terminal focused refinements
ファイル | emd_14762_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | composite map of N- and C-terminal focused refinements | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map A
ファイル | emd_14762_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map A | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map B
ファイル | emd_14762_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map B | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Mot1:TBP:DNA complex in pre-hydrolysis conformation
全体 | 名称: Mot1:TBP:DNA complex in pre-hydrolysis conformation |
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要素 |
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-超分子 #1: Mot1:TBP:DNA complex in pre-hydrolysis conformation
超分子 | 名称: Mot1:TBP:DNA complex in pre-hydrolysis conformation / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4 |
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由来(天然) | 生物種: Chaetomium thermophilum (菌類) |
-分子 #1: DNA (36-MER)
分子 | 名称: DNA (36-MER) / タイプ: dna / ID: 1 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: DNA molecule (その他) |
分子量 | 理論値: 11.155128 KDa |
配列 | 文字列: (DC)(DG)(DG)(DC)(DC)(DG)(DG)(DG)(DC)(DG) (DC)(DC)(DC)(DG)(DG)(DC)(DA)(DT)(DG)(DG) (DC)(DG)(DG)(DC)(DC)(DT)(DA)(DT)(DA) (DA)(DA)(DA)(DG)(DG)(DG)(DC) |
-分子 #2: DNA (36-MER)
分子 | 名称: DNA (36-MER) / タイプ: dna / ID: 2 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: DNA molecule (その他) |
分子量 | 理論値: 11.008016 KDa |
配列 | 文字列: (DG)(DC)(DC)(DC)(DT)(DT)(DT)(DT)(DA)(DT) (DA)(DG)(DG)(DC)(DC)(DG)(DC)(DC)(DA)(DT) (DG)(DC)(DC)(DG)(DG)(DG)(DC)(DG)(DC) (DC)(DC)(DG)(DG)(DC)(DC)(DG) |
-分子 #3: Putative tata-box binding protein
分子 | 名称: Putative tata-box binding protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Chaetomium thermophilum (菌類) |
分子量 | 理論値: 29.676973 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SSGENLYFQG HMEAIQTHPA NAAQAKAFTA PGSLSFPGGA SEIANSTAPT NGASNGGQQQ GVQATSGAGV TPATPAATP GAGPAGPSGI TPTLQNIVAT VNLDCRLDLK TIALHARNAE YNPKRFAAVI MRIREPKTTA LIFASGKMVV T GAKSEDDS ...文字列: MGSSHHHHHH SSGENLYFQG HMEAIQTHPA NAAQAKAFTA PGSLSFPGGA SEIANSTAPT NGASNGGQQQ GVQATSGAGV TPATPAATP GAGPAGPSGI TPTLQNIVAT VNLDCRLDLK TIALHARNAE YNPKRFAAVI MRIREPKTTA LIFASGKMVV T GAKSEDDS KLASRKYARI IQKLGFNAKF TDFKIQNIVG SCDIKFPIRL EGLASKHHNF SSYEPELFPG LIYRMIKPKI VL LIFVSGK IVLTGAKVRE EIYQAFEMIY PVLQDFRKV UniProtKB: Putative tata-box binding protein |
-分子 #4: Helicase-like protein
分子 | 名称: Helicase-like protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Chaetomium thermophilum (菌類) |
分子量 | 理論値: 211.832688 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MATRLDRLVT ILETGSTRLI RDTAVNQLAD WQKQHPEELF NLLSRVVPYL RHKDWETRTT AAKAIGKIIE NAPLYDPNAG QDEAAPEPT NGSFEVKKEE EKDVLEQDNF FRLESLDVAT IVKYGRPLLR GGPVDYNLAA LDPQKRLAHL KKTLNGRLGL L GRVFEDEE ...文字列: MATRLDRLVT ILETGSTRLI RDTAVNQLAD WQKQHPEELF NLLSRVVPYL RHKDWETRTT AAKAIGKIIE NAPLYDPNAG QDEAAPEPT NGSFEVKKEE EKDVLEQDNF FRLESLDVAT IVKYGRPLLR GGPVDYNLAA LDPQKRLAHL KKTLNGRLGL L GRVFEDEE MPVEQIASPI TPNDAAGANG VGRQDGASND NQSQAIDESK MSARQLNVLK RKRKREAQKA AQGKSGFGDL SL RRSTTAG SDAFGEDTPM PDADSKKNKL AEYFSLDRPE NTEEDTKIVS EFKGPVLPIK SEIEADDSLE GAEWPFERLC EFL KVDLFD PQWETRHGAA MGLREVIRVH GAGAGRRRGK TRKENNDLNR QWLDDLAYRL LCVLMLDKFT DYSSDTSVAP IRET VGQTL GAVLRHISVE SVHAIYRLLY CMVTQEDLPS EQNMWAVCHG GMVGLRYVVA VRKDLLLQDG DMIDGVVRCV MQGLG DIDD DVRSVSAATL IPMAKEFVMM RRSALDSLIN IVWESLSNLG DDLSASTGKI MDLLATLCSF PEVLEAMKVS ASQDEE RSF TLLVPRLYPF LRHTITSVRL AVLKALMTFA NLGGETSQGW LNGRILRLIF QNIIVERDQD TLNMSLELWT TLVRRLA AR DPAILADEFE AHAEPMMQLA LHPIGVPRHP IPMNPALFQK PSGGTYSLPG ASQTNSRRSS PPEGERATKR RRKSTKAE D VAPSTHTHDV DGHMIQGEVD LVGVDVLIRS RISAAKAMGL IMSFIPTPRL ASYDTAVLQA LSSPYASTQL AAAMVIDEY AKNCSTPEVA SRFIEPLQKI IDLERPSHYR DLVTYVQRVR SASQQLINLF RDHGKVSQGK LPTLAVVVQG EPEAGPGAFS IANAEKVVN EDFERLKRLM APGQRLIALP QLNEAREQTV EVIEEAKAAK EARDARIKAA AACALVAMKV LPKKPSPLIK A IMDSIKTE ENQELQSRSA ATIARLVQLF TESGRRGPAE KVVANLVKFS CVEVAETPEF PIHAHKTNVI LSMQKEEDRV DH PDAVKYA REAKAARITR RGAKEALEIL SKNFGAELLE RVPTLRTFME EPLVRAFSGD LPPEARDPEN AFGQEIVDAM SVI RTMTPT LHPALHPFVM QQVPLVIKAL RSDLSVFRYM AAKCMATICS VITVDGMTAL VEKVLPSINN PLDLSFRQGA IEVI YHLIA VMGDAILPYV IFLIVPVLGR MSDSDNQIRL IATTSFATLV KLVPLEAGIP DPPGLSEELL KGRDRERTFI AQLLD PKKI EPFKIPVAIK AELRSYQQEG VNWLAFLNKY HLHGILCDDM GLGKTLQTIC IVASDHHQRA EEFARTGAPE VRKLPS LII CPPTLSGHWQ QEIKTYAPFL TVTAYVGSPA ERRAMKDSLD KTDIVITSYD VCRNDIDVIE KYNWNYCVLD EGHLIKN PK AKITLAVKRL TSNHRLILTG TPIQNNVLEL WSLFDFLMPG FLGAEKVFLD RFAKPIANSR YSKASSKEQE AGALAIEA L HKQVLPFLLR RLKEEVLNDL PPKILQNYYC DLSDLQRKLF EDFTKREGKK ITETAGRDDK EAKQHIFQAL QYMRKLCNS PALVMKPGHK AYEDTQKYLA KHGTTLEDPI HAPKLGALRD LLVDCGIGVE GQESSDPLYT PIKPHRALIF CQMKEMLDMV QNTVLKQML PSVSYLRLDG SVEANKRQDI VNKFNSDPSY DVLLLTTSVG GLGLNLTGAD TVIFVEHDWN PQKDLQAMDR A HRIGQKKV VNVYRIITRG TLEEKILSLQ RFKIDVASTV VNQQNAGLAT MDTDQILDLF NLGESGPSLI TDNKESIEGR EE DMVDIET GDVRRPGKKA AWLEGLGELW DNAQYEESFD LDGFLKTMQA AAWSHPQFEK UniProtKB: Helicase-like protein |
-分子 #5: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 1 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #6: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 1 / 式: ADP |
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分子量 | 理論値: 427.201 Da |
Chemical component information | ChemComp-ADP: |
-分子 #7: BERYLLIUM TRIFLUORIDE ION
分子 | 名称: BERYLLIUM TRIFLUORIDE ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 1 / 式: BEF |
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分子量 | 理論値: 66.007 Da |
Chemical component information | ChemComp-BEF: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.5 mg/mL | ||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: Incubation with 1 mM ADP, 1 mM BeF2 and 5 mM NaF before blotting. 0.05% beta-octyl glucoside added before blotting. | ||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 7 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: LEICA EM GP 詳細: Incubation on the grid for 20 seconds before plunging.. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 45.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm 最大 デフォーカス(公称値): 2.8000000000000003 µm 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 177422 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC |