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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1907 | |||||||||
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タイトル | Electron cryo-microscopy and image reconstruction of adeno-associated virus type 2 empty capsids | |||||||||
マップデータ | AAV-2 empty capsids | |||||||||
試料 |
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キーワード | AAV2 (アデノ随伴ウイルス) / virus (ウイルス) / empty capsids | |||||||||
生物種 | Adeno-associated virus - 2 (アデノ随伴ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Kronenberg S / Kleinschmidt JA / Bottcher B | |||||||||
引用 | ジャーナル: EMBO Rep / 年: 2001 タイトル: Electron cryo-microscopy and image reconstruction of adeno-associated virus type 2 empty capsids. 著者: S Kronenberg / J A Kleinschmidt / B Böttcher / 要旨: Adeno-associated virus type 2 empty capsids are composed of three proteins, VP1, VP2 and VP3, which have relative molecular masses of 87, 72 and 62 kDa, respectively, and differ in their N-terminal ...Adeno-associated virus type 2 empty capsids are composed of three proteins, VP1, VP2 and VP3, which have relative molecular masses of 87, 72 and 62 kDa, respectively, and differ in their N-terminal amino acid sequences. They have a likely molar ratio of 1:1:8 and occupy symmetrical equivalent positions in an icosahedrally arranged protein shell. We have investigated empty capsids of adeno-associated virus type 2 by electron cryo-microscopy and icosahedral image reconstruction. The three-dimensional map at 1.05 nm resolution showed sets of three elongated spikes surrounding the three-fold symmetry axes and narrow empty channels at the five-fold axes. The inside of the capsid superimposed with the previously determined structure of the canine parvovirus (Q. Xie and M.S. Chapman, 1996, J. Mol. Biol., 264, 497-520), whereas the outer surface showed clear discrepancies. Globular structures at the inner surface of the capsid at the two-fold symmetry axes were identified as possible positions for the N-terminal extensions of VP1 and VP2. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1907.map.gz | 2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1907-v30.xml emd-1907.xml | 9.1 KB 9.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1907_aav2_1.jpg | 26.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1907 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1907 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1907.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 2.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | AAV-2 empty capsids | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.2 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Adeno-associated Virus Type 2
全体 | 名称: Adeno-associated Virus Type 2 |
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要素 |
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-超分子 #1000: Adeno-associated Virus Type 2
超分子 | 名称: Adeno-associated Virus Type 2 / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 1 |
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分子量 | 理論値: 3.9 MDa |
-超分子 #1: Adeno-associated virus - 2
超分子 | 名称: Adeno-associated virus - 2 / タイプ: virus / ID: 1 / Name.synonym: AAV2 / NCBI-ID: 10804 / 生物種: Adeno-associated virus - 2 / ウイルスタイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE / ウイルス・単離状態: SEROTYPE / ウイルス・エンベロープ: No / ウイルス・中空状態: Yes / Syn species name: AAV2 |
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宿主 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: VERTEBRATES |
分子量 | 理論値: 3.9 MDa |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: AAV2 / 直径: 260 Å / T番号(三角分割数): 1 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 0.1M NaCl, 1 mM MgCl2, 10 mM Tris-HCl pH 7.5 |
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グリッド | 詳細: 400 mesh copper grid, coated with holey carbon, covered with thin continuous carbon |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 77 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 詳細: Vitrification instrument: Controlled environment / 手法: blot for 15s before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM120T |
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電子線 | 加速電圧: 100 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 6.4 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.93 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.81 µm / 倍率(公称値): 52000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Side entry, liquid nitrogen cooled / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
温度 | 最低: 94 K / 平均: 94 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: At 200,000 magnification on carbon |
日付 | 2001年4月10日 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 21 µm / 実像数: 10 / ビット/ピクセル: 8 |
Tilt angle min | 0 |
Tilt angle max | 0 |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Combination of defocussed maps |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: MRC 詳細: Maps were calculated for each micrograph maps were ctf-corrected and averaged ctf-weighted data was corrected for envelope function due to spatial aberration 使用した粒子像数: 1800 |