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万見
- PDB-9im6: Structure of influenza A virus RNA polymerase PB1 and nuclear imp... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9im6
タイトルStructure of influenza A virus RNA polymerase PB1 and nuclear import host factor RanBP5 complex
要素
  • Importin-5
  • RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit
キーワードNUCLEAR PROTEIN / virus RNA polymerase
機能・相同性
機能・相同性情報


cRNA Synthesis / Influenza Infection / Fusion of the Influenza Virion to the Host Cell Endosome / Release / Budding / Packaging of Eight RNA Segments / Uncoating of the Influenza Virion / Entry of Influenza Virion into Host Cell via Endocytosis / GTPase inhibitor activity / vRNA Synthesis ...cRNA Synthesis / Influenza Infection / Fusion of the Influenza Virion to the Host Cell Endosome / Release / Budding / Packaging of Eight RNA Segments / Uncoating of the Influenza Virion / Entry of Influenza Virion into Host Cell via Endocytosis / GTPase inhibitor activity / vRNA Synthesis / Viral RNP Complexes in the Host Cell Nucleus / Transport of Ribonucleoproteins into the Host Nucleus / NLS-bearing protein import into nucleus / nuclear localization sequence binding / ribosomal protein import into nucleus / NEP/NS2 Interacts with the Cellular Export Machinery / nuclear import signal receptor activity / Viral Messenger RNA Synthesis / vRNP Assembly / cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway / viral transcription / symbiont-mediated suppression of host mRNA transcription via inhibition of RNA polymerase II activity / negative regulation of cell cycle / Viral mRNA Translation / nuclear pore / cellular response to amino acid stimulus / small GTPase binding / positive regulation of protein import into nucleus / protein import into nucleus / nuclear membrane / host cell cytoplasm / symbiont-mediated suppression of host gene expression / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / RNA-directed RNA polymerase activity / nucleotide binding / DNA-templated transcription / nucleolus / host cell nucleus / Golgi apparatus / RNA binding / extracellular region / nucleoplasm / nucleus / membrane / cytosol / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Importin repeat / Importin repeat 6 / Importin repeat 4 / Importin repeat / Importin repeat / Importin repeat 6 / Importin beta family / TOG domain / TOG / HEAT-like repeat ...Importin repeat / Importin repeat 6 / Importin repeat 4 / Importin repeat / Importin repeat / Importin repeat 6 / Importin beta family / TOG domain / TOG / HEAT-like repeat / HEAT repeat / HEAT repeat / Importin-beta N-terminal domain profile. / Importin-beta, N-terminal domain / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / Influenza RNA-dependent RNA polymerase subunit PB1 / RNA-directed RNA polymerase, negative-strand RNA virus / RdRp of negative ssRNA viruses with segmented genomes catalytic domain profile. / Armadillo-like helical / Armadillo-type fold
類似検索 - ドメイン・相同性
Importin-5 / RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
Influenza A virus (A型インフルエンザウイルス)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.21 Å
データ登録者Uchikubo-Kamo, T. / Ishimoto, N. / Park, S.Y.
資金援助1件
組織認可番号国
Not funded
引用ジャーナル: Biochem Biophys Res Commun / 年: 2024
タイトル: Structural insights into Influenza A virus RNA polymerase PB1 binding to nuclear import host factor RanBP5.
著者: Tomomi Uchikubo-Kamo / Naito Ishimoto / Haruka Umezawa / Mikako Hirohama / Maasa Ono / Haruka Kawabata / Kenichi Kamata / Mio Ohki / Hisashi Yoshida / Jae-Hyun Park / Jeremy R H Tame / ...著者: Tomomi Uchikubo-Kamo / Naito Ishimoto / Haruka Umezawa / Mikako Hirohama / Maasa Ono / Haruka Kawabata / Kenichi Kamata / Mio Ohki / Hisashi Yoshida / Jae-Hyun Park / Jeremy R H Tame / Atsushi Kawaguchi / Sam-Yong Park /
要旨: The genome of influenza A viruses consists of eight RNA segments that form a heterotrimer, and the viral genome undergoes transcription and replication in the nucleus. Thus, during infection, newly ...The genome of influenza A viruses consists of eight RNA segments that form a heterotrimer, and the viral genome undergoes transcription and replication in the nucleus. Thus, during infection, newly synthesized RNA polymerase subunits must be imported into the nucleus. Although several models have been proposed for this process, the consensus is that the RNA polymerase subunits PB1 and PA form a dimer in the cytoplasm and are transported into the nucleus by Ran binding protein 5 (RanBP5). The PB2 subunit undergoes separate transport to complete the nuclear import. However, the molecular mechanism of nuclear import by host factors and their interactions with proteins are largely unknown. Here we present the structural analysis of the RanBP5 and PB1 NLS domain complex by cryo-EM at 3.2 Å resolution. The pattern shows that the NLS domain of PB1 does not exist in a secondary structure and interacts with RanBP5 in a wrapped state. In addition, biochemical analyses of the mutant have identified critical amino acid sites involved in complex binding. The results suggest a stepwise assembly of influenza virus structural components regulated by nuclear import mechanisms and host factor binding, with important implications for drug discovery research.
履歴
登録2024年7月2日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02024年11月27日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Additional map / Data content type: Additional map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: FSC / Data content type: FSC / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Half map / Part number: 1 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Half map / Part number: 2 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Image / Data content type: Image / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Mask / Data content type: Mask / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年7月2日Group: Data collection / カテゴリ: em_admin / em_software / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name
改定 1.12025年7月2日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Data processing / Experimental summary / Data content type: EM metadata / EM metadata / カテゴリ: em_admin / em_software / Data content type: EM metadata / EM metadata / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Importin-5
B: RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)132,6732
ポリマ－132,6732
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 Importin-5 / Imp5 / Importin subunit beta-3 / Karyopherin beta-3 / Ran-binding protein 5 / RanBP5


分子量: 126154.023 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: IPO5, KPNB3, RANBP5 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: O00410
#2: タンパク質 RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit / Polymerase basic protein 1 / PB1 / RNA-directed RNA polymerase subunit P1


分子量: 6518.490 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Influenza A virus (strain A/Puerto Rico/8/1934 H1N1)
遺伝子: PB1 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P03431, RNA-directed RNA polymerase
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素
ID名称タイプEntity IDParent-ID由来
1influenza A virus RNA polymerase PB1 and nuclear import host factor RanBP5 complex.COMPLEXall0RECOMBINANT
2RanBP5COMPLEX#11RECOMBINANT
3RNA polymerase PB1COMPLEX#21RECOMBINANT
由来(天然)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
22Homo sapiens (ヒト)9606
33Influenza A virus (strain A/Puerto Rico/8/1934 H1N1) (A型インフルエンザウイルス)211044
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
緩衝液pH: 8
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: TFS KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 105000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 800 nm
撮影
IDImaging-ID電子線照射量 (e/Å2)フィルム・検出器のモデル
1147.37GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
2147.9GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 3.21 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 226937 / 対称性のタイプ: POINT
精密化最高解像度: 3.21 Å

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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