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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-0545
タイトルHelicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2c (OA-2c)
マップデータHelicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2c (OA-2c)
試料
  • 複合体: Helicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2c (OA-2c)
    • タンパク質・ペプチド: Vacuolating cytotoxin autotransporter
機能・相同性
機能・相同性情報


cell outer membrane / toxin activity / ペリプラズム / 細胞膜 / extracellular region
類似検索 - 分子機能
Vacuolating cytotoxin / Vacuolating cyotoxin / Outer membrane autotransporter barrel / Autotransporter beta-domain / Autotransporter beta-domain profile. / Autotransporter beta-domain / Autotransporter beta-domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Vacuolating cytotoxin autotransporter
類似検索 - 構成要素
生物種Helicobacter pylori (ピロリ菌) / Campylobacter pylori (ピロリ菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å
データ登録者Zhang K / Zhang H / Li S / Au S / Chiu W
資金援助 米国, 3件
OrganizationGrant number
National Institutes of Health/National Human Genome Research Institute (NIH/NHGRI)P41GM103832 米国
National Institutes of Health/National Human Genome Research Institute (NIH/NHGRI)S10OD021600 米国
National Institutes of Health/National Human Genome Research Institute (NIH/NHGRI)R01GM079429 米国
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / : 2019
タイトル: Cryo-EM structures of vacuolating cytotoxin A oligomeric assemblies at near-atomic resolution.
著者: Kaiming Zhang / Huawei Zhang / Shanshan Li / Grigore D Pintilie / Tung-Chung Mou / Yuanzhu Gao / Qinfen Zhang / Henry van den Bedem / Michael F Schmid / Shannon Wing Ngor Au / Wah Chiu /
要旨: Human gastric pathogen () is the primary risk factor for gastric cancer and is one of the most prevalent carcinogenic infectious agents. Vacuolating cytotoxin A (VacA) is a key virulence factor ...Human gastric pathogen () is the primary risk factor for gastric cancer and is one of the most prevalent carcinogenic infectious agents. Vacuolating cytotoxin A (VacA) is a key virulence factor secreted by and induces multiple cellular responses. Although structural and functional studies of VacA have been extensively performed, the high-resolution structure of a full-length VacA protomer and the molecular basis of its oligomerization are still unknown. Here, we use cryoelectron microscopy to resolve 10 structures of VacA assemblies, including monolayer (hexamer and heptamer) and bilayer (dodecamer, tridecamer, and tetradecamer) oligomers. The models of the 88-kDa full-length VacA protomer derived from the near-atomic resolution maps are highly conserved among different oligomers and show a continuous right-handed β-helix made up of two domains with extensive domain-domain interactions. The specific interactions between adjacent protomers in the same layer stabilizing the oligomers are well resolved. For double-layer oligomers, we found short- and/or long-range hydrophobic interactions between protomers across the two layers. Our structures and other previous observations lead to a mechanistic model wherein VacA hexamer would correspond to the prepore-forming state, and the N-terminal region of VacA responsible for the membrane insertion would undergo a large conformational change to bring the hydrophobic transmembrane region to the center of the oligomer for the membrane channel formation.
履歴
登録2019年2月11日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年3月6日-
マップ公開2019年3月27日-
更新2019年12月18日-
現状2019年12月18日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 0.31
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図(円筒半径に従い着色)
  • 表面レベル: 0.31
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6nyl
  • 表面レベル: 0.31
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_0545.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Helicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2c (OA-2c)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.06 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.31 / ムービー #1: 0.31
最小 - 最大-0.66370845 - 1.956988
平均 (標準偏差)0.008675265 (±0.06719588)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ384384384
Spacing384384384
セルA=B=C: 407.03998 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.061.061.06
M x/y/z384384384
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z407.040407.040407.040
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-383-383-383
NX/NY/NZ768768768
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS384384384
D min/max/mean-0.6641.9570.009

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Helicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2...

全体名称: Helicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2c (OA-2c)
要素
  • 複合体: Helicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2c (OA-2c)
    • タンパク質・ペプチド: Vacuolating cytotoxin autotransporter

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超分子 #1: Helicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2...

超分子名称: Helicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2c (OA-2c)
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Helicobacter pylori (ピロリ菌) / : 60190
分子量実験値: 88 KDa

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分子 #1: Vacuolating cytotoxin autotransporter

分子名称: Vacuolating cytotoxin autotransporter / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 12 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Campylobacter pylori (ピロリ菌)
分子量理論値: 88.463211 KDa
配列文字列: AFFTTVIIPA IVGGIATGTA VGTVSGLLGW GLKQAEEANK TPDKPDKVWR IQAGKGFNEF PNKEYDLYKS LLSSKIDGGW DWGNAATHY WIKGGQWNKL EVDMKDAVGT YKLSGLRNFT GGDLDVNMQK ATLRLGQFNG NSFTSYKDSA DRTTRVDFNA K NILIDNFL ...文字列:
AFFTTVIIPA IVGGIATGTA VGTVSGLLGW GLKQAEEANK TPDKPDKVWR IQAGKGFNEF PNKEYDLYKS LLSSKIDGGW DWGNAATHY WIKGGQWNKL EVDMKDAVGT YKLSGLRNFT GGDLDVNMQK ATLRLGQFNG NSFTSYKDSA DRTTRVDFNA K NILIDNFL EINNRVGSGA GRKASSTVLT LQASEGITSS KNAEISLYDG ATLNLASNSV KLNGNVWMGR LQYVGAYLAP SY STINTSK VTGEVNFNHL TVGDHNAAQA GIIASNKTHI GTLDLWQSAG LNIIAPPEGG YKDKPNNTPS QSGAKNDKQE SSQ NNSNTQ VINPPNSTQK TEVQPTQVID GPFAGGKDTV VNIDRINTKA DGTIKVGGFK ASLTTNAAHL NIGKGGVNLS NQAS GRTLL VENLTGNITV DGPLRVNNQV GGYALAGSSA NFEFKAGVDT KNGTATFNND ISLGRFVNLK VDAHTANFKG IDTGN GGFN TLDFSGVTNK VNINKLITAS TNVAVKNFNI NELIVKTNGV SVGEYTHFSE DIGSQSRINT VRLETGTRSI FSGGVK FKS GEKLVIDEFY YSPWNYFDAR NIKNVEITRK FASSTPENPW GTSKLMFNNL TLGQNAVMDY SQFSNLTIQG DFINNQG TI NYLVRGGKVA TLNVGNAAAM MFNNDIDSAT GFYKPLIKIN SAQDLIKNTE HVLLKAKIIG YGNVSTGTNG ISNVNLEE Q FKERLALYNN NNRMDTCVVR NTDDIKACGM AIGNQSMVNN PDNYKYLIGK AWKNIGISKT ANGSKISVYY LGNSTPTEN GGNTTNLPTN TTNNARFASY A

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.2 mg/mL
緩衝液pH: 7.4
グリッド支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 詳細: unspecified
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細VacA OA-2c

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.3 µm / 倍率(公称値): 130000
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-30 / 撮影したグリッド数: 3 / 実像数: 13708 / 平均露光時間: 6.0 sec. / 平均電子線量: 7.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 540214
CTF補正ソフトウェア - 名称: CTFFIND (ver. 4)
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2.1)
最終 3次元分類クラス数: 10 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 2)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2)
最終 再構成想定した対称性 - 点群: D6 (2回x6回 2面回転対称)
解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2) / 使用した粒子像数: 31700

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原子モデル構築 1

精密化プロトコル: BACKBONE TRACE
得られたモデル

PDB-6nyl:
Helicobacter pylori Vacuolating Cytotoxin A Oligomeric Assembly 2c (OA-2c)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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