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- PDB-8t2r: Structure of a group II intron ribonucleoprotein in the pre-ligat... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8t2r
タイトルStructure of a group II intron ribonucleoprotein in the pre-ligation (pre-2F) state
要素
  • 5'exon
  • Group II intron reverse transcriptase/maturase
  • Intron
キーワードTransferase/RNA / RNP / RNA / Transferase-RNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


RNA-directed DNA polymerase / RNA-directed DNA polymerase activity
類似検索 - 分子機能
Group II intron, maturase-specific / Group II intron reverse transcriptase/maturase / Group II intron, maturase-specific domain / : / Reverse transcriptase (RNA-dependent DNA polymerase) / Reverse transcriptase domain / Reverse transcriptase (RT) catalytic domain profile. / DNA/RNA polymerase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
AMMONIUM ION / RNA / RNA (> 10) / RNA (> 100) / Group II intron reverse transcriptase/maturase
類似検索 - 構成要素
生物種[Eubacterium] rectale (バクテリア)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å
データ登録者Xu, L. / Liu, T. / Chung, K. / Pyle, A.M.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
引用ジャーナル: Nature / : 2023
タイトル: Structural insights into intron catalysis and dynamics during splicing.
著者: Ling Xu / Tianshuo Liu / Kevin Chung / Anna Marie Pyle /
要旨: The group II intron ribonucleoprotein is an archetypal splicing system with numerous mechanistic parallels to the spliceosome, including excision of lariat introns. Despite the importance of ...The group II intron ribonucleoprotein is an archetypal splicing system with numerous mechanistic parallels to the spliceosome, including excision of lariat introns. Despite the importance of branching in RNA metabolism, structural understanding of this process has remained elusive. Here we present a comprehensive analysis of three single-particle cryogenic electron microscopy structures captured along the splicing pathway. They reveal the network of molecular interactions that specifies the branchpoint adenosine and positions key functional groups to catalyse lariat formation and coordinate exon ligation. The structures also reveal conformational rearrangements of the branch helix and the mechanism of splice site exchange that facilitate the transition from branching to ligation. These findings shed light on the evolution of splicing and highlight the conservation of structural components, catalytic mechanism and dynamical strategies retained through time in premessenger RNA splicing machines.
履歴
登録2023年6月6日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02023年11月22日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12023年12月6日Group: Database references / カテゴリ: citation / Item: _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title
改定 1.22024年1月3日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last

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構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
D: Group II intron reverse transcriptase/maturase
A: 5'exon
B: Intron
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)260,13418
ポリマ-259,5773
非ポリマー55715
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 Group II intron reverse transcriptase/maturase / Group II intron-encoded protein ltrA


分子量: 49083.914 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) [Eubacterium] rectale (バクテリア)
遺伝子: ltrA_2, ltrA, ERS852417_00966, FYL37_05080 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A173ZME3, RNA-directed DNA polymerase
#2: RNA鎖 5'exon


分子量: 2097.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) [Eubacterium] rectale (バクテリア)
発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
#3: RNA鎖 Intron


分子量: 208395.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) [Eubacterium] rectale (バクテリア)
発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
#4: 化合物
ChemComp-CA / CALCIUM ION / カルシウムジカチオン


分子量: 40.078 Da / 分子数: 13 / 由来タイプ: 合成 / : Ca / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#5: 化合物 ChemComp-NH4 / AMMONIUM ION / アンモニウム


分子量: 18.038 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : H4N / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Intron RNP complex in pre-2f / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT
分子量: 0.3 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: [Eubacterium] rectale (バクテリア)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: DARK FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm
撮影電子線照射量: 1.5 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: NONE
3次元再構成解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 234625 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00616534
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.94825072
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d18.3547043
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0453232
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0071111

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlc1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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