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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9iho | ||||||
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タイトル | Open state without NUQM and without flavoprotein (classification state 4) of Pichia pastoris mitochondrial complex I in cMSP26 nanodiscs | ||||||
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![]() | MEMBRANE PROTEIN / NADH:ubiquinone oxidoreductase nanodisc membrane protein complex | ||||||
機能・相同性 | ![]() NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) / NADH dehydrogenase complex / oxidoreductase activity, acting on NAD(P)H / NADH dehydrogenase activity / acyl binding / ubiquinone binding / electron transport coupled proton transport / acyl carrier activity / NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) / mitochondrial respiratory chain complex I assembly ...NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) / NADH dehydrogenase complex / oxidoreductase activity, acting on NAD(P)H / NADH dehydrogenase activity / acyl binding / ubiquinone binding / electron transport coupled proton transport / acyl carrier activity / NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) / mitochondrial respiratory chain complex I assembly / mitochondrial electron transport, NADH to ubiquinone / respiratory chain complex I / NADH dehydrogenase (ubiquinone) activity / quinone binding / ATP synthesis coupled electron transport / aerobic respiration / respiratory electron transport chain / electron transport chain / mitochondrial membrane / mitochondrial intermembrane space / NAD binding / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / response to oxidative stress / oxidoreductase activity / mitochondrial inner membrane / protein-containing complex binding / mitochondrion / metal ion binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | ||||||
![]() | Grba, D.N. / Hirst, J. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Global conformations of complex I are distinguished by the binding of a unique interdomain bridging subunit. 著者: Chris Seunggyu Lee / Daniel N Grba / John J Wright / Bozhidar S Ivanov / Judy Hirst / ![]() 要旨: Complex I (CI; NADH ubiquinone oxidoreductase) is central to energy generation and metabolic homeostasis in mammalian cells but contributes to adverse outcome pathways under challenging conditions. ...Complex I (CI; NADH ubiquinone oxidoreductase) is central to energy generation and metabolic homeostasis in mammalian cells but contributes to adverse outcome pathways under challenging conditions. During ischemia, mammalian CI transitions from a turnover-ready, structurally "closed" state toward a dormant "open" state that prevents it from functioning in reverse during reperfusion to produce reactive oxygen species. Unfortunately, simpler, genetically tractable CI models do not recapitulate the same regulatory behavior, compromising mechanistic studies. Here, we report the structure of isolated CI from the yeast (-CI) and identify distinct closed and open states that resemble those of mammalian CI. Notably, a hitherto-unknown protein (NUQM) completes an interdomain bridge in only the closed state, implying that NUQM stabilizes it by restricting the conformational changes of opening. The direct correlation of NUQM binding with closed/open status in -CI provides opportunities for investigating regulatory mechanisms relevant to reversible catalysis and ischemia-reperfusion injury. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 1.6 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 3.9 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 4.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 233 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 334.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-NADH-ubiquinone oxidoreductase chain ... , 6種, 6分子 AHJLMN
#1: タンパク質 | 分子量: 16019.821 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: E1UWC4, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
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#6: タンパク質 | 分子量: 39698.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: E1UWC2, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#8: タンパク質 | 分子量: 18564.352 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: E1UWC7, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#10: タンパク質 | 分子量: 72436.070 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: E1UWC6, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#11: タンパク質 | 分子量: 54784.211 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: E1UWC5, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#12: タンパク質 | 分子量: 59097.926 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: E1UWC3, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
+タンパク質 , 27種, 27分子 BCDGIKOPRSVWXYbcdefghijklmp
-NADH dehydrogenase [ubiquinone] ... , 6種, 6分子 QZanoq
#15: タンパク質 | 分子量: 18241.705 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#24: タンパク質 | 分子量: 17243.695 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#25: タンパク質 | 分子量: 17446.691 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#38: タンパク質 | 分子量: 12845.718 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#39: タンパク質 | 分子量: 10473.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#41: タンパク質 | 分子量: 16331.366 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Acyl carrier ... , 2種, 2分子 TU
#18: タンパク質 | 分子量: 15507.594 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#19: タンパク質 | 分子量: 14780.592 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-非ポリマー , 8種, 52分子 














#42: 化合物 | ChemComp-SF4 / #43: 化合物 | ChemComp-PLC / #44: 化合物 | ChemComp-K / | #45: 化合物 | ChemComp-3PE / #46: 化合物 | ChemComp-CDL / #47: 化合物 | ChemComp-NDP / | #48: 化合物 | ChemComp-ZN / | #49: 化合物 | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Pichia Pastoris (Komagataella phaffi) mitochondrial complex I (NADH:ubiquinone oxidoreductase) タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#41 / 由来: NATURAL | |||||||||||||||
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分子量 | 値: 0.820 MDa / 実験値: YES | |||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() | |||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 10 mM MOPS, 50 mM KCl, pH 7.5 at 4 degrees celsius. | |||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: LMNG-solubilised Pichia Pastoris CI reconstituted in to nanodiscs (8:1:1 ratio of DOPC:DOPE:CDL [0.5 mg total] and 20 nM final Q10) | |||||||||||||||
試料支持 | 詳細: Glow discharge 90s 20 mA + chloroform and ethanol clean. Glow discharge 2X 90s 20mA, flipping in between. グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R0.6/1 | |||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K / 詳細: 2s blot time and -10 blot force |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 5.85 sec. / 電子線照射量: 47.79 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: TFS FALCON 4i (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 7574 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: TFS Selectris X / エネルギーフィルタースリット幅: 10 eV |
画像スキャン | 横: 4096 / 縦: 4096 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1350752 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 18608 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 空間: REAL 詳細: The initial model was built into a map using ModelAngelo in RELION v5.0 to generate state 1. This model then had the required subunits deleted, and this was manually inspected in Coot and ...詳細: The initial model was built into a map using ModelAngelo in RELION v5.0 to generate state 1. This model then had the required subunits deleted, and this was manually inspected in Coot and final refinements with ligand restraints imposed performed in PHENIX v.1.21_5207 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 9ihr Accession code: 9ihr / 詳細: State 1 from dataset using ModelAngelo initially / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 35.72 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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