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万見
- PDB-9m7v: Cryo-EM structure of enterovirus A71 mature virion in complex wit... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9m7v
タイトルCryo-EM structure of enterovirus A71 mature virion in complex with Fab CT11F9
要素
  • (Capsid protein ...) x 4
  • The heavy chain of Fab CT11F9
  • The light chain of Fab CT11F9
キーワードVIRUS / ENTEROVIRUS A71
機能・相同性
機能・相同性情報


symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of RIG-I activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MAVS activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / nucleoside-triphosphate phosphatase ...symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of RIG-I activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MAVS activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / nucleoside-triphosphate phosphatase / channel activity / monoatomic ion transmembrane transport / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / DNA replication / RNA helicase activity / symbiont-mediated activation of host autophagy / RNA-directed RNA polymerase / cysteine-type endopeptidase activity / viral RNA genome replication / RNA-directed RNA polymerase activity / DNA-templated transcription / virion attachment to host cell / host cell nucleus / structural molecule activity / ATP hydrolysis activity / proteolysis / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / membrane
類似検索 - 分子機能
Picornavirus coat protein / Poliovirus 3A protein-like / Poliovirus 3A protein like / Picornavirus 2B protein / Poliovirus core protein 3a, soluble domain / Picornavirus 2B protein / Peptidase C3, picornavirus core protein 2A / Picornavirus core protein 2A / Picornavirus coat protein VP4 / Picornavirus coat protein (VP4) ...Picornavirus coat protein / Poliovirus 3A protein-like / Poliovirus 3A protein like / Picornavirus 2B protein / Poliovirus core protein 3a, soluble domain / Picornavirus 2B protein / Peptidase C3, picornavirus core protein 2A / Picornavirus core protein 2A / Picornavirus coat protein VP4 / Picornavirus coat protein (VP4) / Peptidase C3A/C3B, picornaviral / 3C cysteine protease (picornain 3C) / Picornavirales 3C/3C-like protease domain / Picornavirales 3C/3C-like protease domain profile. / Picornavirus capsid / picornavirus capsid protein / Helicase, superfamily 3, single-stranded RNA virus / Superfamily 3 helicase of positive ssRNA viruses domain profile. / Helicase, superfamily 3, single-stranded DNA/RNA virus / RNA helicase / Picornavirus/Calicivirus coat protein / Viral coat protein subunit / RNA-directed RNA polymerase, C-terminal domain / Viral RNA-dependent RNA polymerase / Reverse transcriptase/Diguanylate cyclase domain / RNA-directed RNA polymerase, catalytic domain / RdRp of positive ssRNA viruses catalytic domain profile. / ATPases associated with a variety of cellular activities / AAA+ ATPase domain / Peptidase S1, PA clan, chymotrypsin-like fold / Peptidase S1, PA clan / DNA/RNA polymerase superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
SPHINGOSINE / Genome polyprotein
類似検索 - 構成要素
生物種Mus musculus (ハツカネズミ)
Enterovirus A71 (エンテロウイルス)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.04 Å
データ登録者Jiang, Y. / Zhu, R. / Zheng, Q. / Li, S. / Xia, N.
資金援助1件
組織認可番号国
Not funded
引用ジャーナル: Vaccines (Basel) / 年: 2025
タイトル: Development of In Vitro Potency Methods to Replace In Vivo Tests for Enterovirus 71 Inactivated Vaccine (Human Diploid Cell-Based/Vero Cell-Based).
著者: Xuanxuan Zhang / Li Yi / Dan Yu / Jun Li / Xintian Li / Xing Wu / Fan Gao / Qian He / Wenhui Wang / Kaiwen Wang / Zejun Wang / Zhengling Liu / Yadong Li / Yong Zhao / Huiyi Li / Xiao Ma / ...著者: Xuanxuan Zhang / Li Yi / Dan Yu / Jun Li / Xintian Li / Xing Wu / Fan Gao / Qian He / Wenhui Wang / Kaiwen Wang / Zejun Wang / Zhengling Liu / Yadong Li / Yong Zhao / Huiyi Li / Xiao Ma / Qingbing Zheng / Longfa Xu / Tong Cheng / Rui Zhu / Jing Guo / Jing Li / Qunying Mao / Zhenglun Liang /
要旨: BACKGROUND: The three commercial Enterovirus 71 (EV71) inactivated vaccines which have effectively controlled the EV71 pandemic currently rely on inherent variable in vivo potency methods for batch ...BACKGROUND: The three commercial Enterovirus 71 (EV71) inactivated vaccines which have effectively controlled the EV71 pandemic currently rely on inherent variable in vivo potency methods for batch release. To align with 3R (Replacement, Reduction, Refinement) principles and enhance quality control, this study referred to WHO guidelines and the European Pharmacopoeia to develop in vitro relative potency (IVRP) methods.
手法: Working standards tracing to phase 3 clinical vaccines were established. Manufacture-specific IVRP methods were developed and validated per ICH Q14/Q2(R2), utilizing conformational epitope- ...手法: Working standards tracing to phase 3 clinical vaccines were established. Manufacture-specific IVRP methods were developed and validated per ICH Q14/Q2(R2), utilizing conformational epitope-targeting neutralizing monoclonal antibodies (MAbs). One of the MAbs (CT11F9) recognition sites was clarified with Cryo-EM. Subsequently, the performance of IVRP was assessed using varied concentrations and heat-treated vaccines. The correlation between IVRP and in vivo methods was analyzed, followed by setting IVRP specifications.
RESULTS: The manufacturer-specific working standard exhibited ED50 values comparable to those of related phase 3 clinical vaccines. All IVRP methods achieved a relative bias/precision/total error ≤ ...RESULTS: The manufacturer-specific working standard exhibited ED50 values comparable to those of related phase 3 clinical vaccines. All IVRP methods achieved a relative bias/precision/total error ≤ 15%. The IVRP methods correlated with in vivo methods ( < 0.05, r > 0.9) can discriminate EV71 antigen concentrations ( < 0.01, r > 0.99) and indicate the stability of the vaccines. Cryo-EM was adopted to identify the epitopes recognized by CT11F9, revealing that this neutralizing antibody recognizes a conformational epitope spanning VP1-3 of the same protomer. Using 31-47 batches of commercial vaccines, IVRP specifications were proposed as 0.56-1.35, 0.58-1.40, and 0.54-1.50.
CONCLUSIONS: Based on conformational epitope-targeting neutralizing MAbs, manufacturer-specific IVRP methods, which were sensitive to process variations and correlated with in vivo results, have been ...CONCLUSIONS: Based on conformational epitope-targeting neutralizing MAbs, manufacturer-specific IVRP methods, which were sensitive to process variations and correlated with in vivo results, have been established. IVRP methods provide a reliable, animal-free alternative for EV71 vaccine batch release.
履歴
登録2025年3月11日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBC
改定 1.02025年4月23日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年5月21日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / citation_author / em_admin
Item: _citation.journal_volume / _citation.pdbx_database_id_DOI ..._citation.journal_volume / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
L: The light chain of Fab CT11F9
H: The heavy chain of Fab CT11F9
A: Capsid protein VP1
B: Capsid protein VP2
C: Capsid protein VP3
D: Capsid protein VP4
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)119,6947
ポリマ－119,3956
非ポリマー2991
水00
1
L: The light chain of Fab CT11F9
H: The heavy chain of Fab CT11F9
A: Capsid protein VP1
B: Capsid protein VP2
C: Capsid protein VP3
D: Capsid protein VP4
ヘテロ分子
x 60


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)7,181,667420
ポリマ－7,163,697360
非ポリマー17,97060
水0
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
point symmetry operation59
2


  • 登録構造と同一
  • icosahedral asymmetric unit
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
3
L: The light chain of Fab CT11F9
H: The heavy chain of Fab CT11F9
A: Capsid protein VP1
B: Capsid protein VP2
C: Capsid protein VP3
D: Capsid protein VP4
ヘテロ分子
x 5


  • icosahedral pentamer
  • 598 kDa, 30 ポリマー
分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)598,47235
ポリマ－596,97530
非ポリマー1,4975
水0
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
point symmetry operation4
4
L: The light chain of Fab CT11F9
H: The heavy chain of Fab CT11F9
A: Capsid protein VP1
B: Capsid protein VP2
C: Capsid protein VP3
D: Capsid protein VP4
ヘテロ分子
x 6


  • icosahedral 23 hexamer
  • 718 kDa, 36 ポリマー
分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)718,16742
ポリマ－716,37036
非ポリマー1,7976
水0
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
point symmetry operation5
5


  • 登録構造と同一（異なる座標系）
  • icosahedral asymmetric unit, std point frame
タイプ名称対称操作数
transform to point frame1
対称性点対称性: (シェーンフリース記号: I (正20面体型対称))

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要素

-
Capsid protein ... , 4種, 4分子 ABCD

#3: タンパク質 Capsid protein VP1 / P1D / Virion protein 1


分子量: 32730.848 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Enterovirus A71 (エンテロウイルス) / 参照: UniProt: B9VUU3
#4: タンパク質 Capsid protein VP2 / P1B / Virion protein 2


分子量: 27726.135 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Enterovirus A71 (エンテロウイルス) / 参照: UniProt: B9VUU3
#5: タンパク質 Capsid protein VP3 / P1C / Virion protein 3


分子量: 26468.225 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Enterovirus A71 (エンテロウイルス) / 参照: UniProt: B9VUU3
#6: タンパク質 Capsid protein VP4


分子量: 7501.162 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Enterovirus A71 (エンテロウイルス) / 参照: UniProt: B9VUU3

-
抗体 , 2種, 2分子 LH

#1: 抗体 The light chain of Fab CT11F9


分子量: 11474.827 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Mus musculus (ハツカネズミ) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト)
#2: 抗体 The heavy chain of Fab CT11F9


分子量: 13493.756 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Mus musculus (ハツカネズミ) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト)

-
非ポリマー , 1種, 1分子

#7: 化合物 ChemComp-SPH / SPHINGOSINE


分子量: 299.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: C18H37NO2 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationY

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実験情報

-
実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

-
試料調製

構成要素
ID名称タイプEntity IDParent-ID由来
1Enterovirus A71 mature virion in complex with Fab CT11F9COMPLEX#1-#60MULTIPLE SOURCES
2Enterovirus A71 mature virionCOMPLEX#3-#61NATURAL
3Fab CT11F9COMPLEX#1-#21RECOMBINANT
由来(天然)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
12Enterovirus A71 (エンテロウイルス)39054
23Mus (ネズミ)10088
由来(組換発現)生物種: Homo sapiens (ヒト)
ウイルスについての詳細中空か: NO / エンベロープを持つか: NO / 単離: OTHER / タイプ: VIRION
緩衝液pH: 7.4
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

-
電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TECNAI F30
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 4000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 300 nm
撮影電子線照射量: 40 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 3.04 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 71798 / 対称性のタイプ: POINT
精密化最高解像度: 3.04 Å
立体化学のターゲット値: REAL-SPACE (WEIGHTED MAP SUM AT ATOM CENTERS)
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0038310
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.47911360
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d4.2981158
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0431264
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0041466

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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