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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9go5 | ||||||
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タイトル | CryoEM Reconstruction of Yeast ADP-Actin Filament at 2.5 A resolution. | ||||||
![]() | Actin | ||||||
![]() | PROTEIN FIBRIL / Fibre / polymer / helical protein / motility | ||||||
機能・相同性 | ![]() RHOB GTPase cycle / RHOA GTPase cycle / cellular bud neck contractile ring / mitotic actomyosin contractile ring contraction / vacuole inheritance / ascospore wall assembly / actin cortical patch / Swr1 complex / Ino80 complex / establishment of cell polarity ...RHOB GTPase cycle / RHOA GTPase cycle / cellular bud neck contractile ring / mitotic actomyosin contractile ring contraction / vacuole inheritance / ascospore wall assembly / actin cortical patch / Swr1 complex / Ino80 complex / establishment of cell polarity / NuA4 histone acetyltransferase complex / actin filament bundle / protein secretion / actin filament / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / structural constituent of cytoskeleton / endocytosis / actin cytoskeleton / chromatin remodeling / DNA repair / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / chromatin / ATP hydrolysis activity / ATP binding / identical protein binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.5 Å | ||||||
![]() | Bullough, P.A. / Ayscough, K.R. / Lahiri, I. / Tzokov, S.B. / Stevenson, S.R. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM reconstruction of yeast ADP-actin filament at 2.5 Å resolution. A comparison with vertebrate F-actin. 著者: Sarah R Stevenson / Svetomir B Tzokov / Indrajit Lahiri / Kathryn R Ayscough / Per A Bullough / ![]() 要旨: The core component of the actin cytoskeleton is the globular protein G-actin, which reversibly polymerizes into filaments (F-actin). Budding yeast possesses a single actin that shares 87%-89% ...The core component of the actin cytoskeleton is the globular protein G-actin, which reversibly polymerizes into filaments (F-actin). Budding yeast possesses a single actin that shares 87%-89% sequence identity with vertebrate actin isoforms. Previous structural studies indicate very close overlap of main-chain backbones. Intriguingly, however, substitution of yeast ACT1 with vertebrate β-cytoplasmic actin severely disrupts cell function and the substitution with a skeletal muscle isoform is lethal. Here we report a 2.5 Å structure of budding yeast F-actin. Previously unresolved side-chain information allows us to highlight four main differences in the comparison of yeast and vertebrate ADP F-actins: a more open nucleotide binding pocket; a more solvent exposed C-terminus; a rearrangement of inter-subunit binding interactions in the vicinity of the D loop and changes in the hydrogen bonding network in the vicinity of histidine 73 (yeast actin) and methyl-histidine 73 (vertebrate actin). | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 366.9 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 299.1 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 51491MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 41735.547 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: ACT1, ABY1, END7, YFL039C / 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: P60010, 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 #2: 化合物 | ChemComp-ADP / #3: 化合物 | ChemComp-MG / #4: 水 | ChemComp-HOH / | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | Has protein modification | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: HELICAL ARRAY / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Polymer of actin subunits / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 50 mM KCl, 1 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 10 mM Tris |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 装置: LEICA EM GP / 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 27 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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らせん対称 | 回転角度/サブユニット: -167.2 ° / 軸方向距離/サブユニット: 2.76 Å / らせん対称軸の対称性: C1 |
3次元再構成 | 解像度: 2.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 1368572 / 対称性のタイプ: HELICAL |
原子モデル構築 | 手法: real space / プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL |