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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8p4x | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | FAD_ox bound dark state structure of PdLCry | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 | Putative light-receptive cryptochrome (Fragment) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
キーワード | FLAVOPROTEIN / light-sensitive / circalunar clock | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報entrainment of circadian clock by photoperiod / FAD binding / circadian regulation of gene expression / negative regulation of DNA-templated transcription / perinuclear region of cytoplasm / DNA binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | Platynereis dumerilii (無脊椎動物) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.57 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Behrmann, E. / Behrmann, H. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | ドイツ, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023タイトル: A marine cryptochrome with an inverse photo-oligomerization mechanism. 著者: Hong Ha Vu / Heide Behrmann / Maja Hanić / Gayathri Jeyasankar / Shruthi Krishnan / Dennis Dannecker / Constantin Hammer / Monika Gunkel / Ilia A Solov'yov / Eva Wolf / Elmar Behrmann / ![]() 要旨: Cryptochromes (CRYs) are a structurally conserved but functionally diverse family of proteins that can confer unique sensory properties to organisms. In the marine bristle worm Platynereis dumerilii, ...Cryptochromes (CRYs) are a structurally conserved but functionally diverse family of proteins that can confer unique sensory properties to organisms. In the marine bristle worm Platynereis dumerilii, its light receptive cryptochrome L-CRY (PdLCry) allows the animal to discriminate between sunlight and moonlight, an important requirement for synchronizing its lunar cycle-dependent mass spawning. Using cryo-electron microscopy, we show that in the dark, PdLCry adopts a dimer arrangement observed neither in plant nor insect CRYs. Intense illumination disassembles the dimer into monomers. Structural and functional data suggest a mechanistic coupling between the light-sensing flavin adenine dinucleotide chromophore, the dimer interface, and the C-terminal tail helix, with a likely involvement of the phosphate binding loop. Taken together, our work establishes PdLCry as a CRY protein with inverse photo-oligomerization with respect to plant CRYs, and provides molecular insights into how this protein might help discriminating the different light intensities associated with sunlight and moonlight. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8p4x.cif.gz | 223.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8p4x.ent.gz | 177.1 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8p4x.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 8p4x_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 8p4x_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 8p4x_validation.xml.gz | 45.3 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 8p4x_validation.cif.gz | 66.5 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/p4/8p4x ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/p4/8p4x | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 17429MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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| 非結晶学的対称性 (NCS) | NCSドメイン:
NCSドメイン領域: Ens-ID: ens_1
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 65482.855 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Platynereis dumerilii (無脊椎動物)プラスミド: pCoofy27 / 細胞株 (発現宿主): Sf9 発現宿主: ![]() 参照: UniProt: G8Z9G7 #2: 化合物 | #3: 化合物 | #4: 水 | ChemComp-HOH / | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | Has protein modification | N | |
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-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: dimeric complex of PdLCry in the dark state / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT | |||||||||||||||||||||||||
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| 分子量 | 値: 0.13 MDa / 実験値: YES | |||||||||||||||||||||||||
| 由来(天然) | 生物種: Platynereis dumerilii (無脊椎動物) | |||||||||||||||||||||||||
| 由来(組換発現) | 生物種: ![]() 株: Sf9 | |||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液 | pH: 8 | |||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液成分 |
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| 試料 | 濃度: 0.7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: grids were prepared under far-red light illumination (Osram OSLON SSL 120, GF CSSPM1.24) | |||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: UltrAuFoil R1.2/1.3 | |||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 293.15 K 詳細: grids were prepared under far-red light illumination |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 96000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 300 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: COMA FREE |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 電子線照射量: 30 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 詳細: see material+methods |
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解析
| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 詳細: see supplementary table and materials+methods | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C2 (2回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.57 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 424744 / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | 詳細: starting model was based on 4jzy / Source name: Other / タイプ: integrative model | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 22.58 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
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| Refine LS restraints NCS | タイプ: NCS constraints / Rms dev position: 2.57425599462E-13 Å |
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Platynereis dumerilii (無脊椎動物)
ドイツ, 4件
引用

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FIELD EMISSION GUN