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- EMDB-10658: CryoEM structure of the ring-shaped virulence factor EspB from My... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-10658
タイトルCryoEM structure of the ring-shaped virulence factor EspB from Mycobacterium tuberculosis
マップデータSharped map
試料
  • 複合体: EspB Heptameric complex
    • タンパク質・ペプチド: ESX-1 secretion-associated protein EspB
キーワードM. tuberculosis / ESX-1 / Type VII secretion system / EspB / Rv3881c / EsxA / CFP10 / ESAT-6 / TRANSPORT PROTEIN
機能・相同性ESX-1 secretion-associated protein EspB, PE domain / ESX-1 secreted protein B PE domain / protein secretion by the type VII secretion system / PPE superfamily / biological process involved in interaction with host / extracellular region / identical protein binding / ESX-1 secretion-associated protein EspB
機能・相同性情報
生物種Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) / Mycobacterium tuberculosis (strain ATCC 25618 / H37Rv) (結核菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.37 Å
データ登録者Piton J / Pojer F
資金援助 スイス, 1件
OrganizationGrant number国
Swiss National Science Foundation31003A_162641 スイス
引用ジャーナル: J Struct Biol X / 年: 2020
タイトル: High resolution CryoEM structure of the ring-shaped virulence factor EspB from .
著者: Jérémie Piton / Florence Pojer / Soichi Wakatsuki / Cornelius Gati / Stewart T Cole /
要旨: The EspB protein of is a 60 kDa virulence factor, implicated in conjugation and exported by the ESX-1 system of which it may also be a component. Previous attempts to obtain high-resolution maps of ...The EspB protein of is a 60 kDa virulence factor, implicated in conjugation and exported by the ESX-1 system of which it may also be a component. Previous attempts to obtain high-resolution maps of EspB by cryo-electron microscopic examination of single particles have been thwarted by severe orientation bias of the particles. This was overcome by using detergent as a surfactant thereby allowing reconstruction of the EspB structure at 3.37 Å resolution. The final structure revealed the N-terminal domain of EspB to be organized as a cylindrical heptamer with dimensions of 90 Å x 90 Å and a central channel of 45 Å diameter whereas the C-terminal domain was unstructured. New atomic insight was obtained into the helical packing required for protomer interactions and the overall electrostatic potential. The external surface is electronegatively charged while the channel is lined with electropositive patches. EspB thus has many features of a pore-like transport protein that might allow the passage of an ESX-1 substrate such as the 35 Å diameter EsxA-EsxB heterodimer or B-form DNA consistent with its proposed role in DNA uptake.
履歴
登録2020年2月3日-
ヘッダ(付随情報) 公開2020年6月17日-
マップ公開2020年6月17日-
更新2024年5月22日-
現状2024年5月22日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.8
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.8
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6xzc
  • 表面レベル: 0.8
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_10658.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_10658.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Sharped map
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.058 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.8 / ムービー #1: 0.8
最小 - 最大-2.6964684 - 5.1885586
平均 (標準偏差)0.00056320796 (±0.10025215)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ400400400
Spacing400400400
セルA=B=C: 423.19998 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.0581.0581.058
M x/y/z400400400
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z423.200423.200423.200
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS400400400
D min/max/mean-2.6965.1890.001

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_10658_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Map A

ファイルemd_10658_half_map_1.map
注釈Map A
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: Map B

ファイルemd_10658_half_map_2.map
注釈Map B
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : EspB Heptameric complex

全体名称: EspB Heptameric complex
要素
  • 複合体: EspB Heptameric complex
    • タンパク質・ペプチド: ESX-1 secretion-associated protein EspB

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超分子 #1: EspB Heptameric complex

超分子名称: EspB Heptameric complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌)
分子量理論値: 329 KDa

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分子 #1: ESX-1 secretion-associated protein EspB

分子名称: ESX-1 secretion-associated protein EspB / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 7 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Mycobacterium tuberculosis (strain ATCC 25618 / H37Rv) (結核菌)
株: ATCC 25618 / H37Rv
分子量理論値: 47.637527 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列: MTQSQTVTVD QQEILNRANE VEAPMADPPT DVPITPCELT AAKNAAQQLV LSADNMREYL AAGAKERQRL ATSLRNAAKA YGEVDEEAA TALDNDGEGT VQAESAGAVG GDSSAELTDT PRVATAGEPN FMDLKEAARK LETGDQGASL AHFADGWNTF N LTLQGDVK ...文字列:
MTQSQTVTVD QQEILNRANE VEAPMADPPT DVPITPCELT AAKNAAQQLV LSADNMREYL AAGAKERQRL ATSLRNAAKA YGEVDEEAA TALDNDGEGT VQAESAGAVG GDSSAELTDT PRVATAGEPN FMDLKEAARK LETGDQGASL AHFADGWNTF N LTLQGDVK RFRGFDNWEG DAATACEASL DQQRQWILHM AKLSAAMAKQ AQYVAQLHVW ARREHPTYED IVGLERLYAE NP SARDQIL PVYAEYQQRS EKVLTEYNNK AALEPVNPPK PPPAIKIDPP PPPQEQGLIP GFLMPPSDGS GVTPGTGMPA APM VPPTGS PGGGLPADTA AQLTSAGREA AALSGDVAVK AASLGGGGGG GVPSAPLGSA IGGAESVRPA GAGDIAGLGQ GRAG GGAAL GGGGMGMPMG AAHQGQGGAK SKGSQQEDEA LYTEDRAWTE AVIGNRRRQD SKESK

UniProtKB: ESX-1 secretion-associated protein EspB

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度5 mg/mL
緩衝液pH: 8 / 構成要素:
濃度式
20.0 mMTris-HCl
150.0 mMNaCl
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 10 sec.
凍結凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細: 0.05% fluorinated octylmaltoside was add into protein solution and immediately applied to a freshly glow-discharged holey carbon grid. ). Excess liquid was blotted for 2.3 s using an FEI ...詳細: 0.05% fluorinated octylmaltoside was add into protein solution and immediately applied to a freshly glow-discharged holey carbon grid. ). Excess liquid was blotted for 2.3 s using an FEI Vitrobot Mark IV and the sample was plunge frozen in liquid ethane..
詳細This sample was monodiperse

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: SUPER-RESOLUTION / 実像数: 2600 / 平均電子線量: 30.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系最大 デフォーカス（補正後）: 3.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 292964
初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成使用したクラス数: 50 / 想定した対称性 - 点群: C7 (7回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.37 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.0) / 使用した粒子像数: 143350
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.0)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: cryoSPARC

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

4xxx


Chain - Chain ID: A / Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT
得られたモデル

PDB-6xzc:
CryoEM structure of the ring-shaped virulence factor EspB from Mycobacterium tuberculosis

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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