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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7jk9 | ||||||||||||
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タイトル | Helical filaments of plant light-dependent protochlorophyllide oxidoreductase (LPOR) bound to NADPH, Pchlide, and membrane | ||||||||||||
要素 | Protochlorophyllide reductase B, chloroplastic | ||||||||||||
キーワード | PHOTOSYNTHESIS (光合成) / reductase (還元酵素) / light-activated / ligand-protein complex | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 プロトクロロフィリドレダクターゼ / protochlorophyllide reductase activity / chloroplast outer membrane / response to ethylene / chlorophyll biosynthetic process / chloroplast thylakoid / chloroplast envelope / chloroplast thylakoid membrane / 光合成 / 葉緑体 ...プロトクロロフィリドレダクターゼ / protochlorophyllide reductase activity / chloroplast outer membrane / response to ethylene / chlorophyll biosynthetic process / chloroplast thylakoid / chloroplast envelope / chloroplast thylakoid membrane / 光合成 / 葉緑体 / protein domain specific binding / mRNA binding / 細胞質基質 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Nguyen, H.C. / Gabruk, M. / Frost, A. | ||||||||||||
資金援助 | ポーランド, 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Plants / 年: 2021 タイトル: Photocatalytic LPOR forms helical lattices that shape membranes for chlorophyll synthesis. 著者: Henry C Nguyen / Arthur A Melo / Jerzy Kruk / Adam Frost / Michal Gabruk / 要旨: Chlorophyll biosynthesis, crucial to life on Earth, is tightly regulated because its precursors are phototoxic. In flowering plants, the enzyme light-dependent protochlorophyllide oxidoreductase ...Chlorophyll biosynthesis, crucial to life on Earth, is tightly regulated because its precursors are phototoxic. In flowering plants, the enzyme light-dependent protochlorophyllide oxidoreductase (LPOR) captures photons to catalyse the penultimate reaction: the reduction of a double bond within protochlorophyllide (Pchlide) to generate chlorophyllide (Chlide). In darkness, LPOR oligomerizes to facilitate photon energy transfer and catalysis. However, the complete three-dimensional structure of LPOR, the higher-order architecture of LPOR oligomers and the implications of these self-assembled states for catalysis, including how LPOR positions Pchlide and the co-factor NADPH, remain unknown. Here, we report the atomic structure of LPOR assemblies by electron cryo-microscopy. LPOR polymerizes with its substrates into helical filaments around constricted lipid bilayer tubes. Portions of LPOR and Pchlide insert into the outer membrane leaflet, targeting the product, Chlide, to the membrane for the final reaction site of chlorophyll biosynthesis. In addition to its crucial photocatalytic role, we show that in darkness LPOR filaments directly shape membranes into high-curvature tubules with the spectral properties of the prolamellar body, whose light-triggered disassembly provides lipids for thylakoid assembly. Moreover, our structure of the catalytic site challenges previously proposed reaction mechanisms. Together, our results reveal a new and unexpected synergy between photosynthetic membrane biogenesis and chlorophyll synthesis in plants, orchestrated by LPOR. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7jk9.cif.gz | 4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7jk9.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7jk9.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jk/7jk9 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jk/7jk9 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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対称性 | らせん対称: (回転対称性: 2 / Dyad axis: no / N subunits divisor: 1 / Num. of operations: 6 / Rise per n subunits: 43.1 Å / Rotation per n subunits: 50.34 °) |
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 43415.199 Da / 分子数: 40 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) 遺伝子: PORB, At4g27440, F27G19.40 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) 参照: UniProt: P21218, プロトクロロフィリドレダクターゼ #2: 化合物 | ChemComp-NDP / #3: 化合物 | ChemComp-PMR / #4: 化合物 | ChemComp-LMG / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: light-dependent protochlorophyllide oxidoreductase bound to NADPH, Pchlide, and lipid membrane タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Arabidopsis thaliana (シロイヌナズナ) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.1 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 298 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / C2レンズ絞り径: 70 µm |
撮影 | 電子線照射量: 73.5 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||
らせん対称 | 回転角度/サブユニット: 50.34 ° / 軸方向距離/サブユニット: 43.1 Å / らせん対称軸の対称性: C2 | ||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 294156 | ||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 17898 / 対称性のタイプ: HELICAL |