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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9h94 | ||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Poliovirus type 2 (strain MEF-1) stabilised virus-like particle (PV2 SC5a) from a yeast expression system. | ||||||||||||||||||||||||
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![]() | VIRUS LIKE PARTICLE / Capsid protein / virus-like particle / vaccine | ||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of RIG-I activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / receptor-mediated endocytosis of virus by host cell / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MAVS activity / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid ...symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of RIG-I activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / receptor-mediated endocytosis of virus by host cell / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MAVS activity / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / viral capsid / host cell / nucleoside-triphosphate phosphatase / channel activity / monoatomic ion transmembrane transport / host cell cytoplasm / DNA replication / RNA helicase activity / symbiont-mediated suppression of host gene expression / symbiont-mediated activation of host autophagy / RNA-directed RNA polymerase / cysteine-type endopeptidase activity / viral RNA genome replication / RNA-directed RNA polymerase activity / DNA-templated transcription / symbiont entry into host cell / virion attachment to host cell / host cell nucleus / structural molecule activity / proteolysis / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() | ||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.1 Å | ||||||||||||||||||||||||
![]() | Bahar, M.W. / Sherry, L. / Stonehouse, N.J. / Rowlands, D.J. / Fry, E.E. / Stuart, D.I. | ||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Production of an immunogenic trivalent poliovirus virus-like particle vaccine candidate in yeast using controlled fermentation. 著者: Lee Sherry / Keith Grehan / Mohammad W Bahar / Jessica J Swanson / Helen Fox / Sue Matthews / Sarah Carlyle / Ling Qin / Claudine Porta / Steven Wilkinson / Suzanne Robb / Naomi Clark / John ...著者: Lee Sherry / Keith Grehan / Mohammad W Bahar / Jessica J Swanson / Helen Fox / Sue Matthews / Sarah Carlyle / Ling Qin / Claudine Porta / Steven Wilkinson / Suzanne Robb / Naomi Clark / John Liddell / Elizabeth E Fry / David I Stuart / Andrew J Macadam / David J Rowlands / Nicola J Stonehouse / ![]() 要旨: The success of the poliovirus (PV) vaccines has enabled the near-eradication of wild PV, however, their continued use post-eradication poses concerns, due to the potential for virus escape during ...The success of the poliovirus (PV) vaccines has enabled the near-eradication of wild PV, however, their continued use post-eradication poses concerns, due to the potential for virus escape during vaccine manufacture. Recombinant virus-like particles (VLPs) that lack the viral genome remove this risk. Here, we demonstrate the production of PV VLPs for all three serotypes by controlled fermentation using Pichia pastoris. We determined the cryo-EM structure of a new PV2 mutant, termed SC5a, in comparison to PV2-SC6b VLPs described previously and investigated the immunogenicity of PV2-SC5a VLPs. Finally, a trivalent immunogenicity trial using bioreactor-derived VLPs of all three serotypes in the presence of Alhydrogel adjuvant, showed that these VLPs outperform the current IPV vaccine in the standard vaccine potency assay, offering the potential for dose-sparing. Overall, these results provide further evidence that yeast-produced VLPs have the potential to be a next-generation polio vaccine in a post-eradication world. | ||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 164 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 123.2 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 46.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 68.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 51952MC ![]() 9h93C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 | ![]()
| x 60
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 33073.246 Da / 分子数: 1 / 変異: VP1 T41I, VP1 F134L, VP1 Y159F / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
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#2: タンパク質 | 分子量: 37456.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#3: タンパク質 | 分子量: 26491.340 Da / 分子数: 1 / 変異: VP3 L85F, VP3 Q178L / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#4: 化合物 | ChemComp-SPH / |
#5: 水 | ChemComp-HOH / |
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Poliovirus 2 / タイプ: VIRUS 詳細: Recombinantly expressed virus-like particle of poliovirus type 2 (MEF-1 strain). Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||
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分子量 | 値: 5.81 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() | ||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: ![]() | ||||||||||||
ウイルスについての詳細 | 中空か: YES / エンベロープを持つか: NO / 単離: SEROTYPE / タイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE | ||||||||||||
天然宿主 | 生物種: Homo sapiens | ||||||||||||
ウイルス殻 | 名称: Virus shell 1 / 直径: 310 nm / 三角数 (T数): 1 | ||||||||||||
緩衝液 | pH: 7 / 詳細: 1 x DPBS, 20 mM EDTA, pH 7.0 | ||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.6 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: Sample purified by sucrose density gradient ultracentrifugation. | ||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 | ||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE-PROPANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K 詳細: 3ul of sample double blotted for 3.5 seconds with -15 blot force on FEI Vitrobot mark IV. |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: DARK FIELD / 倍率(公称値): 150000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2300 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 3 sec. / 電子線照射量: 47.5 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1862 詳細: Pixel sampling was 0.831 A/pixel. Super-resolution collection mode was used 0.415 A/pixel. Energy filter was Gatan GIF Quantum. |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 243874 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 147409 / アルゴリズム: BACK PROJECTION 詳細: Icosahedral symmetry applied to final reconstruction. Final maps were post-processed with an inverse B-factor of -94.4 Angstrom squared. クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient 詳細: Initial model was rigid body fitted using UCSF chimera and Coot. Global minimization and B-factor refinement was performed in real space using phenix_real.space.refine. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 1EAH Accession code: 1EAH / Source name: PDB / タイプ: experimental model | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 2.1 Å 立体化学のターゲット値: REAL-SPACE (WEIGHTED MAP SUM AT ATOM CENTERS) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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