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万見
- PDB-7u19: RFC:PCNA bound to nicked DNA -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7u19
タイトルRFC:PCNA bound to nicked DNA
要素
  • (Replication factor C subunit ...) x 5
  • DNAデオキシリボ核酸
  • Proliferating cell nuclear antigen増殖細胞核抗原
  • primer DNA
  • template DNA
キーワードREPLICATION (DNA複製) / sliding clamp (DNAクランプ) / DNA replication&repair / AAA+ / clamp loader / BRCT domain
機能・相同性
機能・相同性情報


DNA clamp unloading / Rad17 RFC-like complex / Elg1 RFC-like complex / Mismatch repair (MMR) directed by MSH2:MSH6 (MutSalpha) / DNA replication factor C complex / Ctf18 RFC-like complex / meiotic mismatch repair / DNA clamp loader activity / Processive synthesis on the lagging strand / Removal of the Flap Intermediate ...DNA clamp unloading / Rad17 RFC-like complex / Elg1 RFC-like complex / Mismatch repair (MMR) directed by MSH2:MSH6 (MutSalpha) / DNA replication factor C complex / Ctf18 RFC-like complex / meiotic mismatch repair / DNA clamp loader activity / Processive synthesis on the lagging strand / Removal of the Flap Intermediate / Polymerase switching / positive regulation of DNA metabolic process / SUMOylation of DNA replication proteins / maintenance of DNA trinucleotide repeats / PCNA complex / establishment of mitotic sister chromatid cohesion / DNA replication checkpoint signaling / Activation of ATR in response to replication stress / lagging strand elongation / postreplication repair / sister chromatid cohesion / silent mating-type cassette heterochromatin formation / mitotic sister chromatid cohesion / leading strand elongation / DNA polymerase processivity factor activity / error-free translesion synthesis / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / subtelomeric heterochromatin formation / DNAミスマッチ修復 / DNA修復 / positive regulation of DNA repair / DNA複製 / positive regulation of DNA replication / DNA damage checkpoint signaling / nucleotide-excision repair / DNA-templated DNA replication / mitotic cell cycle / chromosome, telomeric region / 細胞分裂 / DNA修復 / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / identical protein binding / 細胞核 / 細胞質基質
類似検索 - 分子機能
Replication factor C subunit 1 / DNA replication factor RFC1, C-terminal / Replication factor RFC1 C terminal domain / Replication factor C, C-terminal / Replication factor C C-terminal domain / : / DNA polymerase III, delta subunit / DNA polymerase III, clamp loader complex, gamma/delta/delta subunit, C-terminal / Proliferating cell nuclear antigen signature 2. / Proliferating cell nuclear antigen, PCNA, conserved site ...Replication factor C subunit 1 / DNA replication factor RFC1, C-terminal / Replication factor RFC1 C terminal domain / Replication factor C, C-terminal / Replication factor C C-terminal domain / : / DNA polymerase III, delta subunit / DNA polymerase III, clamp loader complex, gamma/delta/delta subunit, C-terminal / Proliferating cell nuclear antigen signature 2. / Proliferating cell nuclear antigen, PCNA, conserved site / Proliferating cell nuclear antigen signature 1. / Proliferating cell nuclear antigen, PCNA / Proliferating cell nuclear antigen, PCNA, N-terminal / Proliferating cell nuclear antigen, PCNA, C-terminal / Proliferating cell nuclear antigen, N-terminal domain / Proliferating cell nuclear antigen, C-terminal domain / : / BRCA1 C Terminus (BRCT) domain / breast cancer carboxy-terminal domain / BRCT domain profile. / BRCT domain / BRCT domain superfamily / ATPase family associated with various cellular activities (AAA) / ATPase, AAA-type, core / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / デオキシリボ核酸 / DNA (> 10) / 増殖細胞核抗原 / Replication factor C subunit 5 / Replication factor C subunit 3 / Replication factor C subunit 1 / Replication factor C subunit 4 / Replication factor C subunit 2
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
synthetic construct (人工物)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å
データ登録者Liu, X. / Gaubitz, C. / Pajak, J. / Kelch, B.A.
資金援助 米国, スイス, 3件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01-GM127776 米国
Swiss National Science Foundation168972 スイス
Swiss National Science Foundation177859 スイス
引用ジャーナル: Elife / 年: 2022
タイトル: A second DNA binding site on RFC facilitates clamp loading at gapped or nicked DNA.
著者: Xingchen Liu / Christl Gaubitz / Joshua Pajak / Brian A Kelch /
要旨: Clamp loaders place circular sliding clamp proteins onto DNA so that clamp-binding partner proteins can synthesize, scan, and repair the genome. DNA with nicks or small single-stranded gaps are ...Clamp loaders place circular sliding clamp proteins onto DNA so that clamp-binding partner proteins can synthesize, scan, and repair the genome. DNA with nicks or small single-stranded gaps are common clamp-loading targets in DNA repair, yet these substrates would be sterically blocked given the known mechanism for binding of primer-template DNA. Here, we report the discovery of a second DNA binding site in the yeast clamp loader replication factor C (RFC) that aids in binding to nicked or gapped DNA. This DNA binding site is on the external surface and is only accessible in the open conformation of RFC. Initial DNA binding at this site thus provides access to the primary DNA binding site in the central chamber. Furthermore, we identify that this site can partially unwind DNA to create an extended single-stranded gap for DNA binding in RFC's central chamber and subsequent ATPase activation. Finally, we show that deletion of the BRCT domain, a major component of the external DNA binding site, results in defective yeast growth in the presence of DNA damage where nicked or gapped DNA intermediates occur. We propose that RFC's external DNA binding site acts to enhance DNA binding and clamp loading, particularly at DNA architectures typically found in DNA repair.
履歴
登録2022年2月20日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02022年7月6日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年2月21日Group: Data collection / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Replication factor C subunit 1
B: Replication factor C subunit 4
C: Replication factor C subunit 3
D: Replication factor C subunit 2
E: Replication factor C subunit 5
F: Proliferating cell nuclear antigen
G: Proliferating cell nuclear antigen
H: Proliferating cell nuclear antigen
I: primer DNA
J: template DNA
K: DNA
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)361,03020
ポリマ－358,41211
非ポリマー2,6179
水0
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

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Replication factor C subunit ... , 5種, 5分子 ABCDE

#1: タンパク質 Replication factor C subunit 1 / / Replication factor C1 / Activator 1 95 kDa subunit / Cell division control protein 44


分子量: 95048.195 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RFC1, CDC44, YOR217W, YOR50-7 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P38630
#2: タンパク質 Replication factor C subunit 4 / / Replication factor C4 / Activator 1 37 kDa subunit


分子量: 36201.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RFC4, YOL094C, O0923 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P40339
#3: タンパク質 Replication factor C subunit 3 / / Replication factor C3 / Activator 1 40 kDa subunit


分子量: 38254.543 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RFC3, YNL290W, N0533 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P38629
#4: タンパク質 Replication factor C subunit 2 / / Replication factor C2 / Activator 1 41 kDa subunit


分子量: 39794.473 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RFC2, YJR068W, J1808 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P40348
#5: タンパク質 Replication factor C subunit 5 / / Replication factor C5 / Activator 1 40 kDa subunit


分子量: 39993.582 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: RFC5, YBR087W, YBR0810 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P38251

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タンパク質 , 1種, 3分子 FGH

#6: タンパク質 Proliferating cell nuclear antigen / 増殖細胞核抗原 / PCNA


分子量: 29525.713 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
遺伝子: POL30, YBR088C, YBR0811 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P15873

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DNA鎖 , 3種, 3分子 IJK

#7: DNA鎖 primer DNA


分子量: 6145.022 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物)
#8: DNA鎖 template DNA


分子量: 10400.687 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物)
#9: DNA鎖 DNA / デオキシリボ核酸


分子量: 3997.607 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物)

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非ポリマー , 3種, 9分子

#10: 化合物
ChemComp-AGS / PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER / ATP-GAMMA-S / ADENOSINE 5'-(3-THIOTRIPHOSPHATE) / ADENOSINE 5'-(GAMMA-THIOTRIPHOSPHATE) / ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE MONOTHIOPHOSPHATE / ATP-γ-S


分子量: 523.247 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H16N5O12P3S / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
コメント: ATP-gamma-S, エネルギー貯蔵分子類似体*YM
#11: 化合物
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#12: 化合物 ChemComp-ADP / ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / ADP / アデノシン二リン酸


分子量: 427.201 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H15N5O10P2 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION / コメント: ADP, エネルギー貯蔵分子*YM

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: RFC bound to PCNA and DNA with a nick / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#9 / 由来: MULTIPLE SOURCES
分子量値: 0.367 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: TFS KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス（公称値）: 2000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1000 nm / アライメント法: COMA FREE
撮影電子線照射量: 48.6664 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2SerialEM画像取得
4GctfCTF補正
7UCSF Chimeraモデルフィッティング
9RELION初期オイラー角割当
10RELION最終オイラー角割当
11RELION分類
12RELION3.1３次元再構成
19PHENIXphenix-1.20.1-4487モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 119631 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00323305
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.62631780
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d16.5353594
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0413697
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0053799

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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