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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8x6g | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of Staphylococcus aureus sigB-dependent RNAP-promoter open complex | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / RNA polymerase / Staphylococcus aureus / sigB | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding ...sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | ||||||
データ登録者 | Yuan, L. / Xu, L. / Liu, Q. / Feng, Y. | ||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Structural basis of promoter recognition by Staphylococcus aureus RNA polymerase. 著者: Linggang Yuan / Qingyang Liu / Liqiao Xu / Bing Wu / Yu Feng / 要旨: Bacterial RNAP needs to form holoenzyme with σ factors to initiate transcription. While Staphylococcus aureus σ controls housekeeping functions, S. aureus σ regulates virulence, biofilm formation, ...Bacterial RNAP needs to form holoenzyme with σ factors to initiate transcription. While Staphylococcus aureus σ controls housekeeping functions, S. aureus σ regulates virulence, biofilm formation, persistence, cell internalization, membrane transport, and antimicrobial resistance. Besides the sequence difference, the spacers between the -35 element and -10 element of σ regulated promoters are shorter than those of σ regulated promoters. Therefore, how σ recognizes and initiates transcription from target promoters can not be inferred from that of the well studied σ. Here, we report the cryo-EM structures of S. aureus RNAP-promoter open complexes comprising σ and σ, respectively. Structural analyses, in combination with biochemical experiments, reveal the structural basis for the promoter specificity of S. aureus transcription. Although the -10 element of σ regulated promoters is recognized by domain σ as single-stranded DNA, the -10 element of σ regulated promoters is co-recognized by domains σ and σ as double-stranded DNA, accounting for the short spacers of σ regulated promoters. S. aureus RNAP is a validated target of antibiotics, and our structures pave the way for rational drug design targeting S. aureus RNAP. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8x6g.cif.gz | 691.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8x6g.ent.gz | 549.1 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8x6g.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/x6/8x6g ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/x6/8x6g | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 38088MC 8x6fC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-directed RNA polymerase subunit ... , 5種, 6分子 ABCDFG
#1: タンパク質 | 分子量: 35052.656 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) 遺伝子: rpoA / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0D1GTM7 #2: タンパク質 | | 分子量: 133381.312 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) 遺伝子: rpoB / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: W8UT31 #3: タンパク質 | | 分子量: 135594.266 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) 遺伝子: rpoC / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A2C6P019 #5: タンパク質 | | 分子量: 8161.236 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) 遺伝子: rpoZ / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: W8UYF2 #6: タンパク質 | | 分子量: 8764.739 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) 遺伝子: rnpZA / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A7I0YN47 |
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-タンパク質 , 2種, 2分子 EH
#4: タンパク質 | 分子量: 20893.010 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) 遺伝子: rpoE / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A7I0YLU8 |
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#7: タンパク質 | 分子量: 29474.559 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) 遺伝子: sigB / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A390QYZ6 |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 TN
#8: DNA鎖 | 分子量: 21360.715 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) |
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#9: DNA鎖 | 分子量: 21771.047 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: sigB-dependent RNAP-promoter open complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: Staphylococcus aureus (黄色ブドウ球菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 51 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 95089 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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