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- PDB-8x1b: Cryo-EM structure of FpGalactosaminidase from Flavonifractor plau... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8x1b
タイトルCryo-EM structure of FpGalactosaminidase from Flavonifractor plautii in apo state
要素Alpha-galactosidase
キーワードHYDROLASE / Flavonifractor plautii / A to O type blood / D-(+)-Galactosamine hydrochloride
機能・相同性Melibiase / : / alpha-galactosidase / alpha-galactosidase activity / Aldolase-type TIM barrel / Glycoside hydrolase superfamily / Alpha-galactosidase
機能・相同性情報
生物種Flavonifractor plautii (バクテリア)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.59 Å
データ登録者Wu, G. / Han, P. / Su, C. / Zhou, M. / Luo, K.
資金援助1件
組織認可番号
Not funded
引用ジャーナル: Exp Hematol Oncol / : 2025
タイトル: Structural basis of FpGalNase and its combination with FpGalNAcDeAc for efficient A-to-O blood group conversion.
著者: Meiling Zhou / Kaishan Luo / Chao Su / Yan Sun / Zuyan Huang / Shuo Ma / Xun Gao / Jiwei Wang / Chen Zhang / Pengcheng Han / Guoqiu Wu /
要旨: Transfusion safety and blood typing continue to present significant challenges in clinical practice, including risks of incorrect blood transfusions and blood shortages. One promising solution is the ...Transfusion safety and blood typing continue to present significant challenges in clinical practice, including risks of incorrect blood transfusions and blood shortages. One promising solution is the enzymatic conversion of all red blood cell (RBC) types into universal O-type RBCs. However, the major obstacle to this strategy is the relatively low catalytic efficiency of the enzymes involved. In this study, we investigated two enzymes from Flavonifractor plautii, N-acetylgalactosamine deacetylase (FpGalNAcDeAc) and galactosaminidase (FpGalNase), which demonstrate synergistic activity in efficiently converting A-type RBCs to O-type. We optimized treatment conditions, achieving over 99% conversion in just five minutes using phosphate buffer saline and a 16 nM enzyme concentration. Additionally, we engineered two fusion proteins, FpGalNAcDeAc-FpGalNase and FpGalNase-FpGalNAcDeAc, which showed a 28-fold increase in catalytic efficiency compared to the enzyme mixture. Using cryo-electron microscopy, we resolved the full-length structure of FpGalNase, identifying critical active site residues involved in its catalytic mechanism. This study provides essential structural and biochemical insights for clinical applications in blood group conversion, offering a promising approach for producing universal O-type RBCs.
履歴
登録2023年11月6日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02024年11月13日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月13日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月13日Data content type: Half map / Part number: 1 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月13日Data content type: Half map / Part number: 2 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
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改定 1.02024年11月13日Data content type: Half map / Part number: 2 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月13日Data content type: Image / Data content type: Image / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月13日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年11月27日Group: Data collection / カテゴリ: em_admin / Item: _em_admin.last_update
改定 1.22025年5月28日Group: Data collection / Database references / Structure summary
カテゴリ: audit_author / citation ...audit_author / citation / citation_author / em_admin / em_author_list
Item: _audit_author.name / _citation.journal_abbrev ..._audit_author.name / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.title / _citation.year / _em_admin.last_update / _em_author_list.author
改定 1.12025年5月28日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Database references / Experimental summary
Data content type: EM metadata / EM metadata ...EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata
カテゴリ: citation / citation_author ...citation / citation_author / em_admin / em_author_list
Data content type: EM metadata / EM metadata ...EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata
Item: _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD ..._citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.title / _citation.year / _em_admin.last_update / _em_author_list.author
改定 1.32025年6月4日Group: Data collection / Database references / Structure summary
カテゴリ: audit_author / citation ...audit_author / citation / em_admin / em_author_list
Item: _audit_author.name / _citation.page_last ..._audit_author.name / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _em_admin.last_update / _em_author_list.author

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Alpha-galactosidase


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)72,5151
ポリマ-72,5151
非ポリマー00
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration, not applicable
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 Alpha-galactosidase / FpGalactosaminidase


分子量: 72515.055 Da / 分子数: 1 / 変異: P566L / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Flavonifractor plautii (バクテリア)
遺伝子: ERS852411_00574 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3) / 参照: UniProt: A0A174W4Y6
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: FpGalactosaminidase / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT
由来(天然)生物種: Flavonifractor plautii (バクテリア)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
緩衝液pH: 7.4
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm
撮影電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 2.59 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 673717 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0035241
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.5217143
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d4.052724
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.045753
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.005941

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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