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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 9gc3 | ||||||
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| タイトル | yeast TFIIIC TauB subcomplex bound to a tRNA gene | ||||||
 要素 | 
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 キーワード | DNA BINDING PROTEIN / Base-specific contacts / B-box / tRNA gene | ||||||
| 機能・相同性 |  機能・相同性情報5S class rRNA transcription by RNA polymerase III / transcription factor TFIIIC complex / RNA polymerase III general transcription initiation factor activity / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / transcription by RNA polymerase III / protein localization to chromatin / mitochondrion / DNA binding / nucleoplasm / nucleus 類似検索 - 分子機能  | ||||||
| 生物種 | ![]()  | ||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.46 Å | ||||||
 データ登録者 | Seifert-Davila, W. / Girbig, M. / Hauptmann, L. / Hoffmann, T. / Eustermann, S. / Mueller, C. / Chaban, A. / Duss, O. / Baudin, F. | ||||||
| 資金援助 | 1件 
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 引用 |  ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2025タイトル: Structural and kinetic insights into tRNA promoter engagement by yeast general transcription factor TFIIIC. 著者: Wolfram Seifert-Dávila / Anastasiia Chaban / Florence Baudin / Mathias Girbig / Luis Hauptmann / Thomas Hoffmann / Olivier Duss / Sebastian Eustermann / Christoph W Müller / ![]() 要旨: Transcription of transfer RNA (tRNA) genes by RNA polymerase (Pol) III requires the general transcription factor IIIC (TFIIIC), which recognizes intragenic A-box and B-box DNA motifs of type II ...Transcription of transfer RNA (tRNA) genes by RNA polymerase (Pol) III requires the general transcription factor IIIC (TFIIIC), which recognizes intragenic A-box and B-box DNA motifs of type II gene promoters. However, the underlying mechanism has remained elusive, in part due to missing structural information for A-box recognition. In this study, we use single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM) and single-molecule fluorescence resonance energy transfer (smFRET) to reveal structural and real-time kinetic insights into how the 520-kDa yeast TFIIIC complex engages A-box and B-box DNA motifs in the context of a tRNA gene promoter. Cryo-EM structures of τA and τB subcomplexes bound to the A-box and B-box were obtained at 3.7 and 2.5 Å resolution, respectively, while cryo-EM single-particle mapping determined the specific distance and relative orientation of the τA and τB subcomplexes revealing a fully engaged state of TFIIIC. smFRET experiments show that overall recruitment and residence times of TFIIIC on a tRNA gene are primarily governed by B-box recognition, while footprinting experiments suggest a key role of τA and the A-box in TFIIIB and Pol III recruitment following TFIIIC recognition of type II promoters.  | ||||||
| 履歴 | 
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子:  Molmil Jmol/JSmol | 
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 |  9gc3.cif.gz | 409.5 KB | 表示 |  PDBx/mmCIF形式 | 
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 |  pdb9gc3.ent.gz | 310.9 KB | 表示 |  PDB形式 | 
| PDBx/mmJSON形式 |  9gc3.json.gz | ツリー表示 |  PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 |  その他のダウンロード | 
-検証レポート
| 文書・要旨 |  9gc3_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 |  wwPDB検証レポート | 
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 |  9gc3_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
| XML形式データ |  9gc3_validation.xml.gz | 52.4 KB | 表示 | |
| CIF形式データ |  9gc3_validation.cif.gz | 81.3 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ |  https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/gc/9gc3 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/gc/9gc3 | HTTPS FTP  | 
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 51228MC ![]() 9gckC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (  | 
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性  F&H 検索 | 
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]() 
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| 1 | 
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要素
| #1: タンパク質 |   分子量: 136602.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: TFC3, TSV115, YAL001C, FUN24 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: P34111  | 
|---|---|
| #2: タンパク質 |   分子量: 76484.070 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: TFC6, YDR362C 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: Q06339  | 
| #3: タンパク質 |   分子量: 67755.172 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: TFC8, YPL007C 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: Q12308  | 
| #4: DNA鎖 |   分子量: 12358.934 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]()  | 
| #5: DNA鎖 |   分子量: 12265.904 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]()  | 
| Has protein modification | N | 
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 | 
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 | 
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Yeast TFIIIC TauB monomer bound to a tRNA gene / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT | 
|---|---|
| 分子量 | 実験値: NO | 
| 由来(天然) | 生物種: ![]()  | 
| 由来(組換発現) | 生物種: ![]()  | 
| 緩衝液 | pH: 8 | 
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | 
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE | 
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company  | 
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS | 
| 電子銃 | 電子線源:  FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM | 
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1700 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 700 nm | 
| 撮影 | 電子線照射量: 39.6 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) 詳細: dataset1: 39.6 dataset2: 43.6 dataset3: 43.2 dataset4: 43.2 dataset5: 44.4  | 
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解析
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 3次元再構成 | 解像度: 2.46 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 570437 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 解像度: 2.46→2.46 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.943  / SU B: 5.693  / SU ML: 0.118  / ESU R: 0.153  立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS 
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| 溶媒の処理 | 溶媒モデル: PARAMETERS FOR MASK CACLULATION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 96.053 Å2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 精密化ステップ | サイクル: 1 / 合計: 15049 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 | 
  | 
ムービー
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万見について






引用



PDBj









































FIELD EMISSION GUN