+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-15780 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | 2C9, C5b9-CD59 structure | |||||||||
マップデータ | 3C9, C5b9-CD59 local res filtered map (full map) | |||||||||
試料 |
| |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of activation of membrane attack complex / cell killing / Terminal pathway of complement / 膜侵襲複合体 / complement binding / regulation of complement-dependent cytotoxicity / other organism cell membrane / regulation of complement activation / Activation of C3 and C5 / negative regulation of macrophage chemotaxis ...negative regulation of activation of membrane attack complex / cell killing / Terminal pathway of complement / 膜侵襲複合体 / complement binding / regulation of complement-dependent cytotoxicity / other organism cell membrane / regulation of complement activation / Activation of C3 and C5 / negative regulation of macrophage chemotaxis / Cargo concentration in the ER / complement activation, alternative pathway / 補体 / chemokine activity / COPII-mediated vesicle transport / retinol binding / endopeptidase inhibitor activity / tertiary granule membrane / positive regulation of vascular endothelial growth factor production / specific granule membrane / COPI-mediated anterograde transport / positive regulation of chemokine production / 小胞 / endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment membrane / Peptide ligand-binding receptors / complement activation, classical pathway / Regulation of Complement cascade / ER to Golgi transport vesicle membrane / protein homooligomerization / 走化性 / positive regulation of immune response / extracellular vesicle / 凝固・線溶系 / G alpha (i) signalling events / killing of cells of another organism / in utero embryonic development / vesicle / blood microparticle / cell surface receptor signaling pathway / 炎症 / 免疫応答 / G protein-coupled receptor signaling pathway / external side of plasma membrane / ゴルジ体 / signaling receptor binding / focal adhesion / 自然免疫系 / Neutrophil degranulation / protein-containing complex binding / endoplasmic reticulum membrane / 細胞膜 / extracellular space / extracellular exosome / extracellular region / 生体膜 / 細胞膜 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / human (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Couves EC / Gardner S / Bubeck D | |||||||||
資金援助 | European Union, 英国, 2件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Structural basis for membrane attack complex inhibition by CD59. 著者: Emma C Couves / Scott Gardner / Tomas B Voisin / Jasmine K Bickel / Phillip J Stansfeld / Edward W Tate / Doryen Bubeck / 要旨: CD59 is an abundant immuno-regulatory receptor that protects human cells from damage during complement activation. Here we show how the receptor binds complement proteins C8 and C9 at the membrane to ...CD59 is an abundant immuno-regulatory receptor that protects human cells from damage during complement activation. Here we show how the receptor binds complement proteins C8 and C9 at the membrane to prevent insertion and polymerization of membrane attack complex (MAC) pores. We present cryo-electron microscopy structures of two inhibited MAC precursors known as C5b8 and C5b9. We discover that in both complexes, CD59 binds the pore-forming β-hairpins of C8 to form an intermolecular β-sheet that prevents membrane perforation. While bound to C8, CD59 deflects the cascading C9 β-hairpins, rerouting their trajectory into the membrane. Preventing insertion of C9 restricts structural transitions of subsequent monomers and indirectly halts MAC polymerization. We combine our structural data with cellular assays and molecular dynamics simulations to explain how the membrane environment impacts the dual roles of CD59 in controlling pore formation of MAC, and as a target of bacterial virulence factors which hijack CD59 to lyse human cells. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_15780.map.gz | 332.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-15780-v30.xml emd-15780.xml | 27.9 KB 27.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_15780_fsc.xml | 19.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_15780.png | 54.2 KB | ||
その他 | emd_15780_half_map_1.map.gz emd_15780_half_map_2.map.gz | 482.9 MB 482.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15780 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15780 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8b0gMC 8b0fC 8b0hC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_15780.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 600.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | 3C9, C5b9-CD59 local res filtered map (full map) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.831 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-ハーフマップ: 3C9, C5b9-CD59 unfiltered half map (full map)
ファイル | emd_15780_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | 3C9, C5b9-CD59 unfiltered half map (full map) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: 3C9, C5b9-CD59 unfiltered half map (full map)
ファイル | emd_15780_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | 3C9, C5b9-CD59 unfiltered half map (full map) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : 2C9, CD59 inhibited MAC Complex
全体 | 名称: 2C9, CD59 inhibited MAC Complex |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: 2C9, CD59 inhibited MAC Complex
超分子 | 名称: 2C9, CD59 inhibited MAC Complex / タイプ: complex / ID: 1 / キメラ: Yes / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#7 詳細: Solved in a DOPC, MSP2N2 nanodisc with a myristolated cytotopic CD59. |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 細胞中の位置: Serum |
-分子 #1: Complement C5
分子 | 名称: Complement C5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: human (ヒト) |
分子量 | 理論値: 188.512094 KDa |
配列 | 文字列: MGLLGILCFL IFLGKTWGQE QTYVISAPKI FRVGASENIV IQVYGYTEAF DATISIKSYP DKKFSYSSGH VHLSSENKFQ NSAILTIQP KQLPGGQNPV SYVYLEVVSK HFSKSKRMPI TYDNGFLFIH TDKPVYTPDQ SVKVRVYSLN DDLKPAKRET V LTFIDPEG ...文字列: MGLLGILCFL IFLGKTWGQE QTYVISAPKI FRVGASENIV IQVYGYTEAF DATISIKSYP DKKFSYSSGH VHLSSENKFQ NSAILTIQP KQLPGGQNPV SYVYLEVVSK HFSKSKRMPI TYDNGFLFIH TDKPVYTPDQ SVKVRVYSLN DDLKPAKRET V LTFIDPEG SEVDMVEEID HIGIISFPDF KIPSNPRYGM WTIKAKYKED FSTTGTAYFE VKEYVLPHFS VSIEPEYNFI GY KNFKNFE ITIKARYFYN KVVTEADVYI TFGIREDLKD DQKEMMQTAM QNTMLINGIA QVTFDSETAV KELSYYSLED LNN KYLYIA VTVIESTGGF SEEAEIPGIK YVLSPYKLNL VATPLFLKPG IPYPIKVQVK DSLDQLVGGV PVTLNAQTID VNQE TSDLD PSKSVTRVDD GVASFVLNLP SGVTVLEFNV KTDAPDLPEE NQAREGYRAI AYSSLSQSYL YIDWTDNHKA LLVGE HLNI IVTPKSPYID KITHYNYLIL SKGKIIHFGT REKFSDASYQ SINIPVTQNM VPSSRLLVYY IVTGEQTAEL VSDSVW LNI EEKCGNQLQV HLSPDADAYS PGQTVSLNMA TGMDSWVALA AVDSAVYGVQ RGAKKPLERV FQFLEKSDLG CGAGGGL NN ANVFHLAGLT FLTNANADDS QENDEPCKEI LRPRRTLQKK IEEIAAKYKH SVVKKCCYDG ACVNNDETCE QRAARISL G PRCIKAFTEC CVVASQLRAN ISHKDMQLGR LHMKTLLPVS KPEIRSYFPE SWLWEVHLVP RRKQLQFALP DSLTTWEIQ GVGISNTGIC VADTVKAKVF KDVFLEMNIP YSVVRGEQIQ LKGTVYNYRT SGMQFCVKMS AVEGICTSES PVIDHQGTKS SKCVRQKVE GSSSHLVTFT VLPLEIGLHN INFSLETWFG KEILVKTLRV VPEGVKRESY SGVTLDPRGI YGTISRRKEF P YRIPLDLV PKTEIKRILS VKGLLVGEIL SAVLSQEGIN ILTHLPKGSA EAELMSVVPV FYVFHYLETG NHWNIFHSDP LI EKQKLKK KLKEGMLSIM SYRNADYSYS VWKGGSASTW LTAFALRVLG QVNKYVEQNQ NSICNSLLWL VENYQLDNGS FKE NSQYQP IKLQGTLPVE ARENSLYLTA FTVIGIRKAF DICPLVKIDT ALIKADNFLL ENTLPAQSTF TLAISAYALS LGDK THPQF RSIVSALKRE ALVKGNPPIY RFWKDNLQHK DSSVPNTGTA RMVETTAYAL LTSLNLKDIN YVNPVIKWLS EEQRY GGGF YSTQDTINAI EGLTEYSLLV KQLRLSMDID VSYKHKGALH NYKMTDKNFL GRPVEVLLND DLIVSTGFGS GLATVH VTT VVHKTSTSEE VCSFYLKIDT QDIEASHYRG YGNSDYKRIV ACASYKPSRE ESSSGSSHAV MDISLPTGIS ANEEDLK AL VEGVDQLFTD YQIKDGHVIL QLNSIPSSDF LCVRFRIFEL FEVGFLSPAT FTVYEYHRPD KQCTMFYSTS NIKIQKVC E GAACKCVEAD CGQMQEELDL TISAETRKQT ACKPEIAYAY KVSITSITVE NVFVKYKATL LDIYKTGEAV AEKDSEITF IKKVTCTNAE LVKGRQYLIM GKEALQIKYN FSFRYIYPLD SLTWIEYWPR DTTCSSCQAF LANLDEFAED IFLNGC |
-分子 #2: Complement component C7
分子 | 名称: Complement component C7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: human (ヒト) |
分子量 | 理論値: 93.625328 KDa |
配列 | 文字列: MKVISLFILV GFIGEFQSFS SASSPVNCQW DFYAPWSECN GCTKTQTRRR SVAVYGQYGG QPCVGNAFET QSCEPTRGCP TEEGCGERF RCFSGQCISK SLVCNGDSDC DEDSADEDRC EDSERRPSCD IDKPPPNIEL TGNGYNELTG QFRNRVINTK S FGGQCRKV ...文字列: MKVISLFILV GFIGEFQSFS SASSPVNCQW DFYAPWSECN GCTKTQTRRR SVAVYGQYGG QPCVGNAFET QSCEPTRGCP TEEGCGERF RCFSGQCISK SLVCNGDSDC DEDSADEDRC EDSERRPSCD IDKPPPNIEL TGNGYNELTG QFRNRVINTK S FGGQCRKV FSGDGKDFYR LSGNVLSYTF QVKINNDFNY EFYNSTWSYV KHTSTEHTSS SRKRSFFRSS SSSSRSYTSH TN EIHKGKS YQLLVVENTV EVAQFINNNP EFLQLAEPFW KELSHLPSLY DYSAYRRLID QYGTHYLQSG SLGGEYRVLF YVD SEKLKQ NDFNSVEEKK CKSSGWHFVV KFSSHGCKEL ENALKAASGT QNNVLRGEPF IRGGGAGFIS GLSYLELDNP AGNK RRYSA WAESVTNLPQ VIKQKLTPLY ELVKEVPCAS VKKLYLKWAL EEYLDEFDPC HCRPCQNGGL ATVEGTHCLC HCKPY TFGA ACEQGVLVGN QAGGVDGGWS CWSSWSPCVQ GKKTRSRECN NPPPSGGGRS CVGETTESTQ CEDEELEHLR LLEPHC FPL SLVPTEFCPS PPALKDGFVQ DEGTMFPVGK NVVYTCNEGY SLIGNPVARC GEDLRWLVGE MHCQKIACVL PVLMDGI QS HPQKPFYTVG EKVTVSCSGG MSLEGPSAFL CGSSLKWSPE MKNARCVQKE NPLTQAVPKC QRWEKLQNSR CVCKMPYE C GPSLDVCAQD ERSKRILPLT VCKMHVLHCQ GRNYTLTGRD SCTLPASAEK ACGACPLWGK CDAESSKCVC REASECEEE GFSICVEVNG KEQTMSECEA GALRCRGQSI SVTSIRPCAA ETQ |
-分子 #3: Complement component C8 beta chain
分子 | 名称: Complement component C8 beta chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: human (ヒト) |
分子量 | 理論値: 67.136891 KDa |
配列 | 文字列: MKNSRTWAWR APVELFLLCA ALGCLSLPGS RGERPHSFGS NAVNKSFAKS RQMRSVDVTL MPIDCELSSW SSWTTCDPCQ KKRYRYAYL LQPSQFHGEP CNFSDKEVED CVTNRPCRSQ VRCEGFVCAQ TGRCVNRRLL CNGDNDCGDQ SDEANCRRIY K KCQHEMDQ ...文字列: MKNSRTWAWR APVELFLLCA ALGCLSLPGS RGERPHSFGS NAVNKSFAKS RQMRSVDVTL MPIDCELSSW SSWTTCDPCQ KKRYRYAYL LQPSQFHGEP CNFSDKEVED CVTNRPCRSQ VRCEGFVCAQ TGRCVNRRLL CNGDNDCGDQ SDEANCRRIY K KCQHEMDQ YWGIGSLASG INLFTNSFEG PVLDHRYYAG GCSPHYILNT RFRKPYNVES YTPQTQGKYE FILKEYESYS DF ERNVTEK MASKSGFSFG FKIPGIFELG ISSQSDRGKH YIRRTKRFSH TKSVFLHARS DLEVAHYKLK PRSLMLHYEF LQR VKRLPL EYSYGEYRDL FRDFGTHYIT EAVLGGIYEY TLVMNKEAME RGDYTLNNVH ACAKNDFKIG GAIEEVYVSL GVSV GKCRG ILNEIKDRNK RDTMVEDLVV LVRGGASEHI TTLAYQELPT ADLMQEWGDA VQYNPAIIKV KVEPLYELVT ATDFA YSST VRQNMKQALE EFQKEVSSCH CAPCQGNGVP VLKGSRCDCI CPVGSQGLAC EVSYRKNTPI DGKWNCWSNW SSCSGR RKT RQRQCNNPPP QNGGSPCSGP ASETLDCS |
-分子 #4: Complement component C8 alpha chain
分子 | 名称: Complement component C8 alpha chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: human (ヒト) |
分子量 | 理論値: 65.239152 KDa |
配列 | 文字列: MFAVVFFILS LMTCQPGVTA QEKVNQRVRR AATPAAVTCQ LSNWSEWTDC FPCQDKKYRH RSLLQPNKFG GTICSGDIWD QASCSSSTT CVRQAQCGQD FQCKETGRCL KRHLVCNGDQ DCLDGSDEDD CEDVRAIDED CSQYEPIPGS QKAALGYNIL T QEDAQSVY ...文字列: MFAVVFFILS LMTCQPGVTA QEKVNQRVRR AATPAAVTCQ LSNWSEWTDC FPCQDKKYRH RSLLQPNKFG GTICSGDIWD QASCSSSTT CVRQAQCGQD FQCKETGRCL KRHLVCNGDQ DCLDGSDEDD CEDVRAIDED CSQYEPIPGS QKAALGYNIL T QEDAQSVY DASYYGGQCE TVYNGEWREL RYDSTCERLY YGDDEKYFRK PYNFLKYHFE ALADTGISSE FYDNANDLLS KV KKDKSDS FGVTIGIGPA GSPLLVGVGV SHSQDTSFLN ELNKYNEKKF IFTRIFTKVQ TAHFKMRKDD IMLDEGMLQS LME LPDQYN YGMYAKFIND YGTHYITSGS MGGIYEYILV IDKAKMESLG ITSRDITTCF GGSLGIQYED KINVGGGLSG DHCK KFGGG KTERARKAMA VEDIISRVRG GSSGWSGGLA QNRSTITYRS WGRSLKYNPV VIDFEMQPIH EVLRHTSLGP LEAKR QNLR RALDQYLMEF NACRCGPCFN NGVPILEGTS CRCQCRLGSL GAACEQTQTE GAKADGSWSC WSSWSVCRAG IQERRR ECD NPAPQNGGAS CPGRKVQTQA C |
-分子 #5: Complement component C8 gamma chain
分子 | 名称: Complement component C8 gamma chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: human (ヒト) |
分子量 | 理論値: 22.302424 KDa |
配列 | 文字列: MLPPGTATLL TLLLAAGSLG QKPQRPRRPA SPISTIQPKA NFDAQQFAGT WLLVAVGSAC RFLQEQGHRA EATTLHVAPQ GTAMAVSTF RKLDGICWQV RQLYGDTGVL GRFLLQARDA RGAVHVVVAE TDYQSFAVLY LERAGQLSVK LYARSLPVSD S VLSGFEQR ...文字列: MLPPGTATLL TLLLAAGSLG QKPQRPRRPA SPISTIQPKA NFDAQQFAGT WLLVAVGSAC RFLQEQGHRA EATTLHVAPQ GTAMAVSTF RKLDGICWQV RQLYGDTGVL GRFLLQARDA RGAVHVVVAE TDYQSFAVLY LERAGQLSVK LYARSLPVSD S VLSGFEQR VQEAHLTEDQ IFYFPKYGFC EAADQFHVLD EVRR |
-分子 #6: Complement component C9
分子 | 名称: Complement component C9 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: human (ヒト) |
分子量 | 理論値: 63.252301 KDa |
配列 | 文字列: MSACRSFAVA ICILEISILT AQYTTSYDPE LTESSGSASH IDCRMSPWSE WSQCDPCLRQ MFRSRSIEVF GQFNGKRCTD AVGDRRQCV PTEPCEDAED DCGNDFQCST GRCIKMRLRC NGDNDCGDFS DEDDCESEPR PPCRDRVVEE SELARTAGYG I NILGMDPL ...文字列: MSACRSFAVA ICILEISILT AQYTTSYDPE LTESSGSASH IDCRMSPWSE WSQCDPCLRQ MFRSRSIEVF GQFNGKRCTD AVGDRRQCV PTEPCEDAED DCGNDFQCST GRCIKMRLRC NGDNDCGDFS DEDDCESEPR PPCRDRVVEE SELARTAGYG I NILGMDPL STPFDNEFYN GLCNRDRDGN TLTYYRRPWN VASLIYETKG EKNFRTEHYE EQIEAFKSII QEKTSNFNAA IS LKFTPTE TNKAEQCCEE TASSISLHGK GSFRFSYSKN ETYQLFLSYS SKKEKMFLHV KGEIHLGRFV MRNRDVVLTT TFV DDIKAL PTTYEKGEYF AFLETYGTHY SSSGSLGGLY ELIYVLDKAS MKRKGVELKD IKRCLGYHLD VSLAFSEISV GAEF NKDDC VKRGEGRAVN ITSENLIDDV VSLIRGGTRK YAFELKEKLL RGTVIDVTDF VNWASSINDA PVLISQKLSP IYNLV PVKM KNAHLKKQNL ERAIEDYINE FSVRKCHTCQ NGGTVILMDG KCLCACPFKF EGIACEISKQ KISEGLPALE FPNEK |
-分子 #7: Complement component C6
分子 | 名称: Complement component C6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 7 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: human (ヒト) |
分子量 | 理論値: 104.91818 KDa |
配列 | 文字列: MARRSVLYFI LLNALINKGQ ACFCDHYAWT QWTSCSKTCN SGTQSRHRQI VVDKYYQENF CEQICSKQET RECNWQRCPI NCLLGDFGP WSDCDPCIEK QSKVRSVLRP SQFGGQPCTA PLVAFQPCIP SKLCKIEEAD CKNKFRCDSG RCIARKLECN G ENDCGDNS ...文字列: MARRSVLYFI LLNALINKGQ ACFCDHYAWT QWTSCSKTCN SGTQSRHRQI VVDKYYQENF CEQICSKQET RECNWQRCPI NCLLGDFGP WSDCDPCIEK QSKVRSVLRP SQFGGQPCTA PLVAFQPCIP SKLCKIEEAD CKNKFRCDSG RCIARKLECN G ENDCGDNS DERDCGRTKA VCTRKYNPIP SVQLMGNGFH FLAGEPRGEV LDNSFTGGIC KTVKSSRTSN PYRVPANLEN VG FEVQTAE DDLKTDFYKD LTSLGHNENQ QGSFSSQGGS SFSVPIFYSS KRSENINHNS AFKQAIQASH KKDSSFIRIH KVM KVLNFT TKAKDLHLSD VFLKALNHLP LEYNSALYSR IFDDFGTHYF TSGSLGGVYD LLYQFSSEEL KNSGLTEEEA KHCV RIETK KRVLFAKKTK VEHRCTTNKL SEKHEGSFIQ GAEKSISLIR GGRSEYGAAL AWEKGSSGLE EKTFSEWLES VKENP AVID FELAPIVDLV RNIPCAVTKR NNLRKALQEY AAKFDPCQCA PCPNNGRPTL SGTECLCVCQ SGTYGENCEK QSPDYK SNA VDGQWGCWSS WSTCDATYKR SRTRECNNPA PQRGGKRCEG EKRQEEDCTF SIMENNGQPC INDDEEMKEV DLPEIEA DS GCPQPVPPEN GFIRNEKQLY LVGEDVEISC LTGFETVGYQ YFRCLPDGTW RQGDVECQRT ECIKPVVQEV LTITPFQR L YRIGESIELT CPKGFVVAGP SRYTCQGNSW TPPISNSLTC EKDTLTKLKG HCQLGQKQSG SECICMSPEE DCSHHSEDL CVFDTDSNDY FTSPACKFLA EKCLNNQQLH FLHIGSCQDG RQLEWGLERT RLSSNSTKKE SCGYDTCYDW EKCSASTSKC VCLLPPQCF KGGNQLYCVK MGSSTSEKTL NICEVGTIRC ANRKMEILHP GKCLA |
-分子 #8: CD59 glycoprotein
分子 | 名称: CD59 glycoprotein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 8 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 9.101303 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌) |
配列 | 文字列: MLQCYNCPNP TADCKTAVNC SSDFDACLIT KAGLQVYNKC WKFEHCNFND VTTRLRENEL TYYCCKKDLC NFNEQLEN |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 構成要素:
詳細: 20 mM HEPES pH 7.4, 120 mM NaCl | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 296 K / 装置: FEI VITROBOT MARK II | |||||||||
詳細 | C5b, C6, C7, C8 and C9 purified components were sources from CompTech. Myrisolated CD59 was a gift from R. Smith. Individual components were reacted together empty DOPC nanodiscs then purified by sucrose gradient centrifugation. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 4.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 0.9 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 4 / 実像数: 52838 / 平均露光時間: 2.0 sec. / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 / 詳細: Collected over 4 separate data collections |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |