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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8qv2 | ||||||||||||
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タイトル | Structure of the native y-Tubulin Ring Complex (yTuRC) capping microtubule minus ends at the spindle pole body | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | CELL CYCLE / Microtubule nucleation / MTOC / y-tubulin / SPB | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 nuclear migration by microtubule mediated pushing forces / microtubule minus-end binding / nuclear division / mitotic spindle pole body / equatorial microtubule organizing center / nuclear migration along microtubule / homologous chromosome segregation / Platelet degranulation / meiotic spindle organization / gamma-tubulin complex ...nuclear migration by microtubule mediated pushing forces / microtubule minus-end binding / nuclear division / mitotic spindle pole body / equatorial microtubule organizing center / nuclear migration along microtubule / homologous chromosome segregation / Platelet degranulation / meiotic spindle organization / gamma-tubulin complex / microtubule nucleation / gamma-tubulin binding / spindle pole body / tubulin complex / mitotic sister chromatid segregation / spindle assembly / cytoplasmic microtubule organization / nuclear periphery / mitotic spindle organization / meiotic cell cycle / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / spindle pole / spindle / mitotic cell cycle / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / microtubule / hydrolase activity / GTPase activity / GTP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.2 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Dendooven, T. / Yatskevich, S. / Burt, A. / Bellini, D. / Kilmartin, J. / Barford, D. | ||||||||||||
資金援助 | 英国, ドイツ, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2024 タイトル: Structure of the native γ-tubulin ring complex capping spindle microtubules. 著者: Tom Dendooven / Stanislau Yatskevich / Alister Burt / Zhuo A Chen / Dom Bellini / Juri Rappsilber / John V Kilmartin / David Barford / 要旨: Microtubule (MT) filaments, composed of α/β-tubulin dimers, are fundamental to cellular architecture, function and organismal development. They are nucleated from MT organizing centers by the ...Microtubule (MT) filaments, composed of α/β-tubulin dimers, are fundamental to cellular architecture, function and organismal development. They are nucleated from MT organizing centers by the evolutionarily conserved γ-tubulin ring complex (γTuRC). However, the molecular mechanism of nucleation remains elusive. Here we used cryo-electron tomography to determine the structure of the native γTuRC capping the minus end of a MT in the context of enriched budding yeast spindles. In our structure, γTuRC presents a ring of γ-tubulin subunits to seed nucleation of exclusively 13-protofilament MTs, adopting an active closed conformation to function as a perfect geometric template for MT nucleation. Our cryo-electron tomography reconstruction revealed that a coiled-coil protein staples the first row of α/β-tubulin of the MT to alternating positions along the γ-tubulin ring of γTuRC. This positioning of α/β-tubulin onto γTuRC suggests a role for the coiled-coil protein in augmenting γTuRC-mediated MT nucleation. Based on our results, we describe a molecular model for budding yeast γTuRC activation and MT nucleation. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8qv2.cif.gz | 5.5 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8qv2.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8qv2.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8qv2_validation.pdf.gz | 2.7 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8qv2_full_validation.pdf.gz | 2.8 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8qv2_validation.xml.gz | 633.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8qv2_validation.cif.gz | 1 MB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qv/8qv2 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qv/8qv2 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 4種, 62分子 bcdefghijklmnaAdAcAfAeAhAgAjAiAlAkAnAmAbApAoAr...
#1: タンパク質 | 分子量: 52671.188 Da / 分子数: 14 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: A0A8H4BZN3 #4: タンパク質 | 分子量: 49853.867 Da / 分子数: 17 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: P09733 #5: タンパク質 | 分子量: 50967.457 Da / 分子数: 17 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: A0A6A5PXT5 #7: タンパク質 | 分子量: 5720.042 Da / 分子数: 14 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
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-Spindle pole body ... , 3種, 28分子 CEGIKMODFHJLNPScSdSeSfSgShSiSjSkSlSaSbSmSn
#2: タンパク質 | 分子量: 96940.594 Da / 分子数: 7 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: A0A8H4C290 #3: タンパク質 | 分子量: 98336.211 Da / 分子数: 7 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: A0A8H4BVY6 #6: タンパク質 | 分子量: 111987.125 Da / 分子数: 14 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: A0A8H8UNQ3 |
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-非ポリマー , 3種, 21分子
#8: 化合物 | ChemComp-GTP / #9: 化合物 | ChemComp-GDP / | #10: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: サブトモグラム平均法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: y-Tubulin Ring Complex capping the microtubule minus end タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: #1-#7 / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 6.53 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 4500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 2000 nm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
撮影 | 電子線照射量: 3 e/Å2 / Avg electron dose per subtomogram: 123 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.17.1_3660: / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 9.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 7910 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
EM volume selection | Num. of tomograms: 364 / Num. of volumes extracted: 31720 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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