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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9jf8 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the EXS domain of Arabidopsis thaliana phosphate transporter PHO1;H1 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Phosphate transporter PHO1 homolog 1 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | MEMBRANE PROTEIN / phosphate transport / SPX domain / PHO1 / SPX-EXS / cryo-EM / InsP6 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.05 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Fang, S. / Zhang, X. / Zhang, P. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural mechanism underlying PHO1;H1-mediated phosphate transport in Arabidopsis. 著者: Sunzhenhe Fang / Yang Yang / Xue Zhang / Zhao Yang / Minhua Zhang / Yang Zhao / Chensi Zhang / Fang Yu / Yong-Fei Wang / Peng Zhang / ![]() 要旨: Arabidopsis PHOSPHATE 1 (AtPHO1) and its closest homologue AtPHO1;H1 are phosphate transporters that load phosphate into the xylem vessel for root-to-shoot translocation. AtPHO1 and AtPHO1;H1 are ...Arabidopsis PHOSPHATE 1 (AtPHO1) and its closest homologue AtPHO1;H1 are phosphate transporters that load phosphate into the xylem vessel for root-to-shoot translocation. AtPHO1 and AtPHO1;H1 are prototypical members of the unique SPX-EXS family, whose structural and molecular mechanisms remain elusive. In this study, we determined the cryogenic electron microscopy structure of AtPHO1;H1 binding with inorganic phosphate (Pi) and inositol hexakisphosphate in a closed conformation. Further molecular dynamic simulation and AlphaFold prediction support an open conformation. AtPHO1;H1 forms a domain-swapped homodimer that involves both the transmembrane ERD1/XPR1/SYG1 (EXS) domain and the cytoplasmic SYG1/Pho81/XPR1 (SPX) domain. The EXS domain presented by the SPX-EXS family represents a novel protein fold, and an independent substrate transport pathway and substrate-binding site are present in each EXS domain. Two gating residues, Trp719 and Tyr610, are identified above the substrate-binding site to control opening and closing of the pathway. The SPX domain features positively charged patches and/or residues at the dimer interface to accommodate inositol hexakisphosphate molecules, whose binding mediates dimerization and enhances AtPHO1;H1 activity. In addition, a C-terminal tail is required for AtPHO1;H1 activity. On the basis of structural and functional analysis, a working model for Pi efflux mediated by AtPHO1;H1 and its homologues was postulated, suggesting a channel-like mechanism. This study not only reveals the molecular and regulatory mechanism underlying Pi transport mediated by the unique SPX-EXS family, but also provides potential for crop engineering to enhance phosphorus-use efficiency in sustainable agriculture. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 91.1 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 64.4 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 393.4 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 395.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 8.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 13.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 61430MC ![]() 9ik4C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 90830.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: PHO1-H1, At1g68740, F14K14.15, F24J5.2 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q93ZF5 |
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#2: 化合物 | ChemComp-PO4 / |
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: EXS domain of Arabidopsis PHO1;H1 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOCONTINUUM (6k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.14_3260: / カテゴリ: モデル精密化 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 3.05 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 288715 / 対称性のタイプ: POINT |