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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 9pzg | ||||||||||||
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| タイトル | Bacterial ribosomal 2'-O-methyltransferase RsmI in complex with the small ribosomal subunit | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / methylation / 30S subunit / helix 44 / methyltransferase | ||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報16S rRNA (cytidine1402-2'-O)-methyltransferase / rRNA (cytosine-2'-O-)-methyltransferase activity / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / four-way junction DNA binding / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability ...16S rRNA (cytidine1402-2'-O)-methyltransferase / rRNA (cytosine-2'-O-)-methyltransferase activity / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / four-way junction DNA binding / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / positive regulation of RNA splicing / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription elongation factor complex / DNA endonuclease activity / transcription antitermination / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / mRNA 5'-UTR binding / regulation of translation / ribosome biogenesis / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / small ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / response to antibiotic / mRNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
| 生物種 | ![]() ![]() | ||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.42 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Barmada, M.I. / Conn, G.L. | ||||||||||||
| 資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: bioRxiv / 年: 2025タイトル: Mechanism of 30S subunit recognition and modification by the conserved bacterial ribosomal RNA methyltransferase RsmI. 著者: Mohamed I Barmada / Erin N McGinity / Suparno Nandi / Debayan Dey / Natalia Zelinskaya / George M Harris / Lindsay R Comstock / Christine M Dunham / Graeme L Conn / ![]() 要旨: Ribosomal RNA (rRNA) modifications are important for ribosome function and can influence bacterial susceptibility to ribosome-targeting antibiotics. The universally conserved 16S rRNA nucleotide ...Ribosomal RNA (rRNA) modifications are important for ribosome function and can influence bacterial susceptibility to ribosome-targeting antibiotics. The universally conserved 16S rRNA nucleotide C1402, for example, is the only 2'--methylated nucleotide in the bacterial small (30S) ribosomal subunit and this modification fine tunes the shape and structure of the peptidyl tRNA binding site. The Cm1402 modification is incorporated by the conserved bacterial 16S rRNA methyltransferase RsmI, but it is unclear how RsmI is able to recognize its 30S substrate and specifically modify its buried target nucleotide. We determined a 2.42 Å resolution cryo-EM structure of the RsmI-30S complex and, with accompanying functional analyses, show that RsmI anchors itself to the 30S subunit through multiple contacts with a conserved 16S rRNA tertiary surface present only in the assembled subunit. This positions RsmI to induce an extensive h44 distortion to access C1402 that is unprecedented among 16S rRNA methyltransferases characterized to date. These analyses also reveal an essential contribution to 30S subunit interaction made by the previously structurally uncharacterized RsmI C-terminal domain, RsmI-induced RNA-RNA interactions with C1402, and an unappreciated dependence on a divalent metal ion for catalysis, marking RsmI as the first of a distinct class of metal- and SAM-dependent RNA -methyltransferases. This study significantly expands our mechanistic understanding of how intrinsic bacterial methyltransferases like RsmI modify their rRNA targets. Further, recognition of distant ribosome features and extensive unfolding of a critical rRNA functional center point to a potential role in accurate 30S subunit biogenesis. | ||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 9pzg.cif.gz | 1.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb9pzg.ent.gz | 1.1 MB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 9pzg.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/pz/9pzg ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/pz/9pzg | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 72071MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-Small ribosomal subunit protein ... , 20種, 20分子 BCDEFGHIJKLMNOPQRSTU
| #2: タンパク質 | 分子量: 26781.670 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #3: タンパク質 | 分子量: 26031.316 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #4: タンパク質 | 分子量: 23514.199 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #5: タンパク質 | 分子量: 17629.398 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #6: タンパク質 | 分子量: 15727.512 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #7: タンパク質 | 分子量: 20055.156 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #8: タンパク質 | 分子量: 14146.557 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #9: タンパク質 | 分子量: 14886.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #10: タンパク質 | 分子量: 11755.597 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #11: タンパク質 | 分子量: 13870.975 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #12: タンパク質 | 分子量: 13768.157 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #13: タンパク質 | 分子量: 13128.467 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #14: タンパク質 | 分子量: 11606.560 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #15: タンパク質 | 分子量: 10290.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #16: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #17: タンパク質 | 分子量: 9724.491 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #18: タンパク質 | 分子量: 9005.472 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #19: タンパク質 | 分子量: 10455.355 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #20: タンパク質 | 分子量: 9708.464 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #21: タンパク質 | 分子量: 8524.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-RNA鎖 / タンパク質 , 2種, 3分子 AVW
| #1: RNA鎖 | 分子量: 499760.156 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 詳細: 16S rRNA with residue m4C1402 covalently linked to the S'-adenosyl-methionine analogue NM6. 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #22: タンパク質 | 分子量: 33313.023 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: his-tagged construct with a TEV protease cleavage site preceding the start of the open reading frame with the S'-adenosyl-methionine (SAM) analogue NM6 (PDB code AN6) present in the SAM binding site. 由来: (組換発現) ![]() ![]() 参照: UniProt: P67088, 16S rRNA (cytidine1402-2'-O)-methyltransferase |
-非ポリマー , 3種, 251分子 




| #23: 化合物 | | #24: 化合物 | ChemComp-MG / #25: 水 | ChemComp-HOH / | |
|---|
-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
|---|---|
| Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 |
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| 分子量 |
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| 由来(天然) |
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| 由来(組換発現) |
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| 緩衝液 | pH: 7.6 詳細: 10 mM HEPES, 10 mM MgCl2, 100 mM NH4Cl, 6 mM Beta-mercaptoethanol | ||||||||||||||||||||||||||||
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: Recombinant RsmI (1.2 uM), delta-rsmI 30S (0.4 uM), and the SAM analog NM6 (24 uM) were incubated for 30 minutes at 37C to prepare the complex. | ||||||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2900 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 400 nm / Cs: 2.7 mm |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN |
| 撮影 | 平均露光時間: 1.8 sec. / 電子線照射量: 49.27 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 8164 |
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解析
| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 3781314 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.42 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 74553 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 |
|
ムービー
コントローラー
万見について






米国, 3件
引用
PDBj































FIELD EMISSION GUN

