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万見
- PDB-5g4g: Structure of the ATPgS-bound VAT complex -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 5g4g
タイトルStructure of the ATPgS-bound VAT complex
要素VCP-LIKE ATPASE
キーワードHYDROLASE (加水分解酵素) / VAT / PROTEASOME (プロテアソーム) / PROTEIN DYNAMICS / UNFOLDASE / CONFORMATIONS
機能・相同性
機能・相同性情報


macromolecule metabolic process / primary metabolic process / : / response to stimulus / ATP hydrolysis activity / ATP binding
類似検索 - 分子機能
AAA ATPase, CDC48 family / Cell division protein 48 (CDC48), N-terminal domain / CDC48, N-terminal subdomain / Cell division protein 48 (CDC48) N-terminal domain / CDC48, domain 2 / Cell division protein 48 (CDC48), domain 2 / Cell division protein 48 (CDC48) domain 2 / CDC48 domain 2-like superfamily / Aspartate decarboxylase-like domain superfamily / AAA ATPase, AAA+ lid domain ...AAA ATPase, CDC48 family / Cell division protein 48 (CDC48), N-terminal domain / CDC48, N-terminal subdomain / Cell division protein 48 (CDC48) N-terminal domain / CDC48, domain 2 / Cell division protein 48 (CDC48), domain 2 / Cell division protein 48 (CDC48) domain 2 / CDC48 domain 2-like superfamily / Aspartate decarboxylase-like domain superfamily / AAA ATPase, AAA+ lid domain / AAA+ lid domain / ATPase, AAA-type, conserved site / AAA-protein family signature. / ATPase family associated with various cellular activities (AAA) / ATPase, AAA-type, core / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種THERMOPLASMA ACIDOPHILUM (好酸性)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.8 Å
データ登録者Huang, R. / Ripstein, Z.A. / Augustyniak, R. / Lazniewski, M. / Ginalski, K. / Kay, L.E. / Rubinstein, J.L.
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2016
タイトル: Unfolding the mechanism of the AAA+ unfoldase VAT by a combined cryo-EM, solution NMR study.
著者: Rui Huang / Zev A Ripstein / Rafal Augustyniak / Michal Lazniewski / Krzysztof Ginalski / Lewis E Kay / John L Rubinstein /
要旨: The AAA+ (ATPases associated with a variety of cellular activities) enzymes play critical roles in a variety of homeostatic processes in all kingdoms of life. Valosin-containing protein-like ATPase ...The AAA+ (ATPases associated with a variety of cellular activities) enzymes play critical roles in a variety of homeostatic processes in all kingdoms of life. Valosin-containing protein-like ATPase of Thermoplasma acidophilum (VAT), the archaeal homolog of the ubiquitous AAA+ protein Cdc48/p97, functions in concert with the 20S proteasome by unfolding substrates and passing them on for degradation. Here, we present electron cryomicroscopy (cryo-EM) maps showing that VAT undergoes large conformational rearrangements during its ATP hydrolysis cycle that differ dramatically from the conformational states observed for Cdc48/p97. We validate key features of the model with biochemical and solution methyl-transverse relaxation optimized spectroscopY (TROSY) NMR experiments and suggest a mechanism for coupling the energy of nucleotide hydrolysis to substrate unfolding. These findings illustrate the unique complementarity between cryo-EM and solution NMR for studies of molecular machines, showing that the structural properties of VAT, as well as the population distributions of conformers, are similar in the frozen specimens used for cryo-EM and in the solution phase where NMR spectra are recorded.
履歴
登録2016年5月12日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02016年7月27日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12016年8月3日Group: Database references
改定 1.22018年10月3日Group: Data collection / カテゴリ: em_software / Item: _em_software.image_processing_id / _em_software.name

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-3435
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: VCP-LIKE ATPASE
B: VCP-LIKE ATPASE
C: VCP-LIKE ATPASE
D: VCP-LIKE ATPASE
E: VCP-LIKE ATPASE
F: VCP-LIKE ATPASE


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)482,5536
ポリマ－482,5536
非ポリマー00
水0
1


  • 登録構造と同一
  • ソフトウェアが定義した集合体
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
手法PISA

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要素

#1: タンパク質
VCP-LIKE ATPASE


分子量: 80425.570 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) THERMOPLASMA ACIDOPHILUM (好酸性) / プラスミド: PPROEX / 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3) / 参照: UniProt: O05209

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: VAT (CDC48 HOMOLOGUE) / タイプ: COMPLEX
緩衝液名称: 50 MM HEPES, 100 MM NACL, 5MM ATPGS / pH: 7.5 / 詳細: 50 MM HEPES, 100 MM NACL, 5MM ATPGS
試料濃度: 7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持詳細: HOLEY CARBON
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE-PROPANE
詳細: VITRIFICATION 1 -- CRYOGEN- ETHANE-PROPANE MIXTURE, HUMIDITY- 100, INSTRUMENT- FEI VITROBOT MARK III, METHOD- BLOT FOR 4 SECONDS BEFORE PLUNGING,

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TECNAI F20 / 日付: 2015年5月1日
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率（公称値）: 25000 X / 倍率（補正後）: 34483 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 3500 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1800 nm / Cs: 2 mm
撮影電子線照射量: 32 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
画像スキャンデジタル画像の数: 514

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解析

EMソフトウェア名称: RELION / カテゴリ: ３次元再構成
CTF補正詳細: EACH MICROGRAPH
対称性点対称性: C6 (6回回転対称)
3次元再構成解像度: 7.8 Å / 粒子像の数: 16538 / ピクセルサイズ（公称値）: 1.45 Å / ピクセルサイズ（実測値）: 1.45 Å / 倍率補正: CRYSTAL LATTICE MEASURMENT
詳細: HOMOLOGY MODEL WAS FLEXIBLY FIT INTO DENSITY THEN STEREO- CHEMICALLY REFINED SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-3435. (DEPOSITION ID: 14516).
対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL
詳細: METHOD--MOLECULAR DYNAMICS FLEXIBLE FITTING REFINEMENT PROTOCOL--EM
精密化最高解像度: 7.8 Å
精密化ステップサイクル: LAST / 最高解像度: 7.8 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数33462 0 0 0 33462

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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