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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8xuq | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of tomato NRC2 tetramer | ||||||
要素 | NRC2 | ||||||
キーワード | PLANT PROTEIN / tomato / helper NLR / tetramer | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Solanum lycopersicum (トマト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.17 Å | ||||||
データ登録者 | Sun, Y. / Ma, S.C. / Chai, J.J. | ||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2024 タイトル: Oligomerization-mediated autoinhibition and cofactor binding of a plant NLR. 著者: Shoucai Ma / Chunpeng An / Aaron W Lawson / Yu Cao / Yue Sun / Eddie Yong Jun Tan / Jinheng Pan / Jan Jirschitzka / Florian Kümmel / Nitika Mukhi / Zhifu Han / Shan Feng / Bin Wu / Paul ...著者: Shoucai Ma / Chunpeng An / Aaron W Lawson / Yu Cao / Yue Sun / Eddie Yong Jun Tan / Jinheng Pan / Jan Jirschitzka / Florian Kümmel / Nitika Mukhi / Zhifu Han / Shan Feng / Bin Wu / Paul Schulze-Lefert / Jijie Chai / 要旨: Nucleotide-binding leucine-rich repeat (NLR) proteins play a pivotal role in plant immunity by recognizing pathogen effectors. Maintaining a balanced immune response is crucial, as excessive NLR ...Nucleotide-binding leucine-rich repeat (NLR) proteins play a pivotal role in plant immunity by recognizing pathogen effectors. Maintaining a balanced immune response is crucial, as excessive NLR expression can lead to unintended autoimmunity. Unlike most NLRs, the plant NLR required for cell death 2 (NRC2) belongs to a small NLR group characterized by constitutively high expression without self-activation. The mechanisms underlying NRC2 autoinhibition and activation are not yet understood. Here we show that Solanum lycopersicum (tomato) NRC2 (SlNRC2) forms dimers and tetramers and higher-order oligomers at elevated concentrations. Cryo-electron microscopy shows an inactive conformation of SlNRC2 in these oligomers. Dimerization and oligomerization not only stabilize the inactive state but also sequester SlNRC2 from assembling into an active form. Mutations at the dimeric or interdimeric interfaces enhance pathogen-induced cell death and immunity in Nicotiana benthamiana. The cryo-electron microscopy structures unexpectedly show inositol hexakisphosphate (IP) or pentakisphosphate (IP) bound to the inner surface of the C-terminal leucine-rich repeat domain of SlNRC2, as confirmed by mass spectrometry. Mutations at the inositol phosphate-binding site impair inositol phosphate binding of SlNRC2 and pathogen-induced SlNRC2-mediated cell death in N. benthamiana. Our study indicates a negative regulatory mechanism of NLR activation and suggests inositol phosphates as cofactors of NRCs. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8xuq.cif.gz | 694.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8xuq.ent.gz | 571.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8xuq.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8xuq_validation.pdf.gz | 917.8 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8xuq_full_validation.pdf.gz | 973.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | 8xuq_validation.xml.gz | 74.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8xuq_validation.cif.gz | 108.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/xu/8xuq ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/xu/8xuq | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 38680MC 8xuoC 8xuvC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 101332.078 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: Sequence reference for NRC2 is not available in UniProt at the time of biocuration. Current sequence reference is from UniProt id A0A3Q7IF17. Regarding SlNRC2 with the accession number ...詳細: Sequence reference for NRC2 is not available in UniProt at the time of biocuration. Current sequence reference is from UniProt id A0A3Q7IF17. Regarding SlNRC2 with the accession number Solyc10g047320 in the SGN database, here is the link: https://solgenomics.net/locus/36701/view. The source article for SlNRC2 is "Helper NLR proteins NRC2a/b and NRC3 but not NRC1 are required for Pto-mediated cell death and resistance in Nicotiana benthamiana" by Wu, Chih-Hang et al. The article was published in The New Phytologist, volume 209, issue 4, in 2016. The DOI is 10.1111/nph.13764. 由来: (組換発現) Solanum lycopersicum (トマト) / 遺伝子: 101243750 発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: A0A3Q7IF17 #2: 化合物 | ChemComp-IHP / #3: 化合物 | ChemComp-ADP / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: NRC2 tetramer / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Solanum lycopersicum (トマト) |
由来(組換発現) | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: NONE |
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3次元再構成 | 解像度: 3.17 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 154084 / 対称性のタイプ: POINT |