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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-24290 | ||||||||||||
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タイトル | State E1 nucleolar 60S ribosome biogenesis intermediate - Spb4 locally refined map | ||||||||||||
マップデータ | State E1 Spb4 locally refined map | ||||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 Noc1p-Noc2p complex / 27S pre-rRNA (guanosine2922-2'-O)-methyltransferase / Noc2p-Noc3p complex / rRNA (guanosine-2'-O-)-methyltransferase activity / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA (uridine-2'-O-)-methyltransferase activity / rRNA (guanine) methyltransferase activity / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / nuclear pre-replicative complex / rRNA primary transcript binding ...Noc1p-Noc2p complex / 27S pre-rRNA (guanosine2922-2'-O)-methyltransferase / Noc2p-Noc3p complex / rRNA (guanosine-2'-O-)-methyltransferase activity / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA (uridine-2'-O-)-methyltransferase activity / rRNA (guanine) methyltransferase activity / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / nuclear pre-replicative complex / rRNA primary transcript binding / positive regulation of ATP-dependent activity / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rRNA methylation / pre-mRNA 5'-splice site binding / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal subunit export from nucleus / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / Formation of a pool of free 40S subunits / ATPase activator activity / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / protein-RNA complex assembly / negative regulation of mRNA splicing, via spliceosome / preribosome, large subunit precursor / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / DNA replication initiation / regulation of translational fidelity / ribonucleoprotein complex binding / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / ribosomal large subunit biogenesis / maturation of LSU-rRNA / assembly of large subunit precursor of preribosome / maintenance of translational fidelity / ribosomal large subunit assembly / rRNA processing / リボソーム生合成 / ATPase binding / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / RNA helicase activity / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ヘリカーゼ / 翻訳 (生物学) / 細胞分裂 / mRNA binding / GTPase activity / chromatin binding / 核小体 / GTP binding / ATP hydrolysis activity / ミトコンドリア / RNA binding / 核質 / ATP binding / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae BY4741 (パン酵母) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.07 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Cruz VE / Sekulski K / Peddada N / Erzberger JP | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2022 タイトル: Sequence-specific remodeling of a topologically complex RNP substrate by Spb4. 著者: Victor Emmanuel Cruz / Kamil Sekulski / Nagesh Peddada / Carolin Sailer / Sahana Balasubramanian / Christine S Weirich / Florian Stengel / Jan P Erzberger / 要旨: DEAD-box ATPases are ubiquitous enzymes essential in all aspects of RNA biology. However, the limited in vitro catalytic activities described for these enzymes are at odds with their complex cellular ...DEAD-box ATPases are ubiquitous enzymes essential in all aspects of RNA biology. However, the limited in vitro catalytic activities described for these enzymes are at odds with their complex cellular roles, most notably in driving large-scale RNA remodeling steps during the assembly of ribonucleoproteins (RNPs). We describe cryo-EM structures of 60S ribosomal biogenesis intermediates that reveal how context-specific RNA unwinding by the DEAD-box ATPase Spb4 results in extensive, sequence-specific remodeling of rRNA secondary structure. Multiple cis and trans interactions stabilize Spb4 in a post-catalytic, high-energy intermediate that drives the organization of the three-way junction at the base of rRNA domain IV. This mechanism explains how limited strand separation by DEAD-box ATPases is leveraged to provide non-equilibrium directionality and ensure efficient and accurate RNP assembly. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_24290.map.gz | 254.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-24290-v30.xml emd-24290.xml | 46 KB 46 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_24290_fsc.xml | 14.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_24290.png | 132 KB | ||
その他 | emd_24290_half_map_1.map.gz emd_24290_half_map_2.map.gz | 251.2 MB 246.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24290 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24290 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7r72MC 7nacC 7nadC 7nafC 7r6kC 7r6qC 7r7aC 7r7cC 7u0hC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_24290.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 282.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||
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注釈 | State E1 Spb4 locally refined map | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.08 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: State E1 Spb4 locally refined half map 2
ファイル | emd_24290_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | State E1 Spb4 locally refined half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: State E1 Spb4 locally refined half map 1
ファイル | emd_24290_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | State E1 Spb4 locally refined half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Nucleolar 60S intermediate purified with tags on Ytm1 and Spb4.
+超分子 #1: Nucleolar 60S intermediate purified with tags on Ytm1 and Spb4.
+分子 #1: 25S rRNA
+分子 #2: 5.8S rRNA
+分子 #3: Nucleolar complex protein 2
+分子 #4: 60S ribosomal protein L3
+分子 #5: 60S ribosomal protein L8-A
+分子 #6: Nucleolar complex-associated protein 3
+分子 #7: 60S ribosomal protein L17-A
+分子 #8: 60S ribosomal protein L19-A
+分子 #9: 60S ribosomal protein L22-A
+分子 #10: 60S ribosomal protein L25
+分子 #11: 60S ribosomal protein L27-A
+分子 #12: Nucleolar GTP-binding protein 1
+分子 #13: 60S ribosomal protein L30
+分子 #14: 60S ribosomal protein L31-A
+分子 #15: 60S ribosomal protein L34-A
+分子 #16: 60S ribosomal protein L37-A
+分子 #17: 60S ribosomal protein L38
+分子 #18: Ribosome biogenesis protein ERB1
+分子 #19: Pescadillo homolog
+分子 #20: Ribosome biogenesis protein YTM1
+分子 #21: Ribosome biogenesis protein RLP7
+分子 #22: Ribosome biogenesis protein RLP24
+分子 #23: 27S pre-rRNA (guanosine(2922)-2'-O)-methyltransferase
+分子 #24: ATP-dependent rRNA helicase SPB4
+分子 #25: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.45 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 0.30000000000000004 nm | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.9 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4523 / 平均露光時間: 0.05 sec. / 平均電子線量: 1.2 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: RIGID BODY FIT |
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得られたモデル | PDB-7r72: |