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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8olt | |||||||||
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タイトル | Mitochondrial complex I from Mus musculus in the active state bound with piericidin A | |||||||||
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![]() | OXIDOREDUCTASE / Mitochondrial complex I / Respiratory complex I / NADH:ubiquinone oxidoreductase | |||||||||
機能・相同性 | ![]() Mitochondrial protein import / response to injury involved in regulation of muscle adaptation / Protein lipoylation / Mitochondrial Fatty Acid Beta-Oxidation / Complex I biogenesis / RHOG GTPase cycle / Respiratory electron transport / protein insertion into mitochondrial inner membrane / blastocyst hatching / respiratory system process ...Mitochondrial protein import / response to injury involved in regulation of muscle adaptation / Protein lipoylation / Mitochondrial Fatty Acid Beta-Oxidation / Complex I biogenesis / RHOG GTPase cycle / Respiratory electron transport / protein insertion into mitochondrial inner membrane / blastocyst hatching / respiratory system process / psychomotor behavior / Mitochondrial protein degradation / mesenchymal stem cell proliferation / cellular response to oxygen levels / response to light intensity / respiratory chain complex / reproductive system development / mitochondrial [2Fe-2S] assembly complex / iron-sulfur cluster assembly complex / mitochondrial large ribosomal subunit binding / gliogenesis / mesenchymal stem cell differentiation / circulatory system development / negative regulation of non-canonical NF-kappaB signal transduction / cardiac muscle tissue development / neural precursor cell proliferation / positive regulation of mitochondrial membrane potential / [2Fe-2S] cluster assembly / oxygen sensor activity / adult walking behavior / response to hydroperoxide / stem cell division / cellular response to glucocorticoid stimulus / iron-sulfur cluster assembly / mitochondrial ATP synthesis coupled electron transport / NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) / dopamine metabolic process / adult behavior / positive regulation of ATP biosynthetic process / NADH dehydrogenase activity / mitochondrial respiratory chain complex I assembly / mitochondrial electron transport, NADH to ubiquinone / proton motive force-driven mitochondrial ATP synthesis / positive regulation of execution phase of apoptosis / respiratory chain complex I / NADH dehydrogenase (ubiquinone) activity / neuron development / quinone binding / cellular response to interferon-beta / ATP synthesis coupled electron transport / extrinsic apoptotic signaling pathway / negative regulation of reactive oxygen species biosynthetic process / tricarboxylic acid cycle / cellular response to retinoic acid / neurogenesis / Neutrophil degranulation / visual perception / muscle contraction / reactive oxygen species metabolic process / aerobic respiration / cerebellum development / respiratory electron transport chain / regulation of mitochondrial membrane potential / response to nicotine / mitochondrion organization / DNA damage response, signal transduction by p53 class mediator / response to cocaine / kidney development / fatty acid metabolic process / sensory perception of sound / response to hydrogen peroxide / monooxygenase activity / electron transport chain / mitochondrial membrane / brain development / mitochondrial intermembrane space / 2 iron, 2 sulfur cluster binding / multicellular organism growth / cognition / circadian rhythm / NAD binding / positive regulation of protein catabolic process / fatty acid biosynthetic process / cellular senescence / FMN binding / nervous system development / myelin sheath / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / response to ethanol / neuron apoptotic process / in utero embryonic development / response to oxidative stress / gene expression / response to hypoxia / electron transfer activity / mitochondrial inner membrane / nuclear speck / nuclear body / inflammatory response / mitochondrial matrix 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.84 Å | |||||||||
![]() | Grba, D.N. / Chung, I. / Bridges, H.R. / Agip, A.N.A. / Hirst, J. | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Investigation of hydrated channels and proton pathways in a high-resolution cryo-EM structure of mammalian complex I. 著者: Daniel N Grba / Injae Chung / Hannah R Bridges / Ahmed-Noor A Agip / Judy Hirst / ![]() 要旨: Respiratory complex I, a key enzyme in mammalian metabolism, captures the energy released by reduction of ubiquinone by NADH to drive protons across the inner mitochondrial membrane, generating the ...Respiratory complex I, a key enzyme in mammalian metabolism, captures the energy released by reduction of ubiquinone by NADH to drive protons across the inner mitochondrial membrane, generating the proton-motive force for ATP synthesis. Despite remarkable advances in structural knowledge of this complicated membrane-bound enzyme, its mechanism of catalysis remains controversial. In particular, how ubiquinone reduction is coupled to proton pumping and the pathways and mechanisms of proton translocation are contested. We present a 2.4-Å resolution cryo-EM structure of complex I from mouse heart mitochondria in the closed, active (ready-to-go) resting state, with 2945 water molecules modeled. By analyzing the networks of charged and polar residues and water molecules present, we evaluate candidate pathways for proton transfer through the enzyme, for the chemical protons for ubiquinone reduction, and for the protons transported across the membrane. Last, we compare our data to the predictions of extant mechanistic models, and identify key questions to answer in future work to test them. | |||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 3.5 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 3.7 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 228.1 KB | 表示 | |
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アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-NADH-ubiquinone oxidoreductase chain ... , 7種, 7分子 AHJKLMN
#1: タンパク質 | 分子量: 13251.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P03899, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
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#8: タンパク質 | 分子量: 36105.027 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P03888, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#10: タンパク質 | 分子量: 18656.100 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P03925, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#11: タンパク質 | 分子量: 10637.629 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P03903, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#12: タンパク質 | 分子量: 68547.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P03921, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#13: タンパク質 | 分子量: 51943.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P03911, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#14: タンパク質 | 分子量: 38800.230 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: P03893, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
-NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein ... , 7種, 7分子 BCDIQRe
#2: タンパク質 | 分子量: 24715.912 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q9DC70, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
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#3: タンパク質 | 分子量: 30191.307 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q9DCT2, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#4: タンパク質 | 分子量: 52720.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q91WD5, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#9: タンパク質 | 分子量: 24068.355 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q8K3J1, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#17: タンパク質 | 分子量: 19814.725 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#18: タンパク質 | 分子量: 13041.828 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#30: タンパク質 | 分子量: 12675.772 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-NADH dehydrogenase [ubiquinone] flavoprotein ... , 3種, 3分子 EFs
#5: タンパク質 | 分子量: 27318.336 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q9D6J6, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
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#6: タンパク質 | 分子量: 50904.152 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q91YT0, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
#44: タンパク質 | 分子量: 11833.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 2種, 3分子 GTU
#7: タンパク質 | 分子量: 79866.688 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: Q91VD9, NADH:ubiquinone reductase (H+-translocating) |
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#20: タンパク質 | 分子量: 17390.289 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-NADH dehydrogenase [ubiquinone] 1 alpha subcomplex subunit ... , 12種, 12分子 OPSVWXYZabqr
#15: タンパク質 | 分子量: 40657.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#16: タンパク質 | 分子量: 42588.129 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#19: タンパク質 | 分子量: 10932.675 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#21: タンパク質 | 分子量: 13380.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#22: タンパク質 | 分子量: 15311.858 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#23: タンパク質 | 分子量: 20025.127 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#24: タンパク質 | 分子量: 15130.416 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#25: タンパク質 | 分子量: 16881.588 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#26: タンパク質 | 分子量: 8149.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#27: タンパク質 | 分子量: 9338.867 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#42: タンパク質 | 分子量: 17154.453 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#43: タンパク質 | 分子量: 12637.629 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-NADH dehydrogenase [ubiquinone] 1 subunit ... , 2種, 2分子 cd
#28: タンパク質 | 分子量: 8636.023 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#29: タンパク質 | 分子量: 14185.692 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-NADH dehydrogenase [ubiquinone] 1 beta subcomplex subunit ... , 11種, 11分子 fghijklmnop
#31: タンパク質 | 分子量: 6965.109 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#32: タンパク質 | 分子量: 17463.727 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#33: タンパク質 | 分子量: 21742.197 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#34: タンパク質 | 分子量: 15582.122 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#35: タンパク質 | 分子量: 11982.437 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#36: タンパク質 | 分子量: 11714.240 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#37: タンパク質 | 分子量: 21903.828 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#38: タンパク質 | 分子量: 15105.287 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#39: タンパク質 | 分子量: 22020.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#40: タンパク質 | 分子量: 16360.804 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#41: タンパク質 | 分子量: 21054.832 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-糖 , 1種, 16分子 
#45: 糖 | ChemComp-LMT / |
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-非ポリマー , 15種, 320分子 




























#46: 化合物 | #47: 化合物 | ChemComp-SF4 / #48: 化合物 | ChemComp-HQH / | #49: 化合物 | #50: 化合物 | ChemComp-FMN / | #51: 化合物 | ChemComp-NA / | #52: 化合物 | ChemComp-CDL / #53: 化合物 | ChemComp-3PE / #54: 化合物 | ChemComp-MG / | #55: 化合物 | ChemComp-GTP / | #56: 化合物 | ChemComp-NDP / | #57: 化合物 | ChemComp-ZN / | #58: 化合物 | #59: 化合物 | ChemComp-MYR / | #60: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Mitochondrial respiratory complex I / タイプ: COMPLEX 詳細: Native purification of mitochondrial complex I from mouse hearts Entity ID: #1-#39, #41-#44 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 1 MDa / 実験値: YES | ||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.14 / 詳細: PH corrected at room temperature | ||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 4.1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: The grid was treated for 48 hours in an anaerobic glovebox in ethanol containing 5mM 11-mercaptoundecylhexaethyleneglycol, washed three times in ethanol and air dried prior to use. Note the hole sizes are R0.6/1. グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: UltrAuFoil | ||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: blot for 10 to 12 seconds before plunging |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company | |||||||||||||||||||||
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS | |||||||||||||||||||||
電子銃 | 電子線源: ![]() | |||||||||||||||||||||
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 47600 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 2200 nm / Cs: 2.7 mm | |||||||||||||||||||||
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER | |||||||||||||||||||||
撮影 | Imaging-ID: 1 / 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1
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電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV | |||||||||||||||||||||
画像スキャン |
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解析
ソフトウェア | 名称: UCSF ChimeraX / バージョン: 1.5/v9 / 分類: モデル構築 / URL: https://www.rbvi.ucsf.edu/chimerax/ / Os: macOS / タイプ: package | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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画像処理 | 詳細: The final reconstruction is combined from two branches with one coming from a K2 detector and the other from a Falcon III. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 63952 詳細: This is from an initial of 36,759 and 27,193 particles from the Falcon III and K2 detectors, respectively. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.84 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 41670 詳細: This is the combined particles from the two branches of data collected on the two different detectors 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 6ZR2 Accession code: 6ZR2 / Source name: PDB / タイプ: experimental model |