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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8fbi | ||||||
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タイトル | Improving the secretion of designed protein assemblies through negative design of cryptic transmembrane domains | ||||||
要素 | KWOCA_39 | ||||||
キーワード | DE NOVO PROTEIN (De novo) / designed protein (デザイン) / protein assemblies / negative design / cryptic transmembrane domains | ||||||
生物種 | synthetic construct (人工物) | ||||||
手法 | X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 3.61 Å | ||||||
データ登録者 | Wang, J.Y. / Khmelinskaia, A. / Bera, A.K. / King, N.P. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2023 タイトル: Improving the secretion of designed protein assemblies through negative design of cryptic transmembrane domains. 著者: Jing Yang John Wang / Alena Khmelinskaia / William Sheffler / Marcos C Miranda / Aleksandar Antanasijevic / Andrew J Borst / Susana V Torres / Chelsea Shu / Yang Hsia / Una Nattermann / ...著者: Jing Yang John Wang / Alena Khmelinskaia / William Sheffler / Marcos C Miranda / Aleksandar Antanasijevic / Andrew J Borst / Susana V Torres / Chelsea Shu / Yang Hsia / Una Nattermann / Daniel Ellis / Carl Walkey / Maggie Ahlrichs / Sidney Chan / Alex Kang / Hannah Nguyen / Claire Sydeman / Banumathi Sankaran / Mengyu Wu / Asim K Bera / Lauren Carter / Brooke Fiala / Michael Murphy / David Baker / Andrew B Ward / Neil P King / 要旨: Computationally designed protein nanoparticles have recently emerged as a promising platform for the development of new vaccines and biologics. For many applications, secretion of designed ...Computationally designed protein nanoparticles have recently emerged as a promising platform for the development of new vaccines and biologics. For many applications, secretion of designed nanoparticles from eukaryotic cells would be advantageous, but in practice, they often secrete poorly. Here we show that designed hydrophobic interfaces that drive nanoparticle assembly are often predicted to form cryptic transmembrane domains, suggesting that interaction with the membrane insertion machinery could limit efficient secretion. We develop a general computational protocol, the Degreaser, to design away cryptic transmembrane domains without sacrificing protein stability. The retroactive application of the Degreaser to previously designed nanoparticle components and nanoparticles considerably improves secretion, and modular integration of the Degreaser into design pipelines results in new nanoparticles that secrete as robustly as naturally occurring protein assemblies. Both the Degreaser protocol and the nanoparticles we describe may be broadly useful in biotechnological applications. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8fbi.cif.gz | 74.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8fbi.ent.gz | 47.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8fbi.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fb/8fbi ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/fb/8fbi | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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単位格子 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 33340.488 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1 |
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-試料調製
結晶 | マシュー密度: 2.78 Å3/Da / 溶媒含有率: 55.8 % |
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結晶化 | 温度: 293 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 5.6 詳細: 0.2 M ammonium acetate, 0.1 M Na3C6H5O7, pH 5.6, 30% v/v MPD |
-データ収集
回折 | 平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N |
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放射光源 | 由来: シンクロトロン / サイト: APS / ビームライン: 24-ID-C / 波長: 0.97918 Å |
検出器 | タイプ: DECTRIS EIGER2 X 16M / 検出器: PIXEL / 日付: 2021年6月11日 |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 波長: 0.97918 Å / 相対比: 1 |
反射 | 解像度: 3.61→58.51 Å / Num. obs: 4127 / % possible obs: 100 % / 冗長度: 4.5 % / Biso Wilson estimate: 185.19 Å2 / CC1/2: 0.978 / Rmerge(I) obs: 0.212 / Net I/σ(I): 4.2 |
反射 シェル | 解像度: 3.61→3.96 Å / 冗長度: 5.6 % / Rmerge(I) obs: 0.663 / Mean I/σ(I) obs: 1.8 / Num. unique obs: 983 / CC1/2: 0.665 / % possible all: 100 |
-解析
ソフトウェア |
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精密化 | 構造決定の手法: 分子置換 / 解像度: 3.61→58.51 Å / SU ML: 0.5199 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 1.24 / 位相誤差: 39.8896 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
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溶媒の処理 | 減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 183.89 Å2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 解像度: 3.61→58.51 Å
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拘束条件 |
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LS精密化 シェル |
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