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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9cer | |||||||||
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タイトル | Guillardia theta Fanzor (GtFz) State 1 | |||||||||
要素 |
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キーワード | RNA BINDING PROTEIN/RNA/DNA / Fanzor / Eukaryotic / RNA-guided / nuclease / Gene editing / RNA BINDING PROTEIN-RNA-DNA complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 detection of maltose stimulus / maltose transport complex / maltose binding / carbohydrate transport / maltose transport / maltodextrin transmembrane transport / carbohydrate transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex, substrate-binding subunit-containing / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / cell chemotaxis ...detection of maltose stimulus / maltose transport complex / maltose binding / carbohydrate transport / maltose transport / maltodextrin transmembrane transport / carbohydrate transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex, substrate-binding subunit-containing / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / cell chemotaxis / outer membrane-bounded periplasmic space / periplasmic space / DNA damage response / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) Guillardia theta (クリプト藻(ヌクレオモルフ)) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Xu, P. / Saito, M. / Zhang, F. | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2024 タイトル: Structural insights into the diversity and DNA cleavage mechanism of Fanzor. 著者: Peiyu Xu / Makoto Saito / Guilhem Faure / Samantha Maguire / Samuel Chau-Duy-Tam Vo / Max E Wilkinson / Huihui Kuang / Bing Wang / William J Rice / Rhiannon K Macrae / Feng Zhang / 要旨: Fanzor (Fz) is an ωRNA-guided endonuclease extensively found throughout the eukaryotic domain with unique gene editing potential. Here, we describe the structures of Fzs from three different ...Fanzor (Fz) is an ωRNA-guided endonuclease extensively found throughout the eukaryotic domain with unique gene editing potential. Here, we describe the structures of Fzs from three different organisms. We find that Fzs share a common ωRNA interaction interface, regardless of the length of the ωRNA, which varies considerably across species. The analysis also reveals Fz's mode of DNA recognition and unwinding capabilities as well as the presence of a non-canonical catalytic site. The structures demonstrate how protein conformations of Fz shift to allow the binding of double-stranded DNA to the active site within the R-loop. Mechanistically, examination of structures in different states shows that the conformation of the lid loop on the RuvC domain is controlled by the formation of the guide/DNA heteroduplex, regulating the activation of nuclease and DNA double-stranded displacement at the single cleavage site. Our findings clarify the mechanism of Fz, establishing a foundation for engineering efforts. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 9cer.cif.gz | 360.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb9cer.ent.gz | 233.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 9cer.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 9cer_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 9cer_full_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 9cer_validation.xml.gz | 33.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 9cer_validation.cif.gz | 47.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ce/9cer ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ce/9cer | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 45516MC 9cesC 9cetC 9ceuC 9cevC 9cewC 9cexC 9ceyC 9cezC 9cf0C 9cf1C 9cf2C 9cf3C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 124818.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌), (組換発現) Guillardia theta (クリプト藻(ヌクレオモルフ)) 遺伝子: malE, b4034, JW3994, GUITHDRAFT_101477 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P0AEX9, UniProt: L1JXG4 |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 49948.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Guillardia theta (クリプト藻(ヌクレオモルフ)) 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
#3: 化合物 | ChemComp-ZN / |
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: GtFz-omegaRNA complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Guillardia theta (クリプト藻(ヌクレオモルフ)) |
由来(組換発現) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2600 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 51.41 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.21_5207 / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 10507 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 278.38 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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