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タイトルStructural basis of negative regulation of CRISPR-Cas7-11 by TPR-CHAT.
ジャーナル・号・ページSignal Transduct Target Ther, Vol. 9, Issue 1, Page 111, Year 2024
掲載日2024年5月13日
著者Tian Hong / Qinghua Luo / Haiyun Ma / Xin Wang / Xinqiong Li / Chongrong Shen / Jie Pang / Yan Wang / Yuejia Chen / Changbin Zhang / Zhaoming Su / Haohao Dong / Xiaodi Tang /
PubMed 要旨CRISPR‒Cas7-11 is a Type III-E CRISPR-associated nuclease that functions as a potent RNA editing tool. Tetratrico-peptide repeat fused with Cas/HEF1-associated signal transducer (TPR-CHAT) acts as ...CRISPR‒Cas7-11 is a Type III-E CRISPR-associated nuclease that functions as a potent RNA editing tool. Tetratrico-peptide repeat fused with Cas/HEF1-associated signal transducer (TPR-CHAT) acts as a regulatory protein that interacts with CRISPR RNA (crRNA)-bound Cas7-11 to form a CRISPR-guided caspase complex (Craspase). However, the precise modulation of Cas7-11's nuclease activity by TPR-CHAT to enhance its utility requires further study. Here, we report cryo-electron microscopy (cryo-EM) structures of Desulfonema ishimotonii (Di) Cas7-11-crRNA, complexed with or without the full length or the N-terminus of TPR-CHAT. These structures unveil the molecular features of the Craspase complex. Structural analysis, combined with in vitro nuclease assay and electrophoretic mobility shift assay, reveals that DiTPR-CHAT negatively regulates the activity of DiCas7-11 by preventing target RNA from binding through the N-terminal 65 amino acids of DiTPR-CHAT (DiTPR-CHAT). Our work demonstrates that DiTPR-CHAT can function as a small unit of DiCas7-11 regulator, potentially enabling safe applications to prevent overcutting and off-target effects of the CRISPR‒Cas7-11 system.
リンクSignal Transduct Target Ther / PubMed:38735995 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.86 - 3.53 Å
構造データ

37640

8wm4

EMDB-37640, PDB-8wm4:
Cryo-EM structure of DiCas7-11 in complex with crRNA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.93 Å

37649

8wmc

EMDB-37649, PDB-8wmc:
Cryo-EM structure of DiCas7-11-crRNA in complex with regulator
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.9 Å

37653

8wmi

EMDB-37653, PDB-8wmi:
Cryo-EM structure of DiCas7-11 mutant in complex with crRNA
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.53 Å

37655

8wml

EMDB-37655, PDB-8wml:
Cryo-EM structure of Cas7-11-crRNA bound to N-terminal of TPR-CHAT
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.86 Å

化合物

ChemComp-ZN:
Unknown entry

由来
  • escherichia coli (大腸菌)
  • desulfonema ishimotonii (バクテリア)
キーワードIMMUNE SYSTEM / CRISPR-Cas / Gene editing / TPR-CHAT / Cas7-11

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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