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- PDB-9bii: Mycobacterium tuberculosis EFPA antiparallel dimer -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9bii
タイトルMycobacterium tuberculosis EFPA antiparallel dimer
要素Uncharacterized MFS-type transporter EfpA
キーワードMEMBRANE PROTEIN / transporter
機能・相同性
機能・相同性情報


transmembrane transporter activity / membrane / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Major facilitator superfamily / Major Facilitator Superfamily / Major facilitator superfamily domain / Major facilitator superfamily (MFS) profile. / MFS transporter superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
: / CHOLESTEROL HEMISUCCINATE / Uncharacterized MFS-type transporter EfpA
類似検索 - 構成要素
生物種Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.7 Å
データ登録者Khandelwal, N.K. / Gupta, M. / Stroud, R.M.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM024485 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2025
タイトル: Structure and inhibition mechanisms of Mycobacterium tuberculosis essential transporter efflux protein A.
著者: Nitesh Kumar Khandelwal / Meghna Gupta / James E Gomez / Sulyman Barkho / Ziqiang Guan / Ashley Y Eng / Tomohiko Kawate / Sree Ganesh Balasubramani / Andrej Sali / Deborah T Hung / Robert M Stroud /
要旨: A broad chemical genetic screen in Mycobacterium tuberculosis (Mtb) identified compounds (BRD-8000.3 and BRD-9327) that inhibit the essential efflux pump EfpA. To understand the mechanisms of ...A broad chemical genetic screen in Mycobacterium tuberculosis (Mtb) identified compounds (BRD-8000.3 and BRD-9327) that inhibit the essential efflux pump EfpA. To understand the mechanisms of inhibition, we determined the structures of EfpA with these inhibitors bound at 2.7-3.4 Å resolution. Our structures reveal different mechanisms of inhibition by the two inhibitors. BRD-8000.3 binds in a tunnel contacting the lipid bilayer and extending toward the central cavity to displace the fatty acid chain of a lipid molecule bound in the apo structure, suggesting its blocking of an access route for a natural lipidic substrate. Meanwhile, BRD-9327 binds in the outer vestibule without complete blockade of the substrate path to the outside, suggesting its possible inhibition of the movement necessary for alternate access of the transporter. Our results show EfpA as a potential lipid transporter, explain the basis of the synergy of these inhibitors and their potential for combination anti-tuberculosis therapy.
履歴
登録2024年4月23日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02025年2月5日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月5日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月5日Data content type: Additional map / Data content type: Additional map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月5日Data content type: FSC / Data content type: FSC / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月5日Data content type: Half map / Part number: 1 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月5日Data content type: Half map / Part number: 2 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月5日Data content type: Image / Data content type: Image / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月5日Data content type: Mask / Data content type: Mask / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月5日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年5月28日Group: Data collection / カテゴリ: em_admin / em_software / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name
改定 1.12025年5月28日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Data processing / Experimental summary / Data content type: EM metadata / EM metadata / カテゴリ: em_admin / em_software / Data content type: EM metadata / EM metadata / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name
改定 1.22025年8月27日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / citation_author / em_admin
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Uncharacterized MFS-type transporter EfpA
B: Uncharacterized MFS-type transporter EfpA
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)138,68410
ポリマ－133,2042
非ポリマー5,4808
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1

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要素

#1: タンパク質 Uncharacterized MFS-type transporter EfpA / Efflux protein A


分子量: 66602.242 Da / 分子数: 2 / 変異: P171R / 由来タイプ: 組換発現
詳細: Amino acid 1-4 start codon and GSSG linker, Amnio acid 5- 12 Flag tag, Amnio acid 13-15 SGS linker, Amino acid 16-21 thrombin site, Amino acid 22-128 BRIL-Tag, Amino acid 129-610 ...詳細: Amino acid 1-4 start codon and GSSG linker, Amnio acid 5- 12 Flag tag, Amnio acid 13-15 SGS linker, Amino acid 16-21 thrombin site, Amino acid 22-128 BRIL-Tag, Amino acid 129-610 Mycobacterium tuberculosis EfpA (truncated from 48 N terminal amino acid) with mutation of Proline at position 171 to Arginine, Amino acid 611-612 SS linker, Amino acid 613-619 TEV site, Amino acid 620-629 10XHis.
由来: (組換発現) Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌)
遺伝子: efpA, Rv2846c / 発現宿主: Escherichia coli BL21 (大腸菌) / 参照: UniProt: P9WJY5
#2: 化合物
ChemComp-A1H2V / [(2~{R})-3-[[(2~{R})-2,3-bis(oxidanyl)propoxy]-oxidanyl-phosphoryl]oxy-2-hexadecanoyloxy-propyl] octadecanoate / (2R,3S,4R,5R,6R)-6-((1R,2R,3S,4R,6S)-4,6-DIAMINO-2,3-DIHYDROXYCYCLOHEXYLOXY)-5-AMINO-2-(AMINOMETHYL)-TETRAHYDRO-2H-PYRA N-3,4-DIOL / NEOMYCIN A / NEAMINE / (1R,2R,3S,4R,6S)-4,6-diamino-2,3-dihydroxycyclohexyl 2,6-diamino-2,6-dideoxy-alpha-D-glucoside / (1R,2R,3S,4R,6S)-4,6-diamino-2,3-dihydroxycyclohexyl 2,6-diamino-2,6-dideoxy-D-glucoside / (1R,2R,3S,4R,6S)-4,6-diamino-2,3-dihydroxycyclohexyl 2,6-diamino-2,6-dideoxy-glucoside


分子量: 751.023 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 合成 / 式: C40H79O10P
#3: 化合物 ChemComp-Y01 / CHOLESTEROL HEMISUCCINATE / コレステリルヘミスクシナ-ト


分子量: 486.726 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: C31H50O4 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: EfpA / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 0.06653956 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Mycobacterium tuberculosis (結核菌) / 株: H37Rv
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 株: BL21
緩衝液pH: 7.5 / 詳細: 50mM Tris-HCL, 300 mM NaCL, 0.02% GDN, 0.002 %CHS
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
1300 mMSodium chlorideNaCl1
250 mMTrisTris1
試料濃度: 16.16 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持詳細: 30 second hold 30 second glow / グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 281.15 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: OTHER / 最大 デフォーカス（公称値）: 2000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
撮影電子線照射量: 45 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 16938

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1cryoSPARCv4.2.1粒子像選択
2SerialEMv4.1 beta software画像取得
4cryoSPARCv4.2.1CTF補正
9PHENIXモデル精密化
11cryoSPARCv4.2.1最終オイラー角割当
12cryoSPARCv4.2.1分類
13cryoSPARCv4.2.1３次元再構成
CTF補正タイプ: NONE
粒子像の選択選択した粒子像数: 10225285
3次元再構成解像度: 2.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 256203 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: AB INITIO MODEL
原子モデル構築Source name: AlphaFold / タイプ: in silico model

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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