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Structure paper

タイトルStructural basis for processive daughter-strand synthesis and proofreading by the human leading-strand DNA polymerase Pol ε.
ジャーナル・号・ページNat Struct Mol Biol, Year 2024
掲載日2024年8月7日
著者Johann J Roske / Joseph T P Yeeles /
PubMed 要旨During chromosome replication, the nascent leading strand is synthesized by DNA polymerase epsilon (Pol ε), which associates with the sliding clamp processivity factor proliferating cell nuclear ...During chromosome replication, the nascent leading strand is synthesized by DNA polymerase epsilon (Pol ε), which associates with the sliding clamp processivity factor proliferating cell nuclear antigen (PCNA) to form a processive holoenzyme. For high-fidelity DNA synthesis, Pol ε relies on nucleotide selectivity and its proofreading ability to detect and excise a misincorporated nucleotide. Here, we present cryo-electron microscopy (cryo-EM) structures of human Pol ε in complex with PCNA, DNA and an incoming nucleotide, revealing how Pol ε associates with PCNA through its PCNA-interacting peptide box and additional unique features of its catalytic domain. Furthermore, by solving a series of cryo-EM structures of Pol ε at a mismatch-containing DNA, we elucidate how Pol ε senses and edits a misincorporated nucleotide. Our structures delineate steps along an intramolecular switching mechanism between polymerase and exonuclease activities, providing the basis for a proofreading mechanism in B-family replicative polymerases.
リンクNat Struct Mol Biol / PubMed:39112807
手法EM (単粒子)
解像度3.3 - 4.2 Å
構造データ

EMDB-50222, PDB-9f6d:
Human DNA polymerase epsilon bound to DNA and PCNA (open conformation)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.6 Å

EMDB-50223, PDB-9f6e:
Human DNA polymerase epsilon bound to DNA and PCNA (ajar conformation)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.74 Å

EMDB-50224, PDB-9f6f:
Human DNA polymerase epsilon bound to DNA and PCNA (closed conformation)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.75 Å

EMDB-50225, PDB-9f6i:
Human DNA Polymerase epsilon bound to T-C mismatched DNA (Post-Insertion state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-50226, PDB-9f6j:
Human DNA Polymerase epsilon bound to T-C mismatched DNA (Polymerase Arrest state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.9 Å

EMDB-50227, PDB-9f6k:
Human DNA Polymerase epsilon bound to T-C mismatched DNA (Frayed Substrate state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.2 Å

EMDB-50228, PDB-9f6l:
Human DNA Polymerase epsilon bound to T-C mismatched DNA (Mismatch Excision state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.9 Å

化合物

ChemComp-SF4:
IRON/SULFUR CLUSTER

ChemComp-DDS:
2',3'-dideoxyadenosine triphosphate / ddATP

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-CA:
Unknown entry / カルシウムジカチオン

由来
  • homo sapiens (ヒト)
  • synthetic construct (人工物)
キーワードREPLICATION / DNA / polymerase / epsilon / PCNA / leading strand / human / replisome / proofreading

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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