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- EMDB-11548: Cryo-EM structure of MlaFEDB in complex with phospholipid -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-11548
タイトルCryo-EM structure of MlaFEDB in complex with phospholipid
マップデータ
試料
  • 複合体: MlaFEDB
    • 複合体: YrbD protein
      • タンパク質・ペプチド: YrbD protein
    • 複合体: ABC transporter maintaining OM lipid asymmetry, cytoplasmic STAS component
      • タンパク質・ペプチド: ABC transporter maintaining OM lipid asymmetry, cytoplasmic STAS component
    • 複合体: Toluene tolerance protein Ttg2A
      • タンパク質・ペプチド: Toluene tolerance protein Ttg2A
    • 複合体: Uncharacterized protein
      • タンパク質・ペプチド: Uncharacterized protein
  • リガンド: 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine
キーワードphospholipid / phospholipid transport / ABC transporter / MlaFEDB / MlaFE / MlaD / MlaE / MlaF / MlaB / outer membrane / Mla transport pathway / LIPID TRANSPORT
機能・相同性
機能・相同性情報


phospholipid transfer activity / intermembrane phospholipid transfer / phospholipid-translocating ATPase complex / phospholipid transport / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / response to antibiotic / DNA damage response / ATP hydrolysis activity / ATP binding / membrane / cytosol
類似検索 - 分子機能
: / Probable phospholipid ABC transporter-binding protein MlaD / ABC transport permease subunit MlaE, Proteobacteria / ABC transporter permease MalE / Permease MlaE / STAS domain / Mce/MlaD / MlaD protein / STAS domain profile. / STAS domain ...: / Probable phospholipid ABC transporter-binding protein MlaD / ABC transport permease subunit MlaE, Proteobacteria / ABC transporter permease MalE / Permease MlaE / STAS domain / Mce/MlaD / MlaD protein / STAS domain profile. / STAS domain / STAS domain superfamily / ABC transporter-like, conserved site / ABC transporters family signature. / ABC transporter / ABC transporter-like, ATP-binding domain / ATP-binding cassette, ABC transporter-type domain profile. / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
YrbD protein / Intermembrane phospholipid transport system permease protein MlaE / Intermembrane phospholipid transport system binding protein MlaB / Toluene tolerance protein Ttg2A / Anti-sigma factor antagonist
類似検索 - 構成要素
生物種Escherichia coli B185 (大腸菌) / Escherichia coli (大腸菌) / Escherichia coli 909945-2 (大腸菌) / Escherichia coli 2.3916 (大腸菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å
データ登録者Dong CJ / Dong HH
資金援助 中国, 英国, 2件
OrganizationGrant number国
National Science Foundation (NSF, China)2017YFA0504803, 2018YFA0507700, 2017YFC0840100, 2017YFC00840101,31900039,81971974 中国
Wellcome TrustWT106121MA 英国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2021
タイトル: Structural insights into outer membrane asymmetry maintenance in Gram-negative bacteria by MlaFEDB.
著者: Xiaodi Tang / Shenghai Chang / Wen Qiao / Qinghua Luo / Yuejia Chen / Zhiying Jia / James Coleman / Ke Zhang / Ting Wang / Zhibo Zhang / Changbin Zhang / Xiaofeng Zhu / Xiawei Wei / ...著者: Xiaodi Tang / Shenghai Chang / Wen Qiao / Qinghua Luo / Yuejia Chen / Zhiying Jia / James Coleman / Ke Zhang / Ting Wang / Zhibo Zhang / Changbin Zhang / Xiaofeng Zhu / Xiawei Wei / Changjiang Dong / Xing Zhang / Haohao Dong /
要旨: The highly asymmetric outer membrane of Gram-negative bacteria functions in the defense against cytotoxic substances, such as antibiotics. The Mla pathway maintains outer membrane lipid asymmetry by ...The highly asymmetric outer membrane of Gram-negative bacteria functions in the defense against cytotoxic substances, such as antibiotics. The Mla pathway maintains outer membrane lipid asymmetry by transporting phospholipids between the inner and outer membranes. It comprises six Mla proteins, MlaFEDBCA, including the ABC transporter MlaFEDB, which functions via an unknown mechanism. Here we determine cryo-EM structures of Escherichia coli MlaFEDB in an apo state and bound to phospholipid, ADP or AMP-PNP to a resolution of 3.3-4.1 Å and establish a proteoliposome-based transport system that includes MlaFEDB, MlaC and MlaA-OmpF to monitor the transport direction of phospholipids. In vitro transport assays and in vivo membrane permeability assays combined with mutagenesis identify functional residues that not only recognize and transport phospholipids but also regulate the activity and structural stability of the MlaFEDB complex. Our results provide mechanistic insights into the Mla pathway, which could aid antimicrobial drug development.
履歴
登録2020年7月30日-
ヘッダ(付随情報) 公開2020年11月25日-
マップ公開2020年11月25日-
更新2024年5月1日-
現状2024年5月1日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.02
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.02
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6zy3
  • 表面レベル: 0.02
  • UCSF Chimeraによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_11548.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_11548.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.014 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.02 / ムービー #1: 0.02
最小 - 最大-0.10575057 - 0.172464
平均 (標準偏差)0.00023377367 (±0.004246845)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 259.584 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.0141.0141.014
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z259.584259.584259.584
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ172172172
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-0.1060.1720.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : MlaFEDB

全体名称: MlaFEDB
要素
  • 複合体: MlaFEDB
    • 複合体: YrbD protein
      • タンパク質・ペプチド: YrbD protein
    • 複合体: ABC transporter maintaining OM lipid asymmetry, cytoplasmic STAS component
      • タンパク質・ペプチド: ABC transporter maintaining OM lipid asymmetry, cytoplasmic STAS component
    • 複合体: Toluene tolerance protein Ttg2A
      • タンパク質・ペプチド: Toluene tolerance protein Ttg2A
    • 複合体: Uncharacterized protein
      • タンパク質・ペプチド: Uncharacterized protein
  • リガンド: 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine

+
超分子 #1: MlaFEDB

超分子名称: MlaFEDB / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4

+
超分子 #2: YrbD protein

超分子名称: YrbD protein / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Escherichia coli B185 (大腸菌)

+
超分子 #3: ABC transporter maintaining OM lipid asymmetry, cytoplasmic STAS ...

超分子名称: ABC transporter maintaining OM lipid asymmetry, cytoplasmic STAS component
タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)

+
超分子 #4: Toluene tolerance protein Ttg2A

超分子名称: Toluene tolerance protein Ttg2A / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3
由来(天然)生物種: Escherichia coli 909945-2 (大腸菌)

+
超分子 #5: Uncharacterized protein

超分子名称: Uncharacterized protein / タイプ: complex / ID: 5 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #4
由来(天然)生物種: Escherichia coli 2.3916 (大腸菌)

+
分子 #1: YrbD protein

分子名称: YrbD protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli B185 (大腸菌)
分子量理論値: 19.593133 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MQTKKNEIWV GIFLLAALLA ALFVCLKAAN VTSIRTEPTY TLYATFDNIG GLKARSPVSI GGVVVGRVAD ITLDPKTYLP RVTLEIEQR YNHIPDTSSL SIRTSGLLGE QYLALNVGFE DPELGTAILK DGDTIQDTKS AMVLEDLIGQ FLYGSKGDDN K NSGDAPAA APGNNETTEP VGTTK

UniProtKB: YrbD protein

+
分子 #2: ABC transporter maintaining OM lipid asymmetry, cytoplasmic STAS ...

分子名称: ABC transporter maintaining OM lipid asymmetry, cytoplasmic STAS component
タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 11.795488 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MSESLSWMQT GDTLALSGEL DQDVLLPLWE MREEAVKGIT CIDLSRVSRV DTGGLALLLH LIDLAKKQGN NVTLQGVNDK VYTLAKLYN LPADVLPRHH HHHHHH

UniProtKB: Anti-sigma factor antagonist

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分子 #3: Toluene tolerance protein Ttg2A

分子名称: Toluene tolerance protein Ttg2A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli 909945-2 (大腸菌)
分子量理論値: 29.128801 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MEQSVANLVD MRDVSFTRGN RCIFDNISLT VPRGKITAIM GPSGIGKTTL LRLIGGQIAP DHGEILFDGE NIPAMSRSRL YTVRKRMSM LFQSGALFTD MNVFDNVAYP LREHTQLPAP LLHSTVMMKL EAVGLRGAAK LMPSELSGGM ARRAALARAI A LEPDLIMF ...文字列:
MEQSVANLVD MRDVSFTRGN RCIFDNISLT VPRGKITAIM GPSGIGKTTL LRLIGGQIAP DHGEILFDGE NIPAMSRSRL YTVRKRMSM LFQSGALFTD MNVFDNVAYP LREHTQLPAP LLHSTVMMKL EAVGLRGAAK LMPSELSGGM ARRAALARAI A LEPDLIMF DEPFVGQDPI TMGVLVKLIS ELNSALGVTC VVVSHDVPEV LSIADHAWIL ADKKIVAHGS AQALQANPDP RV RQFLDGI ADGPVPFRYP AGDYHADLLP GS

UniProtKB: Toluene tolerance protein Ttg2A

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分子 #4: Uncharacterized protein

分子名称: Uncharacterized protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli 2.3916 (大腸菌)
分子量理論値: 27.885162 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MLLNALASLG HKGIKTLRTF GRAGLMLFNA LVGKPEFRKH APLLVRQLYN VGVLSMLIIV VSGVFIGMVL GLQGYLVLTT YSAETSLGM LVALSLLREL GPVVAALLFA GRAGSALTAE IGLMRATEQL SSMEMMAVDP LRRVISPRFW AGVISLPLLT V IFVAVGIW ...文字列:
MLLNALASLG HKGIKTLRTF GRAGLMLFNA LVGKPEFRKH APLLVRQLYN VGVLSMLIIV VSGVFIGMVL GLQGYLVLTT YSAETSLGM LVALSLLREL GPVVAALLFA GRAGSALTAE IGLMRATEQL SSMEMMAVDP LRRVISPRFW AGVISLPLLT V IFVAVGIW GGSLVGVSWK GIDSGFFWSA MQNAVDWRMD LVNCLIKSVV FAITVTWISL FNGYDAIPTS AGISRATTRT VV HSSLAVL GLDFVLTALM FGN

UniProtKB: Intermembrane phospholipid transport system permease protein MlaE

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分子 #5: 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine

分子名称: 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 1 / 式: PEE
分子量理論値: 744.034 Da
Chemical component information

ChemComp-PEE:
1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine / DOPE, リン脂質*YM

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.8
構成要素:
濃度式
20.0 mMTris-HCl
150.0 mMNaCl
0.05 %LMNG

詳細: 20 mM Tris-Cl, pH 7.8, 150 mM NaCl and 0.05% LMNG
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 298 K

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
平均電子線量: 40.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成使用したクラス数: 2 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 97672
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: RELION

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原子モデル構築 1

精密化空間: RECIPROCAL / プロトコル: AB INITIO MODEL / 温度因子: 77
得られたモデル

PDB-6zy3:
Cryo-EM structure of MlaFEDB in complex with phospholipid

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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