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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8qo9 | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of a human spliceosomal B complex protomer | ||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / spliceosome | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 DNA topoisomerase binding / microfibril / Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / protein kinase B binding / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA ...DNA topoisomerase binding / microfibril / Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / protein kinase B binding / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / Lsm1-7-Pat1 complex / U6 snRNP / box C/D sno(s)RNA binding / U11/U12 snRNP / PH domain binding / dense fibrillar component / U2 snRNP binding / alternative mRNA splicing, via spliceosome / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / B-WICH complex / histone pre-mRNA 3'end processing complex / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / mRNA splice site recognition / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / box C/D methylation guide snoRNP complex / splicing factor binding / protein methylation / U4/U6 snRNP / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / U12-type spliceosomal complex / methylosome / 7-methylguanosine cap hypermethylation / positive regulation of androgen receptor activity / transcription elongation factor activity / protein localization to kinetochore / U1 snRNP binding / pICln-Sm protein complex / P-body assembly / mRNA 3'-end processing / blastocyst formation / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / snRNP binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / RNA splicing, via transesterification reactions / small nuclear ribonucleoprotein complex / U4 snRNA binding / SMN-Sm protein complex / telomerase RNA binding / spliceosomal tri-snRNP complex / telomerase holoenzyme complex / P granule / U2-type spliceosomal complex / U2-type precatalytic spliceosome / mRNA cis splicing, via spliceosome / proline-rich region binding / U3 snoRNA binding / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / U2-type catalytic step 2 spliceosome / RNA polymerase binding / box C/D snoRNP assembly / ubiquitin-like protein conjugating enzyme binding / U4 snRNP / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / U2 snRNP / SAGA complex / rRNA modification in the nucleus and cytosol / RNA Polymerase II Transcription Termination / positive regulation of transcription by RNA polymerase III / U1 snRNP / positive regulation of protein targeting to mitochondrion / U2-type prespliceosome / tRNA processing / regulation of alternative mRNA splicing, via spliceosome / precatalytic spliceosome / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / cyclosporin A binding / positive regulation of transcription by RNA polymerase I / mitotic spindle assembly checkpoint signaling / mRNA Splicing - Minor Pathway / spliceosomal complex assembly / negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / oligodendrocyte differentiation / mRNA catabolic process / regulation of RNA splicing / mRNA 5'-splice site recognition / protein peptidyl-prolyl isomerization / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / mRNA 3'-splice site recognition / MLL1 complex / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / single fertilization 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.29 Å | ||||||
データ登録者 | Zhang, Z. / Kumar, V. / Dybkov, O. / Will, C.L. / Urlaub, H. / Stark, H. / Luehrmann, R. | ||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2024 タイトル: Cryo-EM analyses of dimerized spliceosomes provide new insights into the functions of B complex proteins. 著者: Zhenwei Zhang / Vinay Kumar / Olexandr Dybkov / Cindy L Will / Henning Urlaub / Holger Stark / Reinhard Lührmann / 要旨: The B complex is a key intermediate stage of spliceosome assembly. To improve the structural resolution of monomeric, human spliceosomal B (hB) complexes and thereby generate a more comprehensive hB ...The B complex is a key intermediate stage of spliceosome assembly. To improve the structural resolution of monomeric, human spliceosomal B (hB) complexes and thereby generate a more comprehensive hB molecular model, we determined the cryo-EM structure of B complex dimers formed in the presence of ATP S. The enhanced resolution of these complexes allows a finer molecular dissection of how the 5' splice site (5'ss) is recognized in hB, and new insights into molecular interactions of FBP21, SNU23 and PRP38 with the U6/5'ss helix and with each other. It also reveals that SMU1 and RED are present as a heterotetrameric complex and are located at the interface of the B dimer protomers. We further show that MFAP1 and UBL5 form a 5' exon binding channel in hB, and elucidate the molecular contacts stabilizing the 5' exon at this stage. Our studies thus yield more accurate models of protein and RNA components of hB complexes. They further allow the localization of additional proteins and protein domains (such as SF3B6, BUD31 and TCERG1) whose position was not previously known, thereby uncovering new functions for B-specific and other hB proteins during pre-mRNA splicing. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8qo9.cif.gz | 2.7 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8qo9.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8qo9.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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-検証レポート
文書・要旨 | 8qo9_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8qo9_full_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8qo9_validation.xml.gz | 292.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8qo9_validation.cif.gz | 527 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qo/8qo9 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qo/8qo9 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 18529MC 8q7nC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-Splicing factor 3B subunit ... , 6種, 6分子 B4B2B5B3B1B6
#1: タンパク質 | 分子量: 44436.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15427 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 100377.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q13435 |
#5: タンパク質 | 分子量: 10149.369 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BWJ5 |
#7: タンパク質 | 分子量: 135718.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15393 |
#9: タンパク質 | 分子量: 146024.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75533 |
#10: タンパク質 | 分子量: 14606.900 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y3B4 |
-Splicing factor 3A subunit ... , 3種, 5分子 8G9H7
#2: タンパク質 | 分子量: 49327.355 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15428 #3: タンパク質 | 分子量: 58934.844 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q12874 #27: タンパク質 | | 分子量: 88991.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15459 |
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-RNA鎖 , 5種, 5分子 25Z46
#6: RNA鎖 | 分子量: 60170.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36516 |
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#34: RNA鎖 | 分子量: 37254.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 20330981 |
#39: RNA鎖 | 分子量: 111300.453 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
#49: RNA鎖 | 分子量: 46181.289 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 340142 |
#50: RNA鎖 | 分子量: 34098.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: NR_004394.1 |
-タンパク質 , 19種, 23分子 BP5b2b4bxyvwzWQDXKNAISCMTrs
#8: タンパク質 | 分子量: 12427.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q7RTV0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
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#18: タンパク質 | 分子量: 24642.131 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P14678 #30: タンパク質 | 分子量: 65731.508 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q13123 #31: タンパク質 | 分子量: 57616.742 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q2TAY7 #32: タンパク質 | | 分子量: 27798.752 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q07955 #33: タンパク質 | | 分子量: 19230.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43447, peptidylprolyl isomerase #35: タンパク質 | | 分子量: 17032.850 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P41223 #36: タンパク質 | | 分子量: 16807.346 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P83876 #37: タンパク質 | | 分子量: 42575.801 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75554 #38: タンパク質 | | 分子量: 52050.527 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P55081 #42: タンパク質 | | 分子量: 107092.242 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O94906 #43: タンパク質 | | 分子量: 273974.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q6P2Q9 #44: タンパク質 | | 分子量: 37563.863 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8NAV1 #45: タンパク質 | | 分子量: 90414.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43290 #46: タンパク質 | | 分子量: 109560.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15029 #47: タンパク質 | | 分子量: 14191.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P55769 #48: タンパク質 | | 分子量: 124083.000 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O14776 #51: タンパク質 | | 分子量: 23664.047 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96NC0 #53: タンパク質 | | 分子量: 8560.945 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BZL1 |
-U6 snRNA-associated Sm-like protein ... , 7種, 7分子 62636465666768
#11: タンパク質 | 分子量: 10847.495 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y333 |
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#12: タンパク質 | 分子量: 11859.390 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62310 |
#13: タンパク質 | 分子量: 15375.775 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y4Z0 |
#14: タンパク質 | 分子量: 9945.448 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y4Y9 |
#15: タンパク質 | 分子量: 9139.571 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62312 |
#16: タンパク質 | 分子量: 11617.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UK45 |
#17: タンパク質 | 分子量: 10410.589 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O95777 |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 18分子 5121415222425f2f4f5e2e4e5g2g4g532343
#19: タンパク質 | 分子量: 13310.653 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62314 #20: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62316 #21: タンパク質 | 分子量: 9734.171 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62306 #22: タンパク質 | 分子量: 10817.601 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62304 #23: タンパク質 | 分子量: 8508.084 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62308 #24: タンパク質 | 分子量: 13940.308 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62318 |
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-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 2B2A
#25: タンパク質 | 分子量: 25524.367 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P08579 |
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#26: タンパク質 | 分子量: 28456.584 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P09661 |
-U5 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 EB
#28: タンパク質 | 分子量: 39359.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96DI7 |
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#29: タンパク質 | 分子量: 244823.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75643, RNA helicase |
-U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein ... , 3種, 3分子 LFJ
#40: タンパク質 | 分子量: 55528.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8WWY3 |
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#41: タンパク質 | 分子量: 58536.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43172 |
#52: タンパク質 | 分子量: 77669.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43395 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: human spliceosomal B complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
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3次元再構成 | 解像度: 5.29 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 50321 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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