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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8vhk | |||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | NPM2-H1.8 isolated from Xenopus egg extract (Stretched form) | |||||||||||||||||||||||||||
![]() | Nucleoplasmin isoform X1 | |||||||||||||||||||||||||||
![]() | CHAPERONE / H1 / Xenopus egg extract / MagIC-cryo-EM / Histone chaperone | |||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() single fertilization / positive regulation of DNA replication / histone binding / chromatin remodeling / chromatin binding / nucleolus / RNA binding / nucleoplasm / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.16 Å | |||||||||||||||||||||||||||
![]() | Arimura, Y. / Funabiki, H. | |||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: MagIC-Cryo-EM, structural determination on magnetic beads for scarce macromolecules in heterogeneous samples. 著者: Yasuhiro Arimura / Hide A Konishi / Hironori Funabiki / ![]() 要旨: Cryo-EM single-particle analyses typically require target macromolecule concentration at 0.05~5.0 mg/ml, which is often difficult to achieve. Here, we devise netic solation and oncentration (MagIC)- ...Cryo-EM single-particle analyses typically require target macromolecule concentration at 0.05~5.0 mg/ml, which is often difficult to achieve. Here, we devise netic solation and oncentration (MagIC)-cryo-EM, a technique enabling direct structural analysis of targets captured on magnetic beads, thereby reducing the targets' concentration requirement to <0.0005 mg/mL. Adapting MagIC-cryo-EM to a Chromatin Immunoprecipitation protocol, we characterized structural variations of the linker histone H1.8-associated nucleosomes that were isolated from interphase and metaphase chromosomes in egg extract. Combining plicated election o xclude ubbish particles (DuSTER), a particle curation method that excludes low signal-to-noise ratio particles, we also resolved the 3D cryo-EM structures of nucleoplasmin NPM2 co-isolated with the linker histone H1.8 and revealed distinct open and closed structural variants. Our study demonstrates the utility of MagIC-cryo-EM for structural analysis of scarce macromolecules in heterogeneous samples and provides structural insights into the cell cycle-regulation of H1.8 association to nucleosomes. #1: ![]() タイトル: MagIC-Cryo-EM: Structural determination on magnetic beads for scarce macromolecules in heterogeneous samples 著者: Arimura, Y. / Konishi, H.A. / Funabiki, H. | |||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 109.2 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 82.3 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 43240MC ![]() 8vhiC ![]() 8vhjC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 21949.467 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: A0A1L8H245 Has protein modification | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: CELL / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: NPM2 complexed with H1.8 / タイプ: CELL / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 10mM HEPES-KOH (pH 7.4), 30 mM KCl, 1 mM EGTA, 10 ng/microL leupeptin, 10 ng/microL pepstatin, 10 ng/microL chymostatin, 1 mM sodium butyrate, 1 mM beta-glycerophosphate, trehalose, and 1,6-hexanediol |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company | ||||||||||||
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS | ||||||||||||
電子銃 | 電子線源: ![]() | ||||||||||||
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm | ||||||||||||
撮影 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 5.16 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 26477 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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