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- EMDB-12738: 2.12 A cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis Ferritin -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-12738
タイトル2.12 A cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis Ferritin
マップデータSharpened map with Locspiral.
試料
  • 細胞器官・細胞要素: Mycobacterium tuberculosis ferritin
    • タンパク質・ペプチド: Ferritin BfrB
  • リガンド: water
キーワードIron storage / Ferroxidase / Bacterial Ferritin / Octahedral symmetry. / METAL TRANSPORT
機能・相同性
機能・相同性情報


Mtb iron assimilation by chelation / response to nitrosative stress / encapsulin nanocompartment / iron ion sequestering activity / ferroxidase / ferroxidase activity / ferric iron binding / peptidoglycan-based cell wall / iron ion transport / ferrous iron binding ...Mtb iron assimilation by chelation / response to nitrosative stress / encapsulin nanocompartment / iron ion sequestering activity / ferroxidase / ferroxidase activity / ferric iron binding / peptidoglycan-based cell wall / iron ion transport / ferrous iron binding / intracellular iron ion homeostasis / response to hypoxia / extracellular region / plasma membrane / cytoplasm / cytosol
類似検索 - 分子機能
Ferritin, prokaryotic-type / Ferritin / Ferritin-like diiron domain / Ferritin-like diiron domain profile. / Ferritin/DPS protein domain / Ferritin-like domain / Ferritin-like / Ferritin-like superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Bacterioferritin BfrB
類似検索 - 構成要素
生物種Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.1 Å
データ登録者Gijsbers A / Zhang Y
資金援助European Union, オランダ, 2件
OrganizationGrant number国
European Union (EU)766970European Union
Netherlands Organisation for Scientific Research (NWO)184.034.014 オランダ
引用ジャーナル: Acta Crystallogr D Struct Biol / 年: 2021
タイトル: Mycobacterium tuberculosis ferritin: a suitable workhorse protein for cryo-EM development.
著者: Abril Gijsbers / Yue Zhang / Ye Gao / Peter J Peters / Raimond B G Ravelli /
要旨: The use of cryo-EM continues to expand worldwide and calls for good-quality standard proteins with simple protocols for their production. Here, a straightforward expression and purification protocol ...The use of cryo-EM continues to expand worldwide and calls for good-quality standard proteins with simple protocols for their production. Here, a straightforward expression and purification protocol is presented that provides an apoferritin, bacterioferritin B (BfrB), from Mycobacterium tuberculosis with high yield and purity. A 2.12 Å resolution cryo-EM structure of BfrB is reported, showing the typical cage-like oligomer constituting of 24 monomers related by 432 symmetry. However, it also contains a unique C-terminal extension (164-181), which loops into the cage region of the shell and provides extra stability to the protein. Part of this region was ambiguous in previous crystal structures but could be built within the cryo-EM map. These findings and this protocol could serve the growing cryo-EM community in characterizing and pushing the limits of their electron microscopes and workflows.
履歴
登録2021年4月10日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年5月19日-
マップ公開2021年5月19日-
更新2024年7月10日-
現状2024年7月10日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 7
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 7
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-7o6e
  • 表面レベル: 7
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-7o6e
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_12738.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_12738.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Sharpened map with Locspiral.
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.65 Å/pix.
x 320 pix.
= 208.448 Å		0.65 Å/pix.
x 320 pix.
= 208.448 Å		0.65 Å/pix.
x 320 pix.
= 208.448 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.6514 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 7.0 / ムービー #1: 7
最小 - 最大0.0 - 25.939672000000002
平均 (標準偏差)0.4104235 (±1.6182348)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 208.448 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z0.65140.65140.6514
M x/y/z320320320
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z208.448208.448208.448
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS320320320
D min/max/mean0.00025.9400.410

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_12738_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: Relion postprocessing sharpened map

ファイルemd_12738_additional_1.map
注釈Relion postprocessing sharpened map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_12738_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: #1

ファイルemd_12738_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Mycobacterium tuberculosis ferritin

全体名称: Mycobacterium tuberculosis ferritin
要素
  • 細胞器官・細胞要素: Mycobacterium tuberculosis ferritin
    • タンパク質・ペプチド: Ferritin BfrB
  • リガンド: water

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超分子 #1: Mycobacterium tuberculosis ferritin

超分子名称: Mycobacterium tuberculosis ferritin / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 / 詳細: Mycobacterium tuberculosis ferritin
由来(天然)生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) / 株: H37Rv
分子量理論値: 490 KDa

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分子 #1: Ferritin BfrB

分子名称: Ferritin BfrB / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 24 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ferroxidase
由来(天然)生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌)
分子量理論値: 20.463936 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列:
MTEYEGPKTK FHALMQEQIH NEFTAAQQYV AIAVYFDSED LPQLAKHFYS QAVEERNHAM MLVQHLLDRD LRVEIPGVDT VRNQFDRPR EALALALDQE RTVTDQVGRL TAVARDEGDF LGEQFMQWFL QEQIEEVALM ATLVRVADRA GANLFELENF V AREVDVAP AASGAPHAAG GRL

UniProtKB: Bacterioferritin BfrB

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分子 #2: water

分子名称: water / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 1392 / 式: HOH
分子量理論値: 18.015 Da
Chemical component information

ChemComp-HOH:
WATER

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度11 mg/mL
緩衝液pH: 8
構成要素:
濃度式名称
20.0 mM(HOCH2)3CNH2Tris
150.0 mMNaClSodium Chloride
グリッドモデル: UltrAuFoil / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GOLD / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 支持フィルム - Film thickness: 2000 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 40 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.01 kPa
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細This sample was monodisperse.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
温度最低: 93.0 K / 最高: 105.0 K
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
詳細Basic direct alignments were done as well as astigmatism and coma alignment using AutoCTF
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2518 / 平均露光時間: 1.3 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2
詳細: Images were acquired in superresolution counting mode at a speed of 64 movies/hour and stored as tiff lzw non-gain normalised
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 最大 デフォーカス（補正後）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（補正後）: 0.2 µm / 倍率（補正後）: 76757 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm
最大 デフォーカス（公称値）: 1.4000000000000001 µm
最小 デフォーカス（公称値）: 0.4 µm / 倍率（公称値）: 130000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 249563
初期モデルモデルのタイプ: PDB ENTRY
PDBモデル - PDB ID:

3qd8

最終 再構成想定した対称性 - 点群: O (正8面体型対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用した粒子像数: 163568
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
最終 3次元分類クラス数: 40 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

3qd8


Chain - Chain ID: A / Chain - Residue range: 10-181 / Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model
精密化空間: REAL / プロトコル: OTHER / 温度因子: 28.1 / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient
得られたモデル

PDB-7o6e:
2.12 A cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis Ferritin

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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