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- EMDB-1232: Structure of the Sec13-31 COPII coat cage. -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-1232
タイトルStructure of the Sec13-31 COPII coat cage.
マップデータThis is a 30 angstrom resolution map of the self-assembing Sec13/31 cage.
試料
  • 試料: Oligomeric assembly of Sec13-31
  • タンパク質・ペプチド: Sec13
  • タンパク質・ペプチド: Sec31
機能・相同性COPII vesicle coat / intracellular protein transport / WD40リピート
機能・相同性情報
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 30.0 Å
データ登録者Stagg SM / Gurkan C / Fowler DM / LaPointe P / Foss TR / Potter CS / Carragher B / Balch WE
引用ジャーナル: Nature / 年: 2006
タイトル: Structure of the Sec13/31 COPII coat cage.
著者: Scott M Stagg / Cemal Gürkan / Douglas M Fowler / Paul LaPointe / Ted R Foss / Clinton S Potter / Bridget Carragher / William E Balch /
要旨: Endomembranes of eukaryotic cells are dynamic structures that are in continuous communication through the activity of specialized cellular machineries, such as the coat protein complex II (COPII), ...Endomembranes of eukaryotic cells are dynamic structures that are in continuous communication through the activity of specialized cellular machineries, such as the coat protein complex II (COPII), which mediates cargo export from the endoplasmic reticulum (ER). COPII consists of the Sar1 GTPase, Sec23 and Sec24 (Sec23/24), where Sec23 is a Sar1-specific GTPase-activating protein and Sec24 functions in cargo selection, and Sec13 and Sec31 (Sec13/31), which has a structural role. Whereas recent results have shown that Sec23/24 and Sec13/31 can self-assemble to form COPII cage-like particles, we now show that Sec13/31 can self-assemble to form minimal cages in the absence of Sec23/24. We present a three-dimensional reconstruction of these Sec13/31 cages at 30 A resolution using cryo-electron microscopy and single particle analysis. These results reveal a novel cuboctahedron geometry with the potential to form a flexible lattice and to generate a diverse range of containers. Our data are consistent with a model for COPII coat complex assembly in which Sec23/24 has a non-structural role as a multivalent ligand localizing the self-assembly of Sec13/31 to form a cage lattice driving ER cargo export.
履歴
登録2006年5月26日-
ヘッダ(付随情報) 公開2006年6月5日-
マップ公開2006年6月5日-
更新2011年7月22日-
現状2011年7月22日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 3.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 3.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

1232.gif

EMD-1232.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_1232.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 26.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈This is a 30 angstrom resolution map of the self-assembing Sec13/31 cage.
ボクセルのサイズX=Y=Z: 4.526 Å
密度
表面レベルBy EMDB: 5.0 / ムービー #1: 3.3
最小 - 最大-6.01866 - 12.2407
平均 (標準偏差)0.00000000139742 (±0.928711)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-96-96-96
サイズ192192192
Spacing192192192
セルA=B=C: 868.992 Å
α=β=γ: 90 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z4.5264.5264.526
M x/y/z192192192
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z868.992868.992868.992
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-64-64-64
NX/NY/NZ128128128
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS-96-96-96
NC/NR/NS192192192
D min/max/mean-6.01912.2410.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Oligomeric assembly of Sec13-31

全体名称: Oligomeric assembly of Sec13-31
要素
  • 試料: Oligomeric assembly of Sec13-31
  • タンパク質・ペプチド: Sec13
  • タンパク質・ペプチド: Sec31

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超分子 #1000: Oligomeric assembly of Sec13-31

超分子名称: Oligomeric assembly of Sec13-31 / タイプ: sample / ID: 1000
集合状態: 24-mer of Sec13-31 heterotetramers forming a cuboctahedron
Number unique components: 2
分子量理論値: 8.14 MDa

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分子 #1: Sec13

分子名称: Sec13 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Sec13 / 詳細: SEC13R / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human
分子量実験値: 33 MDa / 理論値: 33 MDa
組換発現生物種: Baculovirus infected Tn5 insect cells (バキュロウイルス科)
組換プラスミド: pFastBac
配列GO: intracellular protein transport / InterPro: WD40リピート

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分子 #2: Sec31

分子名称: Sec31 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: Sec31 / 詳細: SEC31L1 / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human
分子量実験値: 139 MDa / 理論値: 139 MDa
組換発現生物種: Baculovirus infected Tn5 insect cells (バキュロウイルス科)
組換プラスミド: pFastBac
配列GO: COPII vesicle coat / InterPro: WD40リピート

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.9 mg/mL
緩衝液pH: 6.5 / 詳細: 50mM MES pH 6.5, 225mM KOAc, 1mM MgCl2
グリッド詳細: Quantifoil 2/2, 400 mesh copper grid
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 93 K / 装置: OTHER
詳細: Vitrification instrument: FEI Vitrobot. Grid plasma cleaned for 30s with Fischione 1020 plasma cleaner using 75-25 Argon-Oxygen mix.
手法: Temperature of chamber was 4 degrees C. 0 seconds drain time. Single blot. 0 mm offset. 4 ul sample applied to grid. Blot for 3.0 seconds before plunging.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TECNAI 20
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.8 µm / 倍率（公称値）: 50000
試料ステージ試料ホルダー: Side entry liquid nitrogen-cooled cryo specimen holder.
試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN
温度平均: 94 K
アライメント法Legacy - 非点収差: objective lens astigmatism was corrected at 50,000X magnification
日付2005年2月2日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k)
平均電子線量: 20 e/Å2 / ビット/ピクセル: 16

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画像解析

CTF補正詳細: Phase correction for each particle.
最終 2次元分類クラス数: 92
最終 再構成想定した対称性 - 点群: O (正8面体型対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 30.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN / 使用した粒子像数: 9777
詳細The images were acquired using the Leginon automated data aquisition system. The particles were automatically selected using the Selexon package. The CTF was automatically estimated using the ACE package

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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