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タイトルTransient disome complex formation in native polysomes during ongoing protein synthesis captured by cryo-EM.
ジャーナル・号・ページNat Commun, Vol. 15, Issue 1, Page 1756, Year 2024
掲載日2024年2月26日
著者Timo Flügel / Magdalena Schacherl / Anett Unbehaun / Birgit Schroeer / Marylena Dabrowski / Jörg Bürger / Thorsten Mielke / Thiemo Sprink / Christoph A Diebolder / Yollete V Guillén Schlippe / Christian M T Spahn /
PubMed 要旨Structural studies of translating ribosomes traditionally rely on in vitro assembly and stalling of ribosomes in defined states. To comprehensively visualize bacterial translation, we reactivated ex ...Structural studies of translating ribosomes traditionally rely on in vitro assembly and stalling of ribosomes in defined states. To comprehensively visualize bacterial translation, we reactivated ex vivo-derived E. coli polysomes in the PURE in vitro translation system and analyzed the actively elongating polysomes by cryo-EM. We find that 31% of 70S ribosomes assemble into disome complexes that represent eight distinct functional states including decoding and termination intermediates, and a pre-nucleophilic attack state. The functional diversity of disome complexes together with RNase digest experiments suggests that paused disome complexes transiently form during ongoing elongation. Structural analysis revealed five disome interfaces between leading and queueing ribosomes that undergo rearrangements as the leading ribosome traverses through the elongation cycle. Our findings reveal at the molecular level how bL9's CTD obstructs the factor binding site of queueing ribosomes to thwart harmful collisions and illustrate how translation dynamics reshape inter-ribosomal contacts.
リンクNat Commun / PubMed:38409277 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度3.09 - 9.11 Å
構造データ

EMDB-17274: Escherichia coli paused disome complex (decoding | rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 9.06 Å

EMDB-17275: Escherichia coli paused disome complex (decoding | closed non-rot. PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 8.18 Å

EMDB-17276: Escherichia coli paused disome complex (decoding | POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 9.11 Å

EMDB-17277: Escherichia coli paused disome complex (partially accommodated A-tRNA | closed non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.9 Å

EMDB-17278: Escherichia coli paused disome complex (partially accommodated A-tRNA | rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 8.93 Å

EMDB-17279: Escherichia coli paused disome complex (open non-rotated PRE | closed non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 8.41 Å

EMDB-17280: Escherichia coli paused disome complex (open non-rotated PRE | closed non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.95 Å

EMDB-17281: Escherichia coli paused disome complex (open non-rotated PRE | rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.54 Å

EMDB-17282: Escherichia coli paused disome complex (open non-rotated PRE | POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.07 Å

EMDB-17283: Escherichia coli paused disome complex (closed non-rotated PRE | closed non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.95 Å

EMDB-17284: Escherichia coli paused disome complex (closed non-rotated PRE | rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.5 Å

EMDB-17285: Escherichia coli paused disome complex (closed non-rotated PRE | POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.5 Å

EMDB-17286: Escherichia coli paused disome complex (rotated-PRE-1 | closed non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 8.19 Å

EMDB-17288: Escherichia coli paused disome complex (rotated-PRE-1 | rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 8.62 Å

EMDB-17289: Cryo-EM reconstruction of the E. coli disome complex (rotated-PRE-1 | POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 8.9 Å

EMDB-17291: Escherichia coli paused disome complex (rotated-PRE-2 | closed non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.89 Å

EMDB-17431: Escherichia coli paused disome complex (rotated-PRE-2 | rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.58 Å

EMDB-17432: Escherichia coli paused disome complex (rotated-PRE-2 | POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.6 Å

EMDB-17433: Escherichia coli paused disome complex (POST | closed non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.5 Å

EMDB-17434: Escherichia coli paused disome complex (POST | rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.5 Å

EMDB-17441: Escherichia coli paused disome complex (POST | POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.5 Å

EMDB-17442: Escherichia coli paused disome complex (termination | closed non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.71 Å

EMDB-17443: Escherichia coli paused disome complex (termination | rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.03 Å

EMDB-17444: Escherichia coli paused disome complex (termination | POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.66 Å

EMDB-17631, PDB-8peg:
Escherichia coli paused disome complex (queueing 70S non-rotated closed PRE state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-17743, PDB-8pkl:
Escherichia coli paused disome complex (leading 70S non-rotated closed PRE state)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.09 Å

EMDB-18875, PDB-8r3v:
Escherichia coli paused disome complex (non-rotated disome interface)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.28 Å

EMDB-19054, PDB-8rcl:
Escherichia coli paused disome complex (Non-rotated disome interface class 1)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.49 Å

EMDB-19055, PDB-8rcm:
Escherichia coli paused disome complex (Non-rotated disome interface class 2)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.59 Å

EMDB-19058, PDB-8rcs:
Escherichia coli paused disome complex (Rotated disome interface class 1)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.46 Å

EMDB-19059, PDB-8rct:
Escherichia coli paused disome complex (Rotated disome interface class 2)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.32 Å

EMDB-19094: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of leading decoding 70S)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.61 Å

EMDB-19095: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of leading 70S partially accommodated A-tRNA)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.56 Å

EMDB-19096: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of leading 70S rotated PRE-1)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.45 Å

EMDB-19097: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of leading 70S rotated PRE-2)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.22 Å

EMDB-19098: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of leading 70S open non-rotated PRE)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.79 Å

EMDB-19099: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of leading 70S termination)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.82 Å

EMDB-19100: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of queueing 70S rotated PRE-2)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.21 Å

EMDB-19101: Escherichia coli paused trisome complex (non-rotated)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.6 Å

EMDB-19102: Escherichia coli paused trisome complex (rotated)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.8 Å

EMDB-19103: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of queueing 70S POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.21 Å

EMDB-19104: Escherichia coli paused disome complex (local refinement of leading 70S POST)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.21 Å

化合物

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-ATP:
ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP / ATP, エネルギー貯蔵分子*YM

ChemComp-PUT:
1,4-DIAMINOBUTANE / プトレシン

ChemComp-SPD:
SPERMIDINE / スペルミジン

ChemComp-ALA:
ALANINE / アラニン

ChemComp-HOH:
WATER

由来
  • escherichia coli (大腸菌)
キーワードRIBOSOME / translation / disome / collision / PURE system / polysome / tranlsation / elongation / pausing

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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