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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10797 | |||||||||
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タイトル | Xenorhabdus nematophila XptA1 in complex with porcine mucosa heparin | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | toxin / complex / glycan | |||||||||
機能・相同性 | TcA receptor binding domain / TcA receptor binding domain / Insecticidal toxin complex/plasmid virulence protein / Tc toxin complex TcA, C-terminal TcB-binding domain / Neuraminidase-like domain / Salmonella virulence plasmid 28.1kDa A protein / Tc toxin complex TcA C-terminal TcB-binding domain / Neuraminidase-like domain / A component of insecticidal toxin complex (Tc) 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Xenorhabdus nematophila (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Roderer D / Broecker F / Sitsel O / Kaplonek P / Leidreiter F / Seeberger PH / Raunser S | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2020 タイトル: Glycan-dependent cell adhesion mechanism of Tc toxins. 著者: Daniel Roderer / Felix Bröcker / Oleg Sitsel / Paulina Kaplonek / Franziska Leidreiter / Peter H Seeberger / Stefan Raunser / 要旨: Toxin complex (Tc) toxins are virulence factors of pathogenic bacteria. Tcs are composed of three subunits: TcA, TcB and TcC. TcA facilitates receptor-toxin interaction and membrane permeation, TcB ...Toxin complex (Tc) toxins are virulence factors of pathogenic bacteria. Tcs are composed of three subunits: TcA, TcB and TcC. TcA facilitates receptor-toxin interaction and membrane permeation, TcB and TcC form a toxin-encapsulating cocoon. While the mechanisms of holotoxin assembly and pore formation have been described, little is known about receptor binding of TcAs. Here, we identify heparins/heparan sulfates and Lewis antigens as receptors for different TcAs from insect and human pathogens. Glycan array screening reveals that all tested TcAs bind negatively charged heparins. Cryo-EM structures of Morganella morganii TcdA4 and Xenorhabdus nematophila XptA1 reveal that heparins/heparan sulfates unexpectedly bind to different regions of the shell domain, including receptor-binding domains. In addition, Photorhabdus luminescens TcdA1 binds to Lewis antigens with micromolar affinity. Here, the glycan interacts with the receptor-binding domain D of the toxin. Our results suggest a glycan dependent association mechanism of Tc toxins on the host cell surface. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10797.map.gz | 9.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-10797-v30.xml emd-10797.xml | 14.2 KB 14.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_10797.png | 152.2 KB | ||
Filedesc metadata | emd-10797.cif.gz | 7.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10797 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10797 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10797_validation.pdf.gz | 396.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_10797_full_validation.pdf.gz | 395.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10797_validation.xml.gz | 7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_10797_validation.cif.gz | 8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10797 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10797 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10797.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.21 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Xenorhabdus nematophila XptA1 pentamer in complex with porcine mu...
全体 | 名称: Xenorhabdus nematophila XptA1 pentamer in complex with porcine mucosa heparin |
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要素 |
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-超分子 #1: Xenorhabdus nematophila XptA1 pentamer in complex with porcine mu...
超分子 | 名称: Xenorhabdus nematophila XptA1 pentamer in complex with porcine mucosa heparin タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Xenorhabdus nematophila (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 1.4 MDa |
-分子 #1: A component of insecticidal toxin complex (Tc)
分子 | 名称: A component of insecticidal toxin complex (Tc) / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Xenorhabdus nematophila (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 287.120781 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MIKVNELLDK INRKRSGDTL LLTNISFMSF SEFRHRTSGT LTWRETDFLY QQAHQESKQN KLEELRILSR ANPQLANITN LNITPSTLN NSYNSWFYGR AHRFVKPGSI ASIFSPAAYL TELYREAKDF HPDNSQYHLN KRRPDIASLA LTQNNMDEEI S TLSLSNEL ...文字列: MIKVNELLDK INRKRSGDTL LLTNISFMSF SEFRHRTSGT LTWRETDFLY QQAHQESKQN KLEELRILSR ANPQLANITN LNITPSTLN NSYNSWFYGR AHRFVKPGSI ASIFSPAAYL TELYREAKDF HPDNSQYHLN KRRPDIASLA LTQNNMDEEI S TLSLSNEL LLHNIQTLEK TDYNGVMKML STYRQTGMTP YHLPYESARQ AILLQDKNLT AFSRNTDVAE LMDPTSLLAI KT DISPELY QILVEEITPE NSTELMKKNF GTDDVLIFKS YASLARYYDL SYDELSLFVN LSFGKKNTNQ QYKNEQLITL VND GNDTAT ARLIKRTRKD FYDSHLNYAE LIPIKENEYK YNFSVKKTEP DHLDFRLQNG DKEYIYQDKN FVPIANTHYS IPIK LTTEQ ITNGITLRLW RVKPNPSDAI NANAHFKMME FPGDIFLLKL NKAIRLYKAT GISPEDIWQV IESIYDDLTI DSNVL GKLF YVQYYMQHYN ISVSDALVLC HSDISQYSTK QQPSHFTMLF NTPLLNGQEF SADNTKLDLT PGESKNHFYL GIMKRA FRV NDTELYTLWK LANGGTNPEF MCSIENLSLL YRVRLLADIH HLTVNELSML LSVSPYVNTK IALFSDTALT QLISFLF QC TQWLTTQKWS VSDVFLMTTD NYSTVLTPDI ENLITTLSNG LSTLSLGDDE LIRAAAPLIA ASIQMDSAKT AETILLWI N QIKPQGLTFD DFMIIAANRD RSENETSNMV AFCQVLGQLS LIVRNIGLSE NELTLLVTKP EKFQSETTAL QHDLPTLQA LTRFHAVIMR CGSYATEILT ALELGALTAE QLAVALKFDA QVVTQALQQT DLGVNTFTNW RTIDVTLQWL DVAATLGITP DGVAALIKL KYVGEPETPM PTFDDWQAAS TLLQAGLNSQ QSDQLQAWLD EATTTAASAY YIKNGAPQQI KSRDELYSYL L IDNQVSAQ VKTTRVAEAI ASIQLYVNRA LNNVEGKVSK PVKTRQFFCD WETYNRRYST WAGVSELAYY PENYIDPTIR IG QTGMMNN LLQQLSQSQL NIDTVEDSFK NYLTAFEDVA NLQVISGYHD SINVNEGLTY LIGYSQTEPR IYYWRNVDHQ KCQ HGQFAA NAWGEWKKIE IPINVWQENI RPVIYKSRLY LLWLEQKELK NESEDGKIDI TDYILKLSHI RYDGSWSSPF NFNV TDKIE NLINKKASIG MYCSSDYEKD VIIVYFHEKK DNYSFNSLPA REGMTINPDM TLSILTENDL DAIVKSTLSE LDTRT EYKV NNQFATDYLA EYKESITTKN KLASFTGNIF DLSYISPGNG HINLTFNPSM EINFSKGNIY NDEVKYLLSM VEDETV ILF DYDRHDEMLG KEEEVFHYGT LDFIISIDLK NAEYFRVLMH LRTKEKIPRK SEIGVGINYD YESNDAEFKL DTNIVLD WK DNTGVWHTIC ESFTNDVSII NNMGNIAALF LREDPCVYLC SIATDIKIAS SMIEQIQDKN ISFLLKNGSD ILVELNAE D HVASKPSHES DPMVYDFNQV KVDIEGYDIP LVSEFIIKQP DGGYNDIVIE SPIHIKLKSK DTSNVISLHK MPSGTQYMQ IGPYRTRLNT LFSRKLAERA NIGIDNVLSM ETQNLPEPQL GEGFYATFKL PPYNKEEHGD ERWFKIHIGN IDGNSARQPY YEGMLSDIE TTVTLFVPYA KGYYIREGVR LGVGYKKIIY DKSWESAFFY FDETKNQFIF INDADHDSGM TQQGIVKNIK K YKGFIHVV VMKNNTEPMD FNGANAIYFW ELFYYTPMMV FQRLLQEQNF TESTRWLRYI WNPAGYSVQG EMQDYYWNVR PL EEDTSWN ANPLDSVDPD AVAQHDPMHY KVATFMKMLD LLITRGDSAY RQLERDTLNE AKMWYVQALT LLGDEPYFSL DND WSEPRL EEAASQTMRH HYQHKMLQLR QRAALPTKRT ANSLTALFLP QINKKLQGYW QTLTQRLYNL RHNLTIDGQP LSLS LYATP ADPSMLLSAA ITASQGGGDL PHAVMPMYRF PVILENAKWG VSQLIQFGNT LLSITERQDA EALAEILQTQ GSELA LQSI KMQDKVMAEI DADKLALQES RHGAQSRFDS FNTLYDEDVN AGEKQAMDLY LSSSVLSTSG TALHMAAAAA DLVPNI YGF AVGGSRFGAL FNASAIGIEI SASATRIAAD KISQSEIYRR RRQEWEIQRN NAEAEIKQID AQLATLAVRR EAAVLQK NY LETQQAQTQA QLAFLQSKFS NAALYNWLRG RLSAIYYQFY DLAVSLCLMA EQTYQYELNN AAAHFIKPGA WHGTYAGL L AGETLMLNLA QMEKSYLEKD ERALEVTRTV SLAEVYAGLT ENSFILKDKV TELVNAGEGS AGTTLNGLNV EGTQLQASL KLSDLNIATD YPDGLGNTRR IKQISVTLPA LLGPYQDVRA ILSYGGSTMM PRGCKAIAIS HGMNDSGQFQ MDFNDAKYLP FEGLPVADT GTLTLSFPGI SGKQKSLLLS LSDIILHIRY TIRS UniProtKB: A component of insecticidal toxin complex (Tc) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.10 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: GOLD / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 2 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 285 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
詳細 | 0.10 mg/ml XptA1 were pre-applied on the grid for 30s. Subsequently, the grid was manually blotted and 0.30 mg/ml porcine mucosa heparin was applied and incubated for 4 min. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 実像数: 1855 / 平均電子線量: 52.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |