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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5zwn | ||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the yeast pre-B complex at an average resolution of 3.3 angstrom (Part II: U1 snRNP region) | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / spliceosme / assemply / pre-B complex / U1 snRNP | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 first spliceosomal transesterification activity / positive regulation of RNA binding / splicing factor binding / mRNA splice site recognition / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pICln-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex ...first spliceosomal transesterification activity / positive regulation of RNA binding / splicing factor binding / mRNA splice site recognition / U4/U6 snRNP / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pICln-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / commitment complex / U4 snRNP / U2 snRNP / poly(U) RNA binding / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / pre-mRNA 5'-splice site binding / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / mRNA 5'-splice site recognition / U5 snRNP / spliceosomal snRNP assembly / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / spliceosomal complex / mRNA splicing, via spliceosome / RNA helicase activity / ヘリカーゼ / mRNA binding / ATP hydrolysis activity / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Bai, R. / Wan, R. / Yan, C. / Lei, J. / Shi, Y. | ||||||||||||
資金援助 | 中国, 3件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2018 タイトル: Structures of the fully assembled spliceosome before activation. 著者: Rui Bai / Ruixue Wan / Chuangye Yan / Jianlin Lei / Yigong Shi / 要旨: The precatalytic spliceosome (B complex) is preceded by the pre-B complex. Here we report the cryo-electron microscopy structures of the pre-B and B complexes at average resolutions of 3.3 to 4.6 ...The precatalytic spliceosome (B complex) is preceded by the pre-B complex. Here we report the cryo-electron microscopy structures of the pre-B and B complexes at average resolutions of 3.3 to 4.6 and 3.9 angstroms, respectively. In the pre-B complex, the duplex between the 5' splice site (5'SS) and U1 small nuclear RNA (snRNA) is recognized by Yhc1, Luc7, and the Sm ring. In the B complex, U1 small nuclear ribonucleoprotein is dissociated, the 5'-exon-5'SS sequences are translocated near U6 snRNA, and three B-specific proteins may orient the precursor messenger RNA. In both complexes, U6 snRNA is anchored to loop I of U5 snRNA, and the duplex between the branch point sequence and U2 snRNA is recognized by the SF3b complex. Structural analysis reveals the mechanism of assembly and activation for the yeast spliceosome. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 5zwn.cif.gz | 908.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb5zwn.ent.gz | 684.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 5zwn.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zw/5zwn ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zw/5zwn | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 2種, 2分子 GP
#1: RNA鎖 | 分子量: 7130.372 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 182114.516 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) |
-U1 small nuclear ribonucleoprotein ... , 5種, 5分子 QRSTX
#3: タンパク質 | 分子量: 34506.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q00916 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 27106.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q05900 |
#5: タンパク質 | 分子量: 34438.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P32605 |
#6: タンパク質 | 分子量: 65222.020 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q03776 |
#17: タンパク質 | 分子量: 71383.453 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P53207 |
-タンパク質 , 6種, 6分子 UVWaYy
#7: タンパク質 | 分子量: 74834.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P39682 |
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#8: タンパク質 | 分子量: 57010.840 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q00539 |
#9: タンパク質 | 分子量: 56575.277 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q03782 |
#10: タンパク質 | 分子量: 22426.990 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P40018 |
#18: タンパク質 | 分子量: 30245.885 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q07508 |
#20: タンパク質 | 分子量: 66733.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P23394, ヘリカーゼ |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 6分子 bcdefg
#11: タンパク質 | 分子量: 16296.798 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q02260 |
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#12: タンパク質 | 分子量: 12876.066 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q06217 |
#13: タンパク質 | 分子量: 11240.139 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P43321 |
#14: タンパク質 | 分子量: 10385.098 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: Q12330 |
#15: タンパク質 | 分子量: 9669.945 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P54999 |
#16: タンパク質 | 分子量: 8490.809 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P40204 |
-タンパク質・ペプチド / 非ポリマー , 2種, 4分子 x
#19: タンパク質・ペプチド | 分子量: 3500.827 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) |
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#21: 化合物 |
-詳細
配列の詳細 | Regarding the U1 snRNP (chain x), due to the relative low resolution, authors can not confirm the ...Regarding the U1 snRNP (chain x), due to the relative low resolution, authors can not confirm the sequence and identity. |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: CELL / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Pre-B spliceosomal complex / タイプ: CELL / Entity ID: #1-#20 / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: REFMAC / バージョン: 5.8.0088 / 分類: 精密化 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 2 / カテゴリ: 3次元再構成 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: NONE | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 500657 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 3.4 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: 1 / 合計: 33541 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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