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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9c0i | ||||||
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タイトル | Structure of the DRT2 reverse transcriptase in complex with its non-coding RNA | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSFERASE/DNA/RNA / reverse transcriptase / rolling circle amplification / phage defense / TRANSFERASE-DNA-RNA complex | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Klebsiella pneumoniae (肺炎桿菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.91 Å | ||||||
データ登録者 | Wilkinson, M.E. / Zhang, F. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Science / 年: 2024 タイトル: Phage-triggered reverse transcription assembles a toxic repetitive gene from a noncoding RNA. 著者: Max E Wilkinson / David Li / Alex Gao / Rhiannon K Macrae / Feng Zhang / 要旨: Reverse transcription has frequently been co-opted for cellular functions and in prokaryotes is associated with protection against viral infection, but the underlying mechanisms of defense are ...Reverse transcription has frequently been co-opted for cellular functions and in prokaryotes is associated with protection against viral infection, but the underlying mechanisms of defense are generally unknown. Here, we show that in the DRT2 defense system, the reverse transcriptase binds a neighboring pseudoknotted noncoding RNA. Upon bacteriophage infection, a template region of this RNA is reverse transcribed into an array of tandem repeats that reconstitute a promoter and open reading frame, allowing expression of a toxic repetitive protein and an abortive infection response. Biochemical reconstitution of this activity and cryo-electron microscopy provide a molecular basis for repeat synthesis. Gene synthesis from a noncoding RNA is a previously unknown mode of genetic regulation in prokaryotes. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 9c0i.cif.gz | 211.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb9c0i.ent.gz | 154.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 9c0i.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 9c0i_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 9c0i_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 9c0i_validation.xml.gz | 29.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 9c0i_validation.cif.gz | 45.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/c0/9c0i ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/c0/9c0i | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 45085MC 9c0jC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 49788.645 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Klebsiella pneumoniae (肺炎桿菌) / 遺伝子: QIG75_19540 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0AA43TDM1 |
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#2: DNA鎖 | 分子量: 1519.048 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Klebsiella pneumoniae (肺炎桿菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) |
#3: RNA鎖 | 分子量: 90951.438 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Klebsiella pneumoniae (肺炎桿菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 979528538 |
#4: 化合物 | ChemComp-MG / |
#5: 化合物 | ChemComp-K / |
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: DRT2 reverse transcriptase ribonucleoprotein complex タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.14 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Klebsiella pneumoniae (肺炎桿菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2300 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 900 nm |
撮影 | 電子線照射量: 40.7 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 28211 |
-解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 4 / カテゴリ: 3次元再構成 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 4628424 | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.91 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 230001 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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