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タイトルMechanism of AAA+ ATPase-mediated RuvAB-Holliday junction branch migration.
ジャーナル・号・ページNature, Vol. 609, Issue 7927, Page 630-639, Year 2022
掲載日2022年8月24日
著者Jiri Wald / Dirk Fahrenkamp / Nikolaus Goessweiner-Mohr / Wolfgang Lugmayr / Luciano Ciccarelli / Oliver Vesper / Thomas C Marlovits /
PubMed 要旨The Holliday junction is a key intermediate formed during DNA recombination across all kingdoms of life. In bacteria, the Holliday junction is processed by two homo-hexameric AAA+ ATPase RuvB motors, ...The Holliday junction is a key intermediate formed during DNA recombination across all kingdoms of life. In bacteria, the Holliday junction is processed by two homo-hexameric AAA+ ATPase RuvB motors, which assemble together with the RuvA-Holliday junction complex to energize the strand-exchange reaction. Despite its importance for chromosome maintenance, the structure and mechanism by which this complex facilitates branch migration are unknown. Here, using time-resolved cryo-electron microscopy, we obtained structures of the ATP-hydrolysing RuvAB complex in seven distinct conformational states, captured during assembly and processing of a Holliday junction. Five structures together resolve the complete nucleotide cycle and reveal the spatiotemporal relationship between ATP hydrolysis, nucleotide exchange and context-specific conformational changes in RuvB. Coordinated motions in a converter formed by DNA-disengaged RuvB subunits stimulate hydrolysis and nucleotide exchange. Immobilization of the converter enables RuvB to convert the ATP-contained energy into a lever motion, which generates the pulling force driving the branch migration. We show that RuvB motors rotate together with the DNA substrate, which, together with a progressing nucleotide cycle, forms the mechanistic basis for DNA recombination by continuous branch migration. Together, our data decipher the molecular principles of homologous recombination by the RuvAB complex, elucidate discrete and sequential transition-state intermediates for chemo-mechanical coupling of hexameric AAA+ motors and provide a blueprint for the design of state-specific compounds targeting AAA+ motors.
リンクNature / PubMed:36002576 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.9 - 8.0 Å
構造データ

EMDB-13294, PDB-7pbl:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s1 [t2 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-13295, PDB-7pbm:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s2 [t2 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-13296, PDB-7pbn:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s3 [t2 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-13297, PDB-7pbo:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s4 [t2 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.9 Å

EMDB-13298, PDB-7pbp:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s5 [t2 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-13299, PDB-7pbq:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s0+A [t2 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.1 Å

EMDB-13300, PDB-7pbr:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s0-A [t2 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.0 Å

EMDB-13301, PDB-7pbs:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s0+A [t1 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-13302, PDB-7pbt:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvB AAA+ state s1 [t1 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-13303, PDB-7pbu:
RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvA-HJ core [t2 dataset]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-13304: RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvAB-HJ half [dataset t2]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.9 Å

EMDB-13305: RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - RuvAB-HJ pseudo half [dataset t2]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.4 Å

EMDB-15085: RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - composite map 1 and 2
手法: EM (単粒子) / 解像度: 8.0 Å

EMDB-15126: RuvAB branch migration motor complexed to the Holliday junction - full tripartite particle [dataset t2]
手法: EM (単粒子) / 解像度: 8.0 Å

化合物

ChemComp-AGS:
PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / ATP-γ-S / ATP-gamma-S, エネルギー貯蔵分子類似体*YM

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-ADP:
ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / ADP / ADP, エネルギー貯蔵分子*YM

由来
  • streptococcus thermophilus (ストレプトコッカス・サリバリウス 亜種 サーモフィラス)
  • salmonella typhimurium (サルモネラ菌)
  • synthetic construct (人工物)
キーワードHYDROLASE / DNA recombination / DNA repair / branch migration / Holliday junction / helicase

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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